一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术涉及一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒及其使用方法。本发明专利技术提供了一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，所述试剂盒包括核酸分离与纯化试剂，DNA亚硫酸盐转化试剂，KRAS基因突变检测试剂，SDC2和SFRP2基因甲基化检测试剂，粪便隐血检测试剂；其中核酸分离与纯化试剂用于分离及纯化出粪便样本中的人源DNA；DNA亚硫酸盐转化试剂用于将纯化的部分人源DNA进行亚硫酸盐转化，用于后续SDC2和SFRP2基因甲基化水平的检测。本发明专利技术检测结直肠癌的灵敏度可达90％以上，特异性85％左右，能够实现结直肠癌的高灵敏度和高特异性检测；本发明专利技术能够检测大多数结直肠癌前病变，实现结直肠癌超早期检测，且在用于辅助临床诊断时，可大大降低临床现有方法的漏诊漏检率。

【技术实现步骤摘要】
一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒及其使用方法
本专利技术属于生物技术及诊断研究领域，更具体的说，它涉及一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
结直肠癌在世界范围内的发病率和死亡率在所有癌症中分别排名第三位和第四位，每年大概有136万结直肠癌新发病例和69.4万结直肠癌死亡病例。在中国，癌症发病率和死亡率在不断升高，从2010年起，癌症就成了死亡的主要原因。据估计，2015年，中国结直肠癌新发病例达到37.63万，死亡病例达到19.10万，分别排在所有癌症的第五位。结直肠癌主要发生在50岁以上的人群，且年龄越大，患癌风险越高。绝大多数结直肠肿瘤的发展都经历多个阶段，包括一系列组织学、形态学、基因变异的逐渐积累。因此，这就给癌前病变的筛查和检测提供了有利条件，从而实现结直肠癌的超早期检测和早诊早治，降低结直肠癌的发病率和死亡率。目前有很多结直肠癌筛查方法，它们都具有各自的优势和劣势。比如，肠镜能够实现全结肠的可视化，非常灵敏地检测远端和近端的病变，且在检测的同时去除病变，但它属于侵入性检测，而且需要进行复杂的肠道准备，另外，还伴随肠穿孔以及出血的风险，因此，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括核酸分离与纯化试剂，DNA亚硫酸盐转化试剂，KRAS基因突变检测试剂，SDC2和SFRP2基因甲基化检测试剂，粪便隐血检测试剂；其中核酸分离与纯化试剂用于分离及纯化出粪便样本中的人源DNA；DNA亚硫酸盐转化试剂用于将纯化的人源DNA进行亚硫酸盐转化，用于后续SDC2和SFRP2基因甲基化的检测。

【技术特征摘要】
1.一种用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括核酸分离与纯化试剂，DNA亚硫酸盐转化试剂，KRAS基因突变检测试剂，SDC2和SFRP2基因甲基化检测试剂，粪便隐血检测试剂；其中核酸分离与纯化试剂用于分离及纯化出粪便样本中的人源DNA；DNA亚硫酸盐转化试剂用于将纯化的人源DNA进行亚硫酸盐转化，用于后续SDC2和SFRP2基因甲基化的检测。2.根据权利要求1所述的用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，所述KRAS基因突变检测试剂中包含能够检测KRAS基因7种突变型的试剂；检测试剂含预混试剂、水，以及KRAS基因7种突变形式和内参基因(ACTB)的引物和探针。3.根据权利要求1所述的用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，所述SDC2和SFRP2基因甲基化检测试剂中包含预混试剂、水，以及两个基因和内参基因(GAPDH)的引物和探针，其序列分别为：SDC2正向引物：AATAAGTGAGAGGGCGTCGCSDC2反向引物：AAACTCGAACTCGAAACTCGSDC2探针：AACGCTCGCTTCCTCCTCCTACGCSFRP2正向引物：CGCGTTTTAGTCGTCGGTTGTTASFRP2反向引物：AACGAAACGACCGAAATTCGAASFRP2探针：TATCCCGAACCCGCTCTCTTCGCTAGAPDH正向引物：GGAGGTAATTAGGATGGTGTGGTTGAPDH反向引物：CATCRCCCCACTTAATTTTAAAAAGAPDH探针：TGGGTATATGGTAATTTTGT。4.根据权利要求1所述的用于结直肠癌及癌前病变检测的试剂盒，其特征在于，所述粪便隐血检测试剂包含能够定量检测粪便中血红蛋白水平...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军一，肖雯，刘杰，王巍，舒平，尚慧捷，
申请(专利权)人：杭州和壹基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33