一种头孢克肟的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种头孢克肟的质量控制方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：流动相：A相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH 6.5):乙腈＝50:50，B相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH 6.5):乙腈＝85:15，柱温：0‑50℃，进样量：5‑25μL，进样浓度：0.0005‑2mg/mL，流速：0.8‑1.5mL/min，检测波长：254nm。本发明专利技术的方法可以实现对现有技术无法检测到的未知杂质的有效分离和定量检测，并且检测效率和检测准确度均高于现有技术，该方法具有较高的普适性，可以广泛用于不同来源的头孢克肟原料药及其对应制剂的质量检测。

【技术实现步骤摘要】
一种头孢克肟的质量控制方法
本专利技术属于药物分析领域，特别的是关于一种头孢克肟原料药及制剂的质量控制方法。
技术介绍
头孢克肟(Cefixime,CAS：79350-37-1)，为第三代口服头孢类抗生素，在临床上主要用于治疗敏感菌所致的咽炎、扁桃体炎、急性支气管炎急性发作、中耳炎、尿道感染等。头孢克肟具有光谱、高效、半衰期长等特点，结构式如下：以速发型抗生素过敏为代表的药物不良反应是抗生素临床使用中需要予以严加控制并避免的现象，而原料药中所含有的有关物质是引发一系列药物不良反应的重要根源之一。因此，针对原料药及对应制剂中有关物质的分析研究至关重要。基于来源不同的头孢克肟原料药可能采用不同的制备工艺路线，其对应的杂质情况存在差异，现有的方法需要实现对包括未知杂质在内的多种杂质的有效分离和定量检测，进而可以实现对头孢克肟原料药及对应制剂的质量控制。具体的，美国药典(USP41)、中国药典(2015版)、欧洲药典(EP9.0)以及日本药局方均记载了头孢克肟的原料及制剂的分析方法，其均采用乙腈-四丁基氢氧化铵缓冲水溶液体系作为流动相，采用固定比例流动相洗脱的方法，其洗脱时间在45min左右(3倍头孢克肟保留时间)，该方法可以实现常规有关物质的定量检测，但是对于特殊未知杂质的检测效果不佳。《药物分析杂志》,边磊等,2010,30(5),P872公开了一种乙腈辅助电喷雾LC-MS/MS法分析头孢克肟中有关物质的方法，该方法以1％甲酸水溶液-乙腈(90:10A)-乙腈(B)为流动相，采用梯度洗脱的方法实现有效成分及有关物质的洗脱分离，洗脱时间为40min，该方法可以实现对21个常见有关物质的定量检测，但是对于特殊的未知杂质，其因为洗脱时间较短，而使得部分杂质的分离度和/或峰型不好，甚至有检测不出的情形发生，其综合检测效果仍然不佳。《色谱》,张秀尧等,2014,32(7),P693公开了一种超高效液相色谱通式测定牛奶中β-内酰胺类抗生素及其代谢产物残留的方法，该方法采用水溶液-乙腈体系作为流动相，采用梯度洗脱的方法，洗脱时间为10min，但是，该方法仅实现各抗生素及其代谢产物峰的分离，并不能实现对含量较小的有关物质的检测。综上可知，寻找一种头孢克肟原料药及其制剂的质量控制方法，以实现对包括未知杂质在内的多种杂质的有效分离和定量检测是现有技术没有解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种头孢克肟的质量控制方法，该方法可以检测现有技术无法实现定性/定量检测的未知杂质，实现对更多杂质的有效分离和定量检测，并且检测效率和检测准确度均高于现有技术，可以广泛用于不同来源的头孢克肟原料药及其对应制剂的质量检测。本专利技术的上述目的通过以下技术方案得以实现：在本专利技术的头孢克肟的质量控制方法中，所述头孢克肟的质量控制方法采用高效液相法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：流动相：A相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝50:50B相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝85:15柱温：0～50℃进样量：5～25μL进样浓度：0.0005～2mg/mL流速：0.8～1.5mL/min检测波长：254nm所述头孢克肟的质量控制方法包含以下步骤：1)、配制样品溶液；2)、进样；3)、采用梯度洗脱法洗脱，梯度设置如下：阶段VA相:VB相洗脱时间020:80～25:750min120:80～25:7535～45min250:50～85:1515～35min320:80～25:752～10min420:80～25:7510～20min。具体的，所述流动相中的四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)的配置方法为：取10％四丁基氢氧化铵溶液25mL，加纯化水稀释至1000mL，摇匀，用1.5mol/L磷酸溶液调节pH至6.5即得；供试样品的制备方法为：取头孢克肟50mg规格分散片5片，精密称重，置于250mL容量瓶，加入pH7.0磷酸盐缓冲液至约2/3刻度，超声30min，加入pH7.0磷酸盐缓冲液至刻度，过滤即得。所述pH7.0磷酸盐缓冲液的制备方法为：取磷酸二氢钾6.805g和氢氧化钠0.94g，精密称定，加水适量溶解，用水稀释至1000ml，先用饱和氢氧化钠溶液调节pH至约pH6.9，再用lmol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，临用前脱气。所述头孢克肟质量控制方法的柱温需要控制在0至50℃之间，过低的柱温会严重影响柱效，而过高的柱温则会损坏色谱柱；优选的，当所述头孢克肟的质量控制方法的柱温为40℃时，各成分的出峰时间及峰型峰最佳，检测效果最好。所述头孢克肟质量控制方法的进样量需要控制在5～25μL，进样浓度需要控制在0.0005～2mg/mL，此时浓度与峰面积之间成线性关系；优选的，当所述头孢克肟质量控制方法的进样量为20μL，进样浓度为0.8～1.2mg/mL时，单位检测的样品量可以最大程度的发挥流动洗脱的效果，有利于实现各成分峰分离，且检测结果最为准确。所述头孢克肟质量控制方法中流动相的流速是实现检测效果的技术关键之一，具体的，流动相的流速过高会加快洗脱速度，缩短出峰时间，并且不利于实现分离效果，而过低的流速则会降低洗脱速度，在出峰时间延迟的同时也会拉宽各组分峰宽，同样不利于实现分离效果，也降低了检测效率；更具体的，当流动相的流速控制在0.8～1.5mL/min时，所述方法兼顾检测效率和分离度，有利于实现最佳检测效果，当流速为1.2mL/min时，检测效果最佳。所述头孢克肟质量控制方法中梯度洗脱的设置是实现检测效果的重要技术关键。具体的，研究人员发现，主成分峰前的各杂质峰分离度较好，而主成分峰之后的杂质峰则因极性相似而对应出峰时间近似，各峰之间存在重合、包覆或者峰型不佳的现象，不利于未知杂质的定性及定量检测，因此在在主峰略前或之后增加一段梯度，以快速洗脱较强保留的杂质，并保证相关洗脱峰的峰型及各峰的分离度，所述梯度洗脱设置如下：阶段VA相:VB相洗脱时间020:80～25:750min120:80～25:7535～45min250:50～85:1515～35min320:80～25:752～10min420:80～25:7510～20min上述梯度洗脱设置中，所述洗脱时间指代该阶段洗脱所持续的时长，流动相的比例(VA相:VB相)指代到达该洗脱时间终点时流动相的比例，其中阶段0指代流动相的起始比例，即：在该洗脱时间段内，流动相的比例由前一个时间段的终点值变至本时间段的终点值，如无特指，本专利技术中所有梯度设置的解释均遵从于此。优选的，流动相的比例在洗脱时间内为匀速改变。更具体的，上述梯度洗脱设置的阶段2可以进一步细化为阶段2、3、4，有利于较优的分离效果，如下：阶段VA相:VB相洗脱时间020:80～25:750min120:80～25:7535～45min250:50～70:305～15min370:30～75:255～10min475:25～85:155～10min520:80～25:752～10min620:80～25:7510～20min本专利技术的一个优选的头孢克肟的质量控制方法，其中梯度洗脱的设置如下：阶段VA相:VB相洗脱时间023:770min123:7740min本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种头孢克肟的质量控制方法，其特征在于，所述头孢克肟的质量控制方法采用高效液相法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：流动相：A相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝50:50B相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝85:15柱温：0～50℃进样量：5～25μL进样浓度：0.0005～2mg/mL流速：0.8～1.5mL/min检测波长：254nm所述头孢克肟的质量控制方法包含以下步骤：1)、配制样品溶液；2)、进样；3)、采用梯度洗脱法洗脱，梯度设置如下：

【技术特征摘要】
1.一种头孢克肟的质量控制方法，其特征在于，所述头孢克肟的质量控制方法采用高效液相法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其检测条件如下：流动相：A相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝50:50B相：四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)：乙腈＝85:15柱温：0～50℃进样量：5～25μL进样浓度：0.0005～2mg/mL流速：0.8～1.5mL/min检测波长：254nm所述头孢克肟的质量控制方法包含以下步骤：1)、配制样品溶液；2)、进样；3)、采用梯度洗脱法洗脱，梯度设置如下：2.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述流动相中的四丁基氢氧化铵水溶液(pH6.5)的配置方法为：取10(质量)％四丁基氢氧化铵溶液25mL，加纯化水稀释至1000mL，摇匀，用1.5mol/L磷酸溶液调节pH至6.5即得；供试样品的制备方法为：取头孢克肟50mg规格分散片5片，精密称重，置于250mL容量瓶，加入pH7.0磷酸盐缓冲液至约2/3刻度，超声30min，加入pH7.0磷酸盐缓冲液至刻度，过滤即得。3.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述的柱温为40℃，进样量为20μL，流速为1.2mL/min。4.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述的梯度洗脱设置如下：5.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述的梯度洗脱设置为：6.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述的梯度洗脱设置为：7.根据权利要求1所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征在于所述的色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18、WatersXbridgeshieldRP18、AgelaLunaC18(2)中的任意一种。8.根据权利要求1-9之一所述的头孢克肟的质量控制方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：程志伟，赵用强，
申请(专利权)人：广东华南药业集团有限公司，广东先强药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44