一种胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法技术

本发明专利技术公开了一种胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法,属于细胞培养技术领域。无菌条件下胎盘组织块，剪碎，平铺到培养瓶中，用无血清培养基进行培养,至细胞密度为1‑2x10

【技术实现步骤摘要】
一种胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法
本专利技术涉及胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法，属于细胞培养

技术介绍
糖尿病,是一种严重危害人类健康的常见疾病,其发病机制尚不明确,目前也没有有效的防治方法。据估计,目前全世界约有糖尿病人1.7亿。我国糖尿病发病率一直呈现上升趋势，在成年人群当中,2010年患病人数高达2400万，成为发病率仅次于印度的糖尿病第二大国同时,糖尿病病死率仅次于心脑血管性疾病和癌症,已成为人类的第三大疾病。糖尿病的蔓延给社会及家庭造成了沉重的经济负担,所以糖尿病的防治刻不容缓。Ⅰ型及Ⅱ型糖尿病晚期需要每日注射胰岛素,但这种烦琐而昂贵的替代治疗并不能精确地调节血糖,最终会导致胰岛素抵抗和各种并发症的发生。虽然胰岛细胞移植给治愈糖尿病带来了希望,但面临着两大挑战。可供移植的细胞来源严重匾乏以及异体免疫排斥反应。胰岛细胞属于终末分化细胞,体外培养难以存活和增殖,所以寻找新的胰岛细胞来源成了世界关注的焦点。干细胞可以诱导分化为胰岛样细胞,再将这些诱导的细胞移植到糖尿病患者体内,从而发挥调节血糖的功能。干细胞具有强大的增殖及分化潜能,如果在一本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法，其特征在于：具体步骤为：步骤一：获得高质量的胎盘间充质细胞；(1‑1).选取足月顺产或剖宫产的盘状胎盘，确保无胎粪等污染，剪取胎盘底蜕膜面的组织，将底蜕膜面的细胞即靠近母体面的表层减去，减去之后挑颜色鲜红的组织剪取；(1‑2).将剪取的组织块在含有庆大霉素的生理盐水中清洗至鲜红色，其中500mL的生理盐水中含2支庆大霉素，庆大霉素的规格为8万单位/支；(1‑3).挑取颜色鲜亮的组织，将组织放入10cm皿中，倾斜平皿，使组织位于高处，便于水分去除，剪成肉泥，注意无菌操作；(1‑4).将剪碎的组织用细胞刮刀平铺于T75cm2细胞培养瓶中，做好标...

【技术特征摘要】
1.一种胎盘间充质干细胞诱导分化形成胰岛β细胞的方法，其特征在于：具体步骤为：步骤一：获得高质量的胎盘间充质细胞；(1-1).选取足月顺产或剖宫产的盘状胎盘，确保无胎粪等污染，剪取胎盘底蜕膜面的组织，将底蜕膜面的细胞即靠近母体面的表层减去，减去之后挑颜色鲜红的组织剪取；(1-2).将剪取的组织块在含有庆大霉素的生理盐水中清洗至鲜红色，其中500mL的生理盐水中含2支庆大霉素，庆大霉素的规格为8万单位/支；(1-3).挑取颜色鲜亮的组织，将组织放入10cm皿中，倾斜平皿，使组织位于高处，便于水分去除，剪成肉泥，注意无菌操作；(1-4).将剪碎的组织用细胞刮刀平铺于T75cm2细胞培养瓶中，做好标记；(1-5).将细胞培养瓶倒扣，有组织块的血培养面位于上方，缓慢加入6mL无血清培养基，培养基位于下方，培养基选用人间充质干细胞基础培养基及添加物，产品号分别是：10151A，10151B；两者以10：1混合；混合后加入L-gln，使其终浓度达到2mM；放入37℃培养箱中，5％CO2，放置2h，拧紧瓶盖，所述的细胞培养瓶为有通气滤膜的细胞培养瓶；(1-6).将培养瓶正置，此时应确保培养液能覆盖住每块组织，静置培养；(1-7).三天后观察组织块，注意动作要轻，尽量不要晃动；(1-8).七天后再半量换液，一般7天能爬出细胞，此后均半量换液；(1-9).待细胞汇合度达到80％左右时，进行传代培养；(1-10).将培养液去...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪晓敏，袁卫平，万谦，
申请(专利权)人：溯源生命科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11