控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子制造技术

通过将存在于CH1和CL的界面的氨基酸取代成带电荷的氨基酸，可以抑制CH1与CL的缔合，与使用向CH3中单独导入knob(突起)和hole(空隙)的修饰相比，高效率地形成了异源分子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子
本专利技术涉及控制了重链与轻链的缔合的抗体、控制了重链与轻链的缔合的抗体的制备方法、抗体的重链与轻链的缔合控制方法、以及含有该抗体作为有效成分的药物组合物等。
技术介绍
作为具有人恒定区的IgG型双特异性抗体(单臂具有针对抗原A的结合特异性、而另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的具有人恒定区的IgG型抗体)的制作方法，迄今为止报道了几种方法。通常，IgG型双特异性抗体包含两种H链(即针对抗原A的H链和针对抗原B的H链)和两种L链(即针对抗原A的L链和针对抗原B的L链)。使这样的IgG型双特异性抗体表达时，由于使两种H链和两种L链表达，所以作为H2L2的组合，认为有10种组合。其中一种是具有目标结合特异性(单臂具有针对抗原A的结合特异性、另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的IgG)的组合。因此，为了获得目标双特异性抗体，需要从10种抗体中纯化出一种目标抗体，纯化的效率非常低且难以进行。作为解决该问题的方法，有人报道了通过对IgGH链的CH3区实施氨基酸取代，使针对抗原A的H链和针对抗原B的H链的异源组合的IgG优先分泌的方法(专利文献1、2、3、4本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗原结合分子，其是控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子，在该抗原结合分子中，重链和轻链中的选自以下的(a)～(c)所示氨基酸残基组的一组或两组以上的氨基酸残基是电荷相互排斥的氨基酸残基：(a) 重链恒定区CH1所包含的氨基酸残基且EU编号第147位的氨基酸残基、和轻链恒定区CL所包含的氨基酸残基且EU编号第180位的氨基酸残基；(b) CH1所包含的氨基酸残基且EU编号第147位的氨基酸残基、和CL所包含的氨基酸残基且EU编号第131位的氨基酸残基；(c) CH1所包含的氨基酸残基且EU编号第175位的氨基酸残基、和CL所包含的氨基酸残基且EU编号第160位的氨基酸残基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.10.31 JP 2011-2388731.抗原结合分子，其是控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子，在该抗原结合分子中，重链和轻链中的以下的(a)所示氨基酸残基组是电荷相互排斥的氨基酸残基：(a)重链恒定区CH1所包含的EU编号第147位的氨基酸残基、和轻链恒定区CL所包含的EU编号第180位的氨基酸残基；其中，上述电荷相互排斥的氨基酸残基选自谷氨酸(E)和赖氨酸(K)。2.权利要求1所述的抗原结合分子，而且，以下的(b)～(d)的一项或多项中所示氨基酸残基组的氨基酸残基是电荷相互排斥的氨基酸残基：(b)CH1所包含的EU编号第147位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第131位的氨基酸残基；(c)CH1所包含的EU编号第175位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第160位的氨基酸残基；和(d)CH1所包含的EU编号第213位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第123位的氨基酸残基；其中，上述电荷相互排斥的氨基酸残基选自谷氨酸(E)和赖氨酸(K)。3.权利要求1-2中任一项所述的抗原结合分子，而且，形成重链可变区和轻链可变区的界面的两个残基以上的氨基酸残基是所述电荷相互排斥的氨基酸残基。4.权利要求1-2任一项所述的抗原结合分子，该抗原结合分子为双特异性抗体。5.控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子的制备方法，该制备方法包括下述的步骤(1)-(3)：步骤(1)，修饰编码重链恒定区CH1和轻链恒定区CL的核酸，使以下的(a)所示氨基酸残基组电荷相互排斥：(a)CH1所包含的EU编号第147位的氨基酸残基、和CL所包含的EU编号第180位的氨基酸残基；步骤(2)，将上述修饰了的核酸导入宿主细胞中，并培养宿主细胞，使该核酸表达；步骤(3)，从上述宿主细胞的培养物中回收抗原结合分子，其中，所述方法在上述步骤(1)中包括如下步骤：修饰核酸，使电荷相互排斥的氨基酸残基选自谷氨酸(E)和赖氨酸(K)。6.权利要求5所述的抗原结合分子的制备方法，其中，在上述步骤(1)中进一步包括如下步骤：修饰核酸，使以下的(b)-(d)中一项或多项所示氨基酸残基组的氨基酸残基电...

【专利技术属性】
技术研发人员：仓持太一，川添明里，广庭奈绪香，井川智之，
申请(专利权)人：中外制药株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP