基于发酵液复合盐析的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种基于发酵原料液的吡咯喹啉醌二钠盐的分离纯化方法，包括如下步骤：(1)一次过滤；(2)二次过滤；(3)吡咯喹啉醌的提取；(4)一次盐析；(5)活性炭脱色；(6)二次盐析；(7)结晶。本发明专利技术所述的分离纯化方法工艺操作简单，成本低廉，能有效缩短产品纯化周期，而且产品回收率高，产品纯度可高达到99.5％。

【技术实现步骤摘要】
基于发酵液复合盐析的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法
本专利技术属于生物化工及分离提纯
，具体涉及一种从发酵液中获得吡咯喹啉醌二钠盐的分离纯化方法。
技术介绍
吡咯喹啉醌(PQQ)的化学名是4,5-二氢-4,5-二氧化-1-氢吡咯(2,3f)醌-2,7,9-三羧酸，结构式如下：常温下为晶体，但其光谱学特性比较特殊，PQQ在紫外249nm波长下的吸收系数是18400mol-1·cm-1。主要作为电子受体或供体参与酶催化的氧化还原过程，其化学结构中的邻位醌3个羧基是其重要的功能基团。PQQ是参与氧化还原反应的辅因子，作为许多酶的辅酶，如脱氢酶、氧化酶、水合酶和脱羧酶。PQQ含有能直接参与氧化还原反应的邻醌类结构，以上酶蛋白可以催化非磷酸化的底物发生氧化反应，如醇类、醛类和醛糖类。此外，PQQ还被认为是继吡啶和核黄素之后的第三类参与氧化还原反应的辅因子。20世纪60年代，人们发现了一类新的能氧化多种一级醇，并以甲基吩嗪硫酸甲酯为最初受氢体的脱氢酶，它们不依赖于已知脱氢酶辅酶或辅基。直到1979年Durine才分离得到这个辅酶，随后Salisbury通过X射线衍射技术阐明了这种辅酶的结构并本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于发酵原料液的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法，其特征在于，主要包括如下步骤：(1)吡咯喹啉醌发酵液第一次过滤，得到吡咯喹啉醌一次滤液；(2)二次过滤，过滤得到除杂滤液；(3)在磁性高分子微球存在下，提取分离吡咯喹啉醌溶液；(4)一次盐析，获得吡咯喹啉醌二钠盐粗品；(5)活性炭脱色，得到脱色滤液；(6)二次盐析，获得吡咯喹啉醌三钠盐；(7)调酸，结晶，得到吡咯喹啉醌二钠盐；以及，任选地包括将所得吡咯喹啉醌二钠盐重结晶的步骤。

【技术特征摘要】
1.一种基于发酵原料液的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法，其特征在于，主要包括如下步骤：(1)吡咯喹啉醌发酵液第一次过滤，得到吡咯喹啉醌一次滤液；(2)二次过滤，过滤得到除杂滤液；(3)在磁性高分子微球存在下，提取分离吡咯喹啉醌溶液；(4)一次盐析，获得吡咯喹啉醌二钠盐粗品；(5)活性炭脱色，得到脱色滤液；(6)二次盐析，获得吡咯喹啉醌三钠盐；(7)调酸，结晶，得到吡咯喹啉醌二钠盐；以及，任选地包括将所得吡咯喹啉醌二钠盐重结晶的步骤。2.如权利要求1所述的吡咯喹啉醌二钠盐分离纯化方法，其特征在于，包括如下具体步骤：(1)一次过滤：吡咯喹啉醌发酵液通过膜分离技术进行第一次过滤，得到吡咯喹啉醌一次滤液；(2)二次过滤：取上步得到的一次滤液，用酸调pH至4.0-4.3，除杂，搅拌1-1.5h后过滤，其中，滤膜预涂一层介孔二氧化硅，过滤得到除杂滤液；(3)吡咯喹啉醌的提取：向上步得到的除杂滤液中滴加浓硫酸，使pH至2.4-3.0，加入聚乙烯醇磁性微球进行吸附，吸附反应1-3h后吡咯喹啉醌接枝于磁性微球上，用磁场分离磁性微球；将磁性微球分散在水中，调pH至10-11发生水解反应，1-2h后用磁场分离磁性微球，得到吡咯喹啉醌溶液；(4)一次盐析：往吡咯喹啉醌溶液中加入无机钠盐或有机钠盐至盐浓度达到1.0-1.5mol/L，用硫酸调pH至2.8-3.8，使之成二钠盐形态析出，搅拌2-3h充分盐析后过滤，过滤结束用pH＝3.0-3.5的酸水洗涤滤饼；(5)活性炭脱色：将一...

【专利技术属性】
技术研发人员：张茂华，蒋永飞，赖庆云，赵正国，陈亮，
申请(专利权)人：福建康鸿生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35