抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂及其制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：分离原代脐带静脉内皮细胞并进行细胞培养及传代；向传代培养的内皮细胞培养液中加入山莨菪碱对内皮细胞进行预处理，然后更换新的内皮细胞培养液并加入TNF‑α继续培养内皮细胞；自内皮细胞培养后得到的含TNF‑α的内皮细胞培养液中提取外泌体；外泌体鉴定。以本发明专利技术制备方法制备的抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂及其在抗肿瘤药物中的应用。本发明专利技术制备方法简单,制备的外泌体能够抑制内皮细胞的迁移。

【技术实现步骤摘要】
抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
细胞迁移在人体正常生理活动和疾病发生中普遍存在，如胚胎发生、损伤修复、免疫应答、癌症转移等过程中均涉及到细胞迁移。血管生成在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用，血管内皮细胞的迁移是血管生成的关键步骤之一。肿瘤的发生伴随着血管的生成为其提供营养物质，研究血管内皮细胞迁移的抑制对于肿瘤治疗也有重要的意义，目前，靶向血管内皮生成因子的抗肿瘤血管生成疗法引起了多种形式的不良反应和抗性，科学家们正在为其寻找新的替代途径。随着细胞外泌体的研究日益深入，外泌体药物制剂越来越成为疾病治疗研究的热点，外泌体是一种由活细胞分泌并释放到胞外环境中、大小在60-100nm的运输膜泡，外泌体以其天然的物质转运特性、相对较小的分子结构和优良的生物相容性，可递送化学药物、蛋白质及肽配基和基因药物等多种药物，在药物载体的领域具有巨大的潜力。对于药物载体的选择,有两个基本原则:保护内含的药物在体内环境中仍保持活性；在不引发机体对药物载体产生免疫反应的情况下释放内含物。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分离原代脐带静脉内皮细胞并进行细胞培养及传代；(2)向传代培养的内皮细胞培养液中加入山莨菪碱对内皮细胞进行预处理，然后更换新的内皮细胞培养液并加入TNF‑α继续培养内皮细胞；(3)自内皮细胞培养后得到的含TNF‑α的内皮细胞培养液中提取外泌体；(4)外泌体鉴定。

【技术特征摘要】
1.抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分离原代脐带静脉内皮细胞并进行细胞培养及传代；(2)向传代培养的内皮细胞培养液中加入山莨菪碱对内皮细胞进行预处理，然后更换新的内皮细胞培养液并加入TNF-α继续培养内皮细胞；(3)自内皮细胞培养后得到的含TNF-α的内皮细胞培养液中提取外泌体；(4)外泌体鉴定。2.根据权利要求1所述的抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂的制备方法，其特征在于，所述传代培养的内皮细胞为3-5代内皮细胞。3.根据权利要求1所述的抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂的制备方法，其特征在于，所述内皮细胞培养液为基础培养基中添加无外泌体胎牛血清、青霉素、链霉素和内皮生长因子至终浓度分别为0.05mg/mL、0.01mg/mL、0.01mg/mL和0.01mg/mL。4.根据权利要求1所述的抑制内皮细胞迁移的外泌体活性制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中加入山莨菪碱后的内皮细胞培养液中，所述山莨菪碱的浓度为1.5×10-2―1.5×10-3ng/mL，加入山莨菪碱后，预处理的时间为3-5小时。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：仉红刚，李炳蔚，张秋菊，修瑞娟，
申请(专利权)人：中国医学科学院微循环研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11