The invention relates to a preparation method of extracellular polysaccharides, in particular to a preparation method of extracellular polysaccharides from Pseudostellaria rugosa and the preparation method and application thereof, including: filtering by liquid culture of Pseudostellaria rugosa, obtaining filtrate as crude extracellular polysaccharides solution, vacuum decompression concentration of crude extracellular polysaccharides solution, and obtaining extracellular polysaccharides. Concentrated crude liquid was added with ethanol according to the volume ratio of crude polysaccharide concentrate to ethanol 1:3 1:5, stirred evenly, placed at 0 4 C for 24 48 h, centrifuged to remove supernatant, added water to precipitation, bathed at 45 55 C for 30 60 min, centrifuged to remove precipitation, took supernatant for 48 72 h, dialysis membrane molecular interception was 3 kDa, and permeated. After analysis, the supernatant was freeze-dried to obtain the exo polysaccharide from the folds.
【技术实现步骤摘要】
一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法及应用
本专利技术涉及一种胞外多糖的制备方法,尤其涉及一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法及制备得到的胞外多糖及应用。
技术介绍
皱盖假芝是我国民间传统药用真菌,我国的真菌类专业书籍都有记载其药用特性,但语焉不详。直至近几年,皱盖假芝子实体粗多糖证明具有较强且广谱的抗肿瘤细胞增殖功效。同时,经急性和亚慢性毒理测试证明,皱盖假芝子实体粗多糖无明显毒性。随后,研究人员从皱盖假芝子实体粗多糖中分离出一段分子量小于6kD的多糖组分,并证实该组分的抗肿瘤细胞增殖效果优于分离纯化前的粗多糖。目前,关于皱盖假芝子实体粗多糖的纯化方法,主要采用了柱层析的方法制备得到。
技术实现思路
针对以上不足,本专利技术提供一种以皱盖假芝深层发酵后的不含菌丝体的发酵残液为原料,采用较温和的不需酸碱度调整、非高温加热的提取方法,以获得具有抑制肿瘤细胞增殖的胞外多糖。本专利技术通过以下方案达到上述目的:第一方面,提供一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,包括:采用培养12-16天的皱盖假芝液体培养物抽滤,得到滤液为胞外多糖粗液,将胞外多糖粗液真空减压浓缩,得到胞外多糖浓缩粗液,按照胞外多糖浓缩粗液与乙醇的体积比1:3-1:5加入乙醇,搅拌均匀,0-4℃静置24-48h,离心去除上清,向沉淀中加入水,45-55℃水浴30-60min,离心去除沉淀,取上清进行透析48-72h,透析膜分子截留量3-5kDa,对透析后上清冷冻干燥,得到皱盖假芝胞外多糖。优选的,所述皱盖假芝液体培养物为培养16天的皱盖假芝液体培养物。优选的,所述皱盖假芝液体培养物通过将皱盖假芝菌种接入到液体培养基中, ...
【技术保护点】
1.一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,包括:采用培养12‑16天的皱盖假芝液体培养物抽滤,得到滤液为胞外多糖粗液,将胞外多糖粗液真空减压浓缩,得到胞外多糖浓缩粗液,按照胞外多糖浓缩粗液与乙醇的体积比1:3‑1:5加入乙醇,搅拌均匀,0‑4℃静置24‑48h,离心去除上清,向沉淀中加入水,45‑55℃水浴30‑60min,离心去除沉淀,取上清进行透析48‑72h,透析膜分子截留量3‑5kDa,对透析后上清冷冻干燥,得到皱盖假芝胞外多糖。
【技术特征摘要】
1.一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,包括:采用培养12-16天的皱盖假芝液体培养物抽滤,得到滤液为胞外多糖粗液,将胞外多糖粗液真空减压浓缩,得到胞外多糖浓缩粗液,按照胞外多糖浓缩粗液与乙醇的体积比1:3-1:5加入乙醇,搅拌均匀,0-4℃静置24-48h,离心去除上清,向沉淀中加入水,45-55℃水浴30-60min,离心去除沉淀,取上清进行透析48-72h,透析膜分子截留量3-5kDa,对透析后上清冷冻干燥,得到皱盖假芝胞外多糖。2.根据权利要求1所述的一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,所述皱盖假芝液体培养物通过将皱盖假芝菌种接入到液体培养基中,24-28℃下静置24小时,再在24-28℃下避光培养12-16天,得到皱盖假芝液体培养物。3.根据权利要求1或2所述的一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,所述皱盖假芝液体培养物为培养16天的皱盖假芝液体培养物。4.根据权利要求1所述的一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,所述胞外多糖粗液为新鲜制备得到的胞外多糖粗液。5.根据权利要求1所述的一种皱盖假芝胞外多糖的制备方法,其特征在于,所述抽滤为采用200目...
【专利技术属性】
技术研发人员:张一帆,夏凤娜,陈秋颜,杨小兵,谢意珍,
申请(专利权)人:广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心,广东粤微食用菌技术有限公司,广东省食用菌行业协会,
类型:发明
国别省市:广东,44
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