针对淋球菌感染的免疫原性蛋白制造技术

本发明专利技术尤其涉及一种淋病奈瑟菌的奈瑟菌肝素结合抗原(NHBA)蛋白的免疫原性片段(SEQ ID NO:1)，其用于预防和治疗淋病奈瑟菌或淋球菌或脑膜炎球菌相关疾病和疾患。在一些实施方案中，所述免疫原性片段对应于所述蛋白质的C末端片段(SEQ ID NO:2)。NO:2)。NO:2)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对淋球菌感染的免疫原性蛋白


[0001]本专利技术涉及一种用于预防和治疗淋病奈瑟菌或淋球菌相关疾病和病症的免疫原性肽。

技术介绍

[0002]淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)的多重耐药菌株的持续出现是对淋病的性传播感染(1,2)的管理的重大挑战，世界卫生组织(3)、疾病控制中心(4)和澳大利亚国家抗微生物耐药性(AMR)战略(5)已将淋病奈瑟菌作为需要立即采取行动的紧急公共卫生威胁列为优先事项。据估计，全世界每年有超过1.06亿例淋病病例(6)，并且感染率正在上升(例如，在过去五年中，美国的病例增加了67％(7)，澳大利亚增加了80％(8))。淋病奈瑟菌感染的结局因感染部位和性别而异(在9,10中进行了综述)，包括无症状和局部症状感染，但如果未被诊断和/或治疗，淋病可导致严重的后遗症，诸如盆腔炎性疾病、妊娠和新生儿并发症以及不育。淋病奈瑟菌感染也会增加感染和传播HIV的风险。
[0003]由于其高患病率，它可能引起的严重后遗症，以及治疗淋病奈瑟菌的多重耐药菌株的难度越来越大，因此迫切需要开发预防感染的疫苗。然而，开发淋球菌疫苗存在着各种挑战，包括淋病奈瑟菌表面结构的高水平相位和抗原变异，以及感染后没有保护性免疫的事实，这意味着没有确定的保护相关性来引导临床前疫苗研究(在9,11中综述)。

技术实现思路

[0004]令人惊讶的是，本专利技术人发现，施用来自淋病奈瑟菌的奈瑟菌肝素结合抗原(NHBA)蛋白的C末端片段可以引发比全长蛋白具有更高的杀菌和调理吞噬杀伤水平的抗体的产生，在具有相对较低的NHBA表达的淋球菌菌株中尤其如此。
[0005]因此，在广义上，本专利技术涉及NHBA蛋白诸如在SEQ ID NO:1中列出的蛋白质或其具有免疫原性的并且可以引发针对淋病奈瑟菌或淋球菌的免疫应答的片段、变体或衍生物。在优选的形式中，NHBA蛋白是包含SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物的C末端片段。
[0006]本专利技术的第一方面提供了淋病奈瑟菌的分离的奈瑟菌肝素结合抗原(NHBA)蛋白的免疫原性片段。
[0007]适当地，分离的NHBA蛋白包含SEQ ID NO:1中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物。
[0008]在特定的实施方案中，免疫原性片段包含分离的NHBA蛋白诸如SEQ ID NO:2或其片段、变体或衍生物的C末端片段。
[0009]适当地，SEQ ID NO:2的变体或衍生物包含其残基3、5、6、9、20、50、57、60、61、69、71、75、76、83、88、89、91、92、93、113、135、150、152、153、167、173、177、180和181的一个或多个氨基酸取代。更具体地说，SEQ ID NO:2的一个或多个氨基酸取代可以选自由A3V、I5M、P6L、P9S、G20E、P50S、R57S、G60A、E61K、A69V、T71A、N75S、G76R、M83T、P88S、Y89C、S91T、
G92R、G93S、S113G、T135N、G150D、A152V、G153D、A167T、G173S、G177D、D180E、R181Q及其任何组合组成的组。
[0010]在一些实施方案中，免疫原性片段包含分离的NHBA蛋白的一个或多个肝素结合残基和/或一个或多个活性位点残基。在其他实施方案中，免疫原性片段不包含分离的NHBA蛋白的肝素结合残基和/或活性位点残基。
[0011]在第二方面，本专利技术在于包含根据第一方面的一种或多种免疫原性片段的分离的蛋白质。
[0012]在第三方面，本专利技术涉及一种分离的核酸，其包含编码第一方面的免疫原性片段或第二方面的分离的蛋白质的核苷酸序列，或其包含与其互补的核苷酸序列。
[0013]在第四方面，本专利技术提供了包含第三方面的分离的核酸的基因构建体。
[0014]在第五方面，本专利技术在于包含第四方面的基因构建体的宿主细胞。
[0015]在第六方面，本专利技术涉及产生第一方面的分离的免疫原性片段或第二方面的分离的蛋白质的方法，所述方法包括：(i)培养第五方面的宿主细胞；以及(ii)从步骤(i)中培养的所述宿主细胞分离所述免疫原性片段或蛋白质。
[0016]在第七方面，本专利技术提供了一种抗体或抗体片段，其结合第一方面的免疫原性片段或第二方面的分离的蛋白质或者针对所述免疫原性片段或分离的蛋白质产生。
[0017]在第八方面，本专利技术在于一种组合物，其包含第一方面的一种或多种免疫原性片段、第二方面的分离的蛋白质、第三方面的分离的核酸、第四方面的基因构建体、第五方面的宿主细胞和/或第七方面的抗体或抗体片段，任选地连同药学上可接受的稀释剂、载体或赋形剂。
[0018]适当地，本组合物是免疫原性组合物，诸如疫苗。
[0019]在第九方面，本专利技术提供了一种引发针对受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌的免疫应答的方法，所述方法包括给受试者施用：第一方面的一种或多种免疫原性片段；第二方面的分离的蛋白质；第三方面的分离的核酸；第四方面的基因构建体；第五方面的宿主细胞；第七方面的抗体或抗体片段；和/或第八方面的组合物；从而引发免疫应答的步骤。
[0020]在第十方面，本专利技术涉及诱导针对受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌的免疫的方法，所述方法包括给受试者施用：第一方面的一种或多种免疫原性片段；第二方面的分离的蛋白质；第三方面的分离的核酸；第四方面的基因构建体；第五方面的宿主细胞；第七方面的抗体或抗体片段；和/或第八方面的组合物；从而诱导针对受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌的免疫的步骤。
[0021]在第十一方面，本专利技术在于治疗或预防受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌感染的方法，所述方法包括给受试者施用：第一方面的一种或多种免疫原性片段；第二方面的分离的蛋白质；第三方面的分离的核酸；第四方面的基因构建体；第五方面的宿主细胞；第七方面的抗体或抗体片段；和/或第八方面的组合物；从而预防或治疗受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌感染的步骤。
[0022]在第十二方面，本专利技术提供了至少部分地抑制或防止淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌与受试者中的细胞结合的方法，所述方法包括给受试者施用：第一方面的一种或多种免疫原性片段；第二方面的分离的蛋白质；第三方面的分离的核酸；第四方面的基因构
建体；第五方面的宿主细胞；第七方面的抗体或抗体片段；和/或第八方面的组合物；从而抑制或防止淋病奈瑟菌细菌与受试者的细胞结合的步骤。
[0023]在第十三方面，本专利技术在于至少部分地抑制或降低受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌的血清抗性的方法，所述方法包括给受试者施用：第一方面的一种或多种免疫原性片段；第二方面的分离的蛋白质；第三方面的分离的核酸；第四方面的基因构建体；第五方面的宿主细胞；第七方面的抗体或抗体片段；和/或第八方面的组合物；从而抑制或降低受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌感染血清抗性的步骤。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种淋病奈瑟菌的分离的奈瑟菌肝素结合抗原(NHBA)蛋白的免疫原性片段。2.如权利要求1所述的免疫原性片段，其中所述分离的NHBA蛋白包含SEQ ID NO:1中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物。3.如权利要求1或权利要求2所述的免疫原性片段，其包含所述分离的NHBA蛋白的C末端片段或被包含在所述分离的NHBA蛋白的C末端片段中。4.如前述权利要求中任一项所述的免疫原性片段，所述免疫原性片段包含SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物，被包含在SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物中，由SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物组成或基本上由SEQ ID NO:2中列出的氨基酸序列或其片段、变体或衍生物组成。5.如权利要求4所述的免疫原性片段，其中所述变体或衍生物包含SEQ ID NO:2的残基3、5、6、9、20、50、57、60、61、69、71、75、76、83、88、89、91、92、93、113、135、150、152、153、167、173、177、180和181的一个或多个氨基酸取代。6.如权利要求5所述的免疫原性片段，其中SEQ ID NO:2的一个或多个氨基酸取代选自由A3V、I5M、P6L、P9S、G20E、P50S、R57S、G60A、E61K、A69V、T71A、N75S、G76R、M83T、P88S、Y89C、S91T、G92R、G93S、S113G、T135N、G150D、A152V、G153D、A167T、G173S、G177D、D180E、R181Q及其任何组合组成的组。7.如前述权利要求中任一项所述的免疫原性片段，其包含所述分离的NHBA蛋白的一个或多个肝素结合残基和/或一个或多个活性位点残基。8.一种分离的蛋白质，其包含一种或多种根据权利要求1
‑
7中任一项所述的免疫原性片段。9.一种分离的核酸，其包含编码权利要求1至7中任一项所述的免疫原性片段或权利要求8所述的分离的蛋白质的核苷酸序列，或者包含与其互补的核苷酸序列。10.一种基因构建体，其包含权利要求9所述的分离的核酸。11.一种宿主细胞，其包含权利要求10所述的基因构建体。12.一种产生权利要求1至7中任一项所述的分离的免疫原性片段或权利要求8所述的分离的蛋白质的方法，所述方法包括：(i)培养权利要求11所述的宿主细胞；和(ii)从步骤(i)中培养的所述宿主细胞分离所述免疫原性片段或蛋白质。13.一种抗体或抗体片段，其结合权利要求1至7中任一项所述的免疫原性片段或权利要求8所述的分离的蛋白质或者针对所述免疫原性片段或所述分离的蛋白质产生。14.一种组合物，其包含一种或多种权利要求1至7中任一项所述的免疫原性片段、权利要求8所述的分离的蛋白质、权利要求9所述的分离的核酸、权利要求10所述的基因构建体、权利要求11所述的宿主细胞和/或权利要求13所述的抗体或抗体片段，任选地连同药学上可接受的稀释剂、载体或赋形剂。15.如权利要求14所述的组合物，其为免疫原性组合物。16.如权利要求15所述的组合物，其为疫苗。17.一种引发针对受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌的免疫应答的方法，所述方法包括给所述受试者施用：一种或多种权利要求1至7中任一项所述的免疫原性片段；权利要求8所述的分离的蛋白质；权利要求9所述的分离的核酸；权利要求10所述的基因构建体；权利要求11所述的宿主细胞；权利要求13所述的抗体或抗体片段；和/或权利要求
14至16中任一项所述的组合物；从而引发免疫应答的步骤。18.一种诱导针对在受试者中的淋病奈瑟菌和/或脑膜炎奈瑟菌细菌的免疫的...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：格里菲斯大学，
类型：发明
国别省市：