脂质体疫苗制造技术

适合于针对一种或多种不同病原体来预防、治疗或免疫的免疫原性剂，其包含展示在脂质囊泡上的一种或多种病原体衍生的蛋白质、其片段、变体或衍生物和位于囊泡内空间的诸如白喉类毒素的载体蛋白质。免疫原性剂可适合于鼻内施用且能够引起粘膜免疫应答。免疫原性剂可进一步包含先天免疫的激活剂，例如海藻糖‑6,6′‑二山嵛酸酯(TDB)和/或诸如脱氧胆酸钠的胆汁盐。所述一种或多种病原体可以是A群链球菌、病毒或钩虫。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】脂质体疫苗
本专利技术涉及传染性疾病的预防和治疗。更具体地，本专利技术涉及通过诱导粘膜免疫应答来治疗或预防传染性疾病和病症的脂质体疫苗。
技术介绍
已经证明，全身免疫通过全身部位的血清免疫球蛋白(Ig)在预防由各种不同的病原体造成的疾病中是有效的，但在预防粘膜部位的定殖由此预防人与人之间的传播方面是无效的。因此，对于一些疾病，全身疫苗接种对于诱导免疫不是最佳的途径。相比之下，经鼻给药的抗多种生物体的粘膜疫苗在诱导全身和粘膜隔室的抗原特异性免疫应答方面是有效的。由于这种双层保护性免疫，粘膜疫苗接种对于抵抗全身性和粘膜感染是理想的策略，其具有的预防粘膜定殖的额外益处还会抑制通过来自上呼吸道的飞沫和气溶胶的传播。粘膜疫苗接种还具有经济上的优势，这是疫苗开发的一个重要的考量因素。由于通过鼻途径给予疫苗的便捷性，可以避免使用针具。无痛递送有助于更好的患者依从性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供引发对病原体的粘膜免疫应答的免疫原性剂和递送系统。在广义上，本专利技术涉及借助还包含诸如白喉类毒素(DT)的载体蛋白质的脂质囊泡，通过递送免疫原性蛋白、片段或变体，促进或诱发粘膜免疫。合适地，载体蛋白质位于囊泡内空间。在具体的形式中，单一免疫原性剂包括来自多种不同病原体的多种不同的免疫原性蛋白、片段或变体。本专利技术的一方面提供了适于施用于哺乳动物的免疫原性剂，所述免疫原性剂包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物，脂质囊泡和载体蛋白质或其片段或变体。在一个实施方案中，载体蛋白质是白喉类毒素(DT)。在一个实施方案中，免疫原性剂是包括来自不同病原体的多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物的脂质囊泡。本专利技术的另一方面提供了包含前述方面的免疫原性剂的组合物。在一个实施方案中，组合物包含免疫原性剂，所述免疫原性剂包括脂质囊泡，所述脂质囊泡包含相同或单种病原体的或来自相同或单种病原体的多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。在一个实施方案中，组合物包含多种不同的免疫原性剂，所述免疫原性剂各自包含不同的病原体的或来自不同的病原体的一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。在一个实施方案中，组合物包含包括脂质囊泡的单一免疫原性剂，所述脂质囊泡包含不同的病原体的或来自不同的病原体的多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。在一个实施方案中，组合物包含多种不同的免疫原性剂，所述免疫原性剂各自包含不同病原体的或来自不同病原体的一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。本专利技术的另一方面提供了在哺乳动物中引起针对一种或多种病原体的免疫应答的方法，所述方法包括下述步骤：向哺乳动物施用包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物、脂质囊泡和白喉类毒素(DT)或其片段或变体的免疫原性剂，或包含其的组合物，从而在哺乳动物中引起针对所述一种或多种病原体的免疫应答。本专利技术的另一方面提供了针对一种或多种病原体免疫哺乳动物的方法，所述方法包括下述步骤：向哺乳动物施用包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物、脂质囊泡和白喉类毒素(DT)或其片段或变体的免疫原性剂，或包含其的组合物，从而针对所述一种或多种病原体免疫哺乳动物。本专利技术的仍另一方面提供了在哺乳动物中治疗或预防被一种或多种病原体感染的方法，所述方法包括下述步骤：向哺乳动物施用包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物、脂质囊泡和白喉类毒素(DT)或其片段或变体的免疫原性剂，或包含其的组合物，从而在哺乳动物中治疗或预防被所述一种或多种病原体感染。合适地，免疫原性剂引起粘膜免疫应答。典型地，粘膜免疫应答包括产生IgA。在优选形式中，免疫原性剂经鼻内施用。合适地，免疫原性蛋白、其片段或变体展示于脂质囊泡的表面上。合适地，白喉类毒素(DT)或其片段或变体位于囊泡中的囊泡内空间。在优选的实施方案中，所述脂质囊泡是脂质体。合适地，免疫原性蛋白片段或变体是脂化的。在某些实施方案中，在免疫原性蛋白片段或变体的N-末端的赖氨酸(K)残基是脂化的。在优选形式中，N-末端的赖氨酸(K)残基通过α和ε氨基团被脂化。在一些实施方案中，每一脂质都是C16脂肪酸，诸如棕榈酸。优选地，N-末端的赖氨酸(K)残基位于免疫原性蛋白片段或变体的N-末端的间隔子氨基酸序列中。在一个特定实施方案中，所述免疫原性蛋白、片段或变体是A群链球菌M蛋白、其片段、变体或衍生物。在另外的或可选的实施方案中，免疫原性蛋白是促进嗜中性粒细胞活性恢复或增强的试剂。在具体实施方案中，M蛋白片段为M蛋白的保守区域或者包含M蛋白的保守区域。在一个实施方案中，所述片段是免疫原性片段，其包含p145肽或者被包含于p145肽中。在具体实施方案中，所述免疫原性片段位于J8肽或其变体内，或者包含J8肽或其变体。优选地，J8肽包含以下氨基酸序列或者基本由以下氨基酸序列组成：QAEDKVKQSREAKKQVEKALKQLEDKVQ(SEQIDNO:1)。在一个广泛实施方案中，促进嗜中性粒细胞活性恢复或增强的试剂是蛋白SpyCEP或其片段。在优选实施方案中，SpyCEP片段包含以下氨基酸序列或者基本由以下氨基酸序列组成：NSDNIKENQFEDFDEDWENF(SEQIDNO:2)。在一个具体实施方案中，SpyCEP片段和M蛋白片段可以融合以形成单一的嵌合肽。在一个实施方案中，所述嵌合肽为以下氨基酸序列或其变体，可包含以下氨基酸序列或其变体，或者基本由以下氨基酸序列或其变体组成：NSDNIKENQFEDFDEDWENFQAEDKVKQSREAKKQVEKALKQLEDKVQ(SEQIDNO:3)。在一个具体的实施方案中，免疫原性蛋白、片段或变体是流感病毒的。流感病毒可以是甲型流感病毒。非限制性例子是以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列MSLLTEVETPIRNEWGCRCNDSSD(SEQIDNO:4)。流感病毒可以是乙型流感病毒。非限制性例子是以下氨基酸序列、或包含以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列PAKLLKERGFFGAIAGFLE(SEQIDNO:5)。在一个具体的实施方案中，免疫原性蛋白、片段或变体是鼻病毒的。非限制性例子是以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列GAQVSTQKSGSHENQNILTNGSNQTFTVINY(SEQIDNO:6)。另一非限制性例子是以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列GAQVSRQNVGTHSTQNMVSNGSSL(SEQIDNO:7)。在一个具体的实施方案中，免疫原性蛋白、片段或变体是蠕虫的，比如钩虫的。非限制性例子是以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列TSLIAGLKAQVEAIQKYIGAEL(SEQIDNO:8)。在一些实施方案中，免疫原性剂可以进一步包含先天免疫的激活剂。所述先天免疫激活剂可以靶向C型凝集素，例如巨噬细胞可诱导的Ca2+依赖性(C型)凝集素(“Mincle”)。先天免疫的激活剂可以是糖脂类的。非限制性实例包括糖脂，例如分枝杆菌索状因子海藻糖-6,6'-二霉菌酸酯(TDM)和/或其合成的类似物海藻糖-6,6'-二山嵛酸酯(TD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.适合于向哺乳动物施用的免疫原性剂，所述免疫原性剂包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物，脂质囊泡以及载体蛋白质，或其片段或变体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.27 AU 2015904403;2016.03.18 AU 20169010261.适合于向哺乳动物施用的免疫原性剂，所述免疫原性剂包含一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物，脂质囊泡以及载体蛋白质，或其片段或变体。2.如权利要求1所述的免疫原性剂，其适合于鼻内施用。3.如权利要求1或权利要求2所述的免疫原性剂，其能够在哺乳动物中引起粘膜免疫应答。4.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述载体蛋白质位于囊泡内空间。5.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述载体蛋白质为白喉类毒素(DT)。6.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物展示在所述脂质囊泡的表面上。7.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物被融合至或缀合至所述载体蛋白质。8.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述脂质囊泡是脂质体。9.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其包含相同病原体的或来自相同病原体的一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。10.如权利要求1-8中任一项所述的免疫原性剂，其包含多种不同病原体中的每一种的或来自多种不同病原体中的每一种的一种或多种免疫原性蛋白、其片段、变体或衍生物。11.如权利要求9或权利要求10所述的免疫原性剂，其中所述病原体是细菌、病毒或蠕虫。12.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、片段或变体是A群链球菌细菌M蛋白、其片段、变体或衍生物。13.如权利要求12所述的免疫原性剂，其中所述片段位于J8肽或其变体之内，或者包含J8肽或其变体。14.如权利要求13所述的免疫原性剂，其中所述J8肽是以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列、或者基本由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列QAEDKVKQSREAKKQVEKALKQLEDKVQ(SEQIDNO:1)。15.如权利要求1-14中任一项所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白是促进中性粒细胞活性恢复或增强的试剂，或包含促进中性粒细胞活性恢复或增强的试剂。16.如权利要求15所述的免疫原性剂，其中所述促进中性粒细胞活性恢复或增强的试剂是蛋白质，为SpyCEP或其片段。17.如权利要求16所述的免疫原性剂，其中所述SpyCEP片段为以下氨基酸序列、包含以下氨基酸序列、或基本由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列NSDNIKENQFEDFDEDWENF(SEQIDNO:2)。18.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、其片段或变体包含作为单一嵌合肽的SpyCEP片段和M蛋白片段。19.如权利要求18所述的免疫原性剂，其中所述嵌合肽为以下氨基酸序列或其变体、包含以下氨基酸序列或其变体、或基本由以下氨基酸序列或其变体组成：氨基酸序列NSDNIKENQFEDFDEDWENFQAEDKVKQSREAKKQVEKALKQLEDKVQ(SEQIDNO:3)。20.如前述任一项权利要求所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、片段或变体是流感病毒的免疫原性蛋白、片段或变体。21.如权利要求20所述的免疫原性剂，其中所述免疫原性蛋白、片段或变体是以下氨基酸序列、包括以下氨基酸序列或基本上由以下氨基酸序列组成：氨基酸序列MSLLTEVETPIRNEWGCRCNDSSD(SEQIDNO:4...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔·戈德，麦福思·扎曼，
申请(专利权)人：格里菲斯大学，
类型：发明
国别省市：澳大利亚,AU