用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体及其筛选方法与应用技术

本发明专利技术提供了用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体，其是下列核苷酸序列中的一种：具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；在所述SEQ ID NO.1的核苷酸序列上的两端均截短相同长度的核酸适配体，且所述截短长度为1‑11bp；其中两端均截短1‑11bp的核酸适配体具有一一对应的SEQ ID NO.12‑SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明专利技术还提供了所述核酸适配体的筛选方法及其应用。该核酸适配体特异性强，与盐酸克伦特罗类似物不存在交叉反应；亲和力高，亲和力常数为(42.17±8.97)nM；灵敏度高：能检测到盐酸克伦特罗的最低检测限为1.2ng/mL。

【技术实现步骤摘要】
用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体及其筛选方法与应用
本专利技术涉及生物医学
，尤其涉及用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体及其筛选方法与应用。
技术介绍
盐酸克伦特罗(Clenbμterol，CBL)，是一种β肾上腺素受体激动剂，起初用于治疗哮喘。CBL进入畜禽体内后，可明显促进动物生长，并增加瘦肉率。人食用这种含有盐酸克伦特罗的动物可食部位后会引起食物中毒。我国农业部在1997年3月(农牧发[1997]3号文)严令禁止肾上腺素在动物生产中的应用。但受经济利益的驱使，畜禽产品中CBL超标的事件时有发生。因此，有必要长期监测畜禽产品中CBL的残留，对保护人类健康具有十分重要的意义。CBL残留的主要对象为家畜，而消费者每天对家畜类食物的需求量极大。因而，对监测CBL残留相关产品的检测速度要求极高。现行普遍应用的是胶体金免疫层析试纸条和酶免疫分析试剂盒，这类检测产品的核心试剂是抗体。但抗体制备过程极其复杂、批次差异性较大。寻找与抗体功能类似的识别分子具有极其重要的意义。核酸适配体是通过体外富集级指数技术SELEX筛选制备的单链DNA或RNA，有特异性强、亲和力高、靶标范围广和易修饰等优点本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体，其特征在于，其是下列核苷酸序列中的一种：具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；在所述SEQ ID NO.1的核苷酸序列上的两端均截短相同长度的核酸适配体，且所述截短长度为1‑11bp；其中两端均截短1‑11bp的核酸适配体具有一一对应的SEQ ID NO.12‑SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测盐酸克伦特罗的核酸适配体，其特征在于，其是下列核苷酸序列中的一种：具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列；在所述SEQIDNO.1的核苷酸序列上的两端均截短相同长度的核酸适配体，且所述截短长度为1-11bp；其中两端均截短1-11bp的核酸适配体具有一一对应的SEQIDNO.12-SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。2.如权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体还包括在所述核酸适配体的核苷酸序列上的某一位置被磷酸化、氧甲基化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化的核酸适配体。3.如权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体还包括的核苷酸序列上结合有生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、聚乙二醇或叶酸标记。4.如权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列的核酸适配体的二级结构具有突出的环和茎，吉布斯自由能dG＝-16.01；所述具有SEQIDNO.2所示的核苷酸序列的核酸适配体的二级结构具有突出的环和茎，吉布斯自由能dG＝-13.76。5.一种如权利要求1-4任一所述核酸适配体的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1、人工合成的ssDNA文库；步骤2、将所述文库固定于磁珠表面，将靶物质CBL与文库孵育，利用游离的小分子去捕获磁珠上的核酸适配体；步骤3、筛选...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘细霞，侯建军，陆琪，王芳，侯垚瑶，孟晨，胡田媛，陈思锐，
申请(专利权)人：湖北师范大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42