一种甲氨蝶呤胶乳免疫比浊测定试剂盒及其制备方法技术

一种甲氨蝶呤胶乳免疫比浊测定试剂盒及其制备方法。本发明专利技术提供测定人体血清中血药甲氨蝶呤含量的试剂盒：试剂R1和试剂R2以1:1组成。其重量百分配比为R1：0.01％～4％乳化剂、0.01％～4％甲氨蝶呤共轭物、0.1％～2％氯化钠、0.05％～2％增敏剂、0.02％防腐剂、30～100mmol/L缓冲液。R2：0.1％～0.5％结合有抗甲氨蝶呤抗体胶乳微粒、0.1％～1.0％牛血清白蛋白、0.02％～2％吐温20、0.02％～2％稳定剂2、0.02％～2％蛋白保护剂2、0.02％防腐剂、20～50mmol/L缓冲液。本发明专利技术试剂盒灵敏度和稳定性高，有较好的临床应用前景,本发明专利技术提供了制备方法。

Methotrexate latex immunoturbidimetric assay kit and preparation method thereof

An immunoturbidimetric assay kit for methotrexate latex and a preparation method thereof are provided. The invention provides a reagent kit for determining the content of methotrexate in human serum: reagent R1 and reagent R2 are composed of 1:1. The weight percentage ratio is R1:0.01%-4% emulsifier, 0.01%-4% methotrexate conjugate, 0.1%-2% sodium chloride, 0.05%-2% sensitizer, 0.02% preservative and 30-100 mmol/L buffer. R2:0.1%-0.5% latex particles with anti-methotrexate antibody, 0.1%-1.0% BSA, 0.02%-2% Tween 20, 0.02%-2% stabilizer 2, 0.02%-2% protein protectant 2, 0.02% preservative, 20-50 mmol/L buffer. The kit has high sensitivity and stability, and has good clinical application prospect, and the preparation method is provided.

【技术实现步骤摘要】
一种甲氨蝶呤胶乳免疫比浊测定试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及生物试剂，具体涉及检测试剂盒，尤其涉及一种灵敏度高、特异性强的胶乳免疫比浊法测定人体血清甲氨蝶呤含量的试剂盒及其制备方法。
技术介绍
甲氨蝶呤(Methotrexate，MTX)是一种叶酸还原酶抑制剂，为抗叶酸类抗肿瘤药物，主要通过对二氢叶酸还原酶的抑制作用阻碍肿瘤细胞DNA的合成，从而抑制肿瘤细胞的生长和繁殖。其抗肿瘤机理是：甲氨蝶呤与叶酸结构即为相似，都属于蝶啶衍生物，故MTX能够结合到二氢叶酸还原酶的活性位置上，阻断四氢叶酸的形成。其选择性地作用于S期(DNA合成期)，属于细胞周期特异性药物。临床上在急性白血病(尤其是急性淋巴细胞性白血病)、绒毛膜上皮癌及恶性葡萄胎等方面的治疗效果较好。对头颈部肿瘤、乳腺癌、肺癌及盆腔肿瘤均有一定疗效，也可与其他药物联合治疗Burkitts淋巴瘤，晚期淋巴肉瘤(Ⅲ和Ⅳ期，Peter氏阶段系统)和晚期蕈样真菌病。因甲氨蝶呤安全范围窄，服药后人体代谢和排泄的个体化差异大，低于其有效血药浓度则无法抑制肿瘤生长，高于其有效血药浓度会引起胃肠道反应、肝硬化、肾脏损害等副作用。该药的细胞毒性较大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲氨蝶呤胶乳免疫比浊测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由试剂R1和试剂R2组成；所述试剂R1和试剂R2的体积比为1:1。

【技术特征摘要】
1.一种甲氨蝶呤胶乳免疫比浊测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由试剂R1和试剂R2组成；所述试剂R1和试剂R2的体积比为1:1。2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述试剂R1由下列重量百分配比的组分组成：0.01％～4％的乳化剂、0.01％～4％的甲氨蝶呤共轭物、0.1％～2％氯化钠、0.05％～2％的增敏剂、0.02％的防腐剂、88.00％～99.80％的30～100mmol/L缓冲液。3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，试剂R1所述乳化剂选自吐温20、吐温80或聚乙二醇辛基苯基醚；所述增敏剂选自聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000或聚乙二醇20000，优选为聚乙二醇20000；所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、3-(N-吗啉基)丙磺酸缓冲液、2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液中的一种或多种；所述缓冲液pH值为6～9。4.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述试剂R2由下列重量百分配比的组分组成：0.1％～0.5％结合有抗甲氨蝶呤抗体的胶乳微粒、0.1％～1.0％牛血清白蛋白、0.02％～2％吐温20、0.02％～2％稳定剂、0.02％～2％蛋白保护剂、0.02％防腐剂、92.50％～97.70％的20～50mmol/L缓冲液。5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述结合有抗甲氨蝶呤抗体的胶乳微粒为：选择不同粒径的羧基化聚苯乙烯胶乳微粒与抗甲氨蝶呤抗体形成的复合物；所述不同粒径的纳米胶乳微粒的直径为50～300nm。6.根据权利要求4或5所述试剂盒，其特征在于，所述的抗甲氨蝶呤抗体选自兔抗多克隆抗体、羊抗克隆抗体或鼠抗单克隆抗体。7.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为聚氧乙烯树脂类,选自聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯或月桂醇聚氧乙烯醚硫酸酯钠盐，蛋白保护剂为海藻糖；所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、2-吗啉乙横酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液中的一种或多种；所述缓冲液pH值为6～9；所述防腐剂选自叠氮化钠、N-甲基-异噻唑酮、N'-亚甲基-双[N'-(3-羟甲基-2,5-二酮-4-咪唑烷基)]脲或ProClin300中的一种或多种。8.如权利要求1所述测定人体血清甲氨蝶呤含量的试剂盒的制备方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：Ⅰ、制备试剂R1：取1L水，然后依次加入氯化钠、增敏剂、乳化剂、甲氨蝶呤共轭物、防腐剂，每次添加物料需要...

【专利技术属性】
技术研发人员：张龙平，张跃建，孙卫兵，
申请(专利权)人：上海复星长征医学科学有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31