控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子制造技术

通过将存在于CH1和CL的界面的氨基酸取代成带电荷的氨基酸，可以抑制CH1与CL的缔合，与使用向CH3中单独导入knob(突起)和hole(空隙)的修饰相比，高效率地形成了异源分子。

Antigen-binding molecules that control the association of heavy and light chains

By replacing the amino acids present at the interface between CH1 and CL with charged amino acids, the association between CH1 and CL can be inhibited. Compared with the modification of knob (protrusion) and hole (gap) introduced into CH3 alone, heterologous molecules can be formed efficiently.

【技术实现步骤摘要】
控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子本申请是国际申请号PCT/JP2012/078103，国际申请日2012年10月31日，进入中国国家阶段日期为2014年6月27日，中国国家阶段申请号为201280065166.0，专利技术名称为“控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子”的分案申请。
本专利技术涉及控制了重链与轻链的缔合的抗体、控制了重链与轻链的缔合的抗体的制备方法、抗体的重链与轻链的缔合控制方法、以及含有该抗体作为有效成分的药物组合物等。
技术介绍
作为具有人恒定区的IgG型双特异性抗体(单臂具有针对抗原A的结合特异性、而另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的具有人恒定区的IgG型抗体)的制作方法，迄今为止报道了几种方法。通常，IgG型双特异性抗体包含两种H链(即针对抗原A的H链和针对抗原B的H链)和两种L链(即针对抗原A的L链和针对抗原B的L链)。使这样的IgG型双特异性抗体表达时，由于使两种H链和两种L链表达，所以作为H2L2的组合，认为有10种组合。其中一种是具有目标结合特异性(单臂具有针对抗原A的结合特异性、另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的IgG)的组合。因此，为了获得目本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗原结合分子，其是控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子，其中在该抗原结合分子中，重链和轻链中的以下的(a)所示氨基酸残基组是电荷相互排斥的氨基酸残基：(a)重链恒定区CH1所包含的EU编号第175位的氨基酸残基、和轻链恒定区CL所包含的EU编号第160位的氨基酸残基；其中，上述电荷相互排斥的氨基酸残基选自以下(X)和(Y)任一组中所包含的氨基酸残基：(X)谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；和(Y)赖氨酸(K)，精氨酸(R)或组氨酸(H)。

【技术特征摘要】
2011.10.31 JP 2011-2388731.抗原结合分子，其是控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子，其中在该抗原结合分子中，重链和轻链中的以下的(a)所示氨基酸残基组是电荷相互排斥的氨基酸残基：(a)重链恒定区CH1所包含的EU编号第175位的氨基酸残基、和轻链恒定区CL所包含的EU编号第160位的氨基酸残基；其中，上述电荷相互排斥的氨基酸残基选自以下(X)和(Y)任一组中所包含的氨基酸残基：(X)谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；和(Y)赖氨酸(K)，精氨酸(R)或组氨酸(H)。2.权利要求1所述的抗原结合分子，进一步地其中以下的(b)至(d)的一项或多项中所示氨基酸残基组中的氨基酸残基是电荷相互排斥的氨基酸残基：(b)CH1所包含的EU编号第147位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第131位的氨基酸残基；(c)CH1所包含的EU编号第147位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第180位的氨基酸残基；和(d)CH1所包含的EU编号第213位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第123位的氨基酸残基；其中，上述电荷相互排斥的氨基酸残基选自以下(X)和(Y)任一组中所包含的氨基酸残基：(X)谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；和(Y)赖氨酸(K)，精氨酸(R)或组氨酸(H)。3.权利要求1-2中任一项所述的抗原结合分子，进一步地其中形成重链可变区和轻链可变区之间的界面的两个或更多氨基酸残基是所述电荷相互排斥的氨基酸残基。4.权利要求1-2任一项所述的抗原结合分子，其中该抗原结合分子为双特异性抗体。5.控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子的制备方法，该制备方法包括下述的步骤(1)-(3)：(1)修饰编码重链恒定区CH1和轻链恒定区CL的核酸，使以下的(a)所示氨基酸残基组电荷相互排斥：(a)CH1所包含的EU编号第175位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第160位的氨基酸残基；(2)将上述修饰了的核酸导入宿主细胞中，并培养宿主细胞，使该宿主表达该核酸；和(3)从上述宿主细胞的培养物中回收抗原结合分子，其中，所述方法在上述步骤(1)中包括如下步骤：修饰核酸，使电荷相互排斥的氨基酸残基选自以下(X)和(Y)任一组中所包含的氨基酸残基：(X)谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)；和(Y)赖氨酸(K)，精氨酸(R)或组氨酸(H)。6.权利要求5所述的抗原结合分子的制备方法，其在上述步骤(1)中进一步包括如下步骤：修饰核酸，使以下的(b)-(d)中一项或多项所示氨基酸残基组的氨基酸残基电荷...

【专利技术属性】
技术研发人员：仓持太一，川添明里，广庭奈绪香，井川智之，
申请(专利权)人：中外制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP