The invention provides a detection method for E. coli with accurate detection results and high detection efficiency. A special bacteriostat was used to improve the colour effect of E. coli by heat treatment, bacteriostasis and cold treatment of samples. The accuracy of detection results was improved and the detection rate of E. coli in samples was greatly improved. At the same time, it can also estimate the number of E. coli and preliminarily determine the quantity of E. coli in food.
【技术实现步骤摘要】
一种食品中大肠杆菌的快速检测和估数方法
本申请属于食品病菌检测领域，具体涉及一种食品中大肠杆菌的快速检测和估数方法。
技术介绍
大肠杆菌是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜(禽)，常引起严重腹泻和败血症。目前，我国常规检测方法大多要经过前增菌、选择性增菌、选择性培养、生化鉴定、血清学反应等过程。这些实验操作繁琐，需耗时5-6d，检出率低，给出入境检验检疫、食品卫生监督等带来困难，不但影响经济发展，而且不利于及时诊断和控制流行病的传染，不能满足食品中病原菌快速检测的现实需要。另外，传统培养基的选择效果不明显，可疑菌落不易识别，当有其他的菌群存在时会影响大肠杆菌的检出，给检测技术人员带来极大的工作量与不确定性。近年来，分子生物学的检测技术已被广泛应用，使大肠杆菌的快速检测有了很大发展。但是这些技术需要的设备费用较大、技术要求高、操作复杂，在基层检测机构不易推广。而显色培养基因为将微生物的分离与鉴定合二为一，具...
【技术保护点】
1.一种食品中大肠杆菌的快速检测和估数方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、配置牛肉膏蛋白胨培养基：取新鲜牛心180g，用刀剁成肉末后，加入400ml蒸馏水、1.5g牛肉膏、5.5g蛋白胨、2.5g氯化钠、3.5g琼脂，用10％盐酸调整PH到8.1；并于121℃灭菌30min，冷却至常温；然后，对培养基和培养室紫外灭菌20min，关灯90min后使用。(2)、第一次热处理：称量待测样品10g至含牛肉膏蛋白胨培养基的锥形瓶，先35±1℃培养1h，然后40±1℃培养1.5h，45±1℃培养1h；(3)、配置增菌剂、增菌：增菌剂配方为：按重量份计，1％酵母粉、2％氯化钠、1.5...
【技术特征摘要】
1.一种食品中大肠杆菌的快速检测和估数方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)、配置牛肉膏蛋白胨培养基：取新鲜牛心180g，用刀剁成肉末后，加入400ml蒸馏水、1.5g牛肉膏、5.5g蛋白胨、2.5g氯化钠、3.5g琼脂，用10％盐酸调整PH到8.1；并于121℃灭菌30min，冷却至常温；然后，对培养基和培养室紫外灭菌20min，关灯90min后使用。(2)、第一次热处理：称量待测样品10g至含牛肉膏蛋白胨培养基的锥形瓶，先35±1℃培养1h，然后40±1℃培养1.5h，45±1℃培养1h；(3)、配置增菌剂、增菌：增菌剂配方为：按重量份计，1％酵母粉、2％氯化钠、1.5％亚碲酸钾、2％氢氧化钠、1.2％乙酰胆碱，其余为蒸馏水；增菌剂pH为8.9，使用前需121℃灭菌30min；将经过第一次热处理的样品混合物加入到生理盐水中，制成样品质量浓度为10％的样品匀液；按1∶150的质量比将增菌剂溶于蒸馏水中，得增菌液；将样品匀液与增菌液按1∶5的体积比混匀，37℃震荡培养6h，得样品增菌液；(4)、第一次冷处理：将上一步骤得到的样品增菌液直接放入4℃冰箱，冷却2.5h后升至室温；(5)、第二次热处理：然后将样品增菌液倒入已灭菌的培养皿中，液面高度为1cm，先35℃培养...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨纯佳，张娟，綦艳，
申请(专利权)人：广东产品质量监督检验研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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