一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒及各组分配制方法技术

本发明专利技术公开的一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒及各组分配制方法，包括以下试剂：包被工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂缓冲液中的0.025‑0.25mg/ml磁微粒包被的抗肌酐单克隆抗体；标记工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂的缓冲液中的0.001‑0.01mg/ml吖啶酯标记的肌酐偶联物抗原；定标液1：含有低浓度肌酐抗原的定标品；定标液2：含有高浓度肌酐抗原的定标品；激发液1：含有0.25％‑1.25％H2O2的0.1N的HNO3；激发液2：含有0.2％‑2％Triton‑X100的0.25N的NaOH。本发明专利技术背景发光低，信噪比高，发光干扰因素少，发光效率高，强度大，易于与蛋白联结且不影响发光效率和发光强度，灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒及各组分配制方法
:本专利技术属于免疫检测
，具体地讲是一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒及各组分配制方法。
技术介绍
：肌酐是肌肉在人体内代谢的产物，主要由肾小球滤过排出体外，在肉类食物摄入量稳定时，身体的肌肉代谢没有大的变化，肌酐的生成就会比较恒定，肌酐几乎全部经肾小球滤过进入原尿，并且不被肾小管重吸收，当肾脏发生损伤时，肾小球过滤功能下降，血肌酐上升，因此通过检测血、尿肌酐可以诊断肾的损伤情况，为治疗和预后提供准确的依据。目前市场上主要依靠苦味酸法和肌氨酸氧化酶法进行检测，其中苦味酸检测法原理是人样本去除蛋白后，肌酐在碱性环境下与苦味酸发生Jaffe反应，生成橙红色的苦味酸肌酐复合物，在510-520nm间测定吸光度，检测结果快速，成本低廉，但是人样本中的蛋白质、糖类、丙酮、Vc、丙酮酸等均能与碱性苦味酸发生非特异性反应，灵敏度低，特异性差，会造成结果的误判。肌氨酸氧化酶法是肌酐在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成过氧化氢，后者在过氧化氢酶作用下与4-氨基安替比林、ESPAS反应生成紫红色醌亚胺，在546nm处检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于：包括以下试剂：1)包被工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂缓冲液中的0.025‑0.25mg/ml磁微粒包被的抗肌酐单克隆抗体；2)标记工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂的缓冲液中的0.001‑0.01mg/ml吖啶酯标记的肌酐偶联物抗原；3)定标液1：含有低浓度肌酐抗原的定标品；4)定标液2：含有高浓度肌酐抗原的定标品；5)激发液1：含有0.25％‑1.25％H2O2的0.1N的HNO3；6)激发液2：含有0.2％‑2％Triton‑X100的0.25N的NaOH。

【技术特征摘要】
1.一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于：包括以下试剂：1)包被工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂缓冲液中的0.025-0.25mg/ml磁微粒包被的抗肌酐单克隆抗体；2)标记工作液：置于含牛血清白蛋白和防腐剂的缓冲液中的0.001-0.01mg/ml吖啶酯标记的肌酐偶联物抗原；3)定标液1：含有低浓度肌酐抗原的定标品；4)定标液2：含有高浓度肌酐抗原的定标品；5)激发液1：含有0.25％-1.25％H2O2的0.1N的HNO3；6)激发液2：含有0.2％-2％Triton-X100的0.25N的NaOH。2.根据权利要求1所述一种肌酐化学发光免疫检测试剂盒，其中所述通过包被工作液、标记工作液、定标液1、定标液2、激发液1和激发液2六种试剂的配合使用完成对肌酐的检测。3.根据权利要求1所述包被工作液的配制方法，包括以下步骤：1)取一定量的磁珠原液，使用磁珠清洗液将磁珠清洗2次，然后加入一定量的MES缓冲液，完成磁珠原液的清洗稀释；2)在磁珠稀释液中加入一定量的EDC和NHS，放置在37℃的环境中震荡混匀30分钟-60分钟，完成磁珠的活化；3)将活化好的磁珠使用缓冲液清洗两次，加入一定量的MES，同时配制抗体工作液，然后将抗体工作液加入磁珠溶液中，放置在37℃环境中震荡混匀120分钟-480分钟，完成抗体磁珠偶联；4)将偶联后的磁珠使用缓冲液冲洗两次，加入一定量的封闭缓冲液，防止在37℃的环境中震荡混匀30分钟到60分钟，完成磁珠的封闭；5)将封闭后的磁珠使用缓冲液清洗两次，加入磁珠保存液，混匀后放置在2-8℃的环境中保存，完成磁珠的保存；6)将包被好的磁珠使用保存缓冲液稀释至0.025-0.25mg/ml，灌装保存在2-8℃的环境中，完成包被...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡亚晖，
申请(专利权)人：上海彧成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31