一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法，该试剂盒包含试剂A、试剂B和胸苷激酶1(TK1)校准品，其中试剂A为包被有抗胸苷激酶1(TK1)抗体的磁微粒混悬液，试剂B为碱性磷酸酶标记的抗胸苷激酶1(TK1)抗体酶结合物试剂。与现有技术相比，本发明专利技术提供了一种测定胸苷激酶1(TK1)含量的方法，利用本发明专利技术提供的试剂盒，根据双抗体夹心法的原理可以准确、灵敏、快速地测定样本中胸苷激酶1(TK1)的含量。

A magnetic particle chemiluminescence kit for the determination of thymidine kinase 1 and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及生物试剂，具体涉及检测试剂盒，尤其涉及一种灵敏度高、特异性强的测定人体血清胸苷激酶1含量的试剂盒及其制备方法。
技术介绍
胸苷激酶1(ThymidineKinase1，TK1)胸苷激酶(TK1)是DNA合成中的关键酶之一，在镁离子和ATP的参与的条件下，可催化胸腺嘧啶核苷(TdR)转化为脱氧胸苷一磷酸(TMP)，进而形成的胸苷三磷酸(TTP，DNA合成中的四种必须脱氧核苷酸之一)从而参与DNA合成。TK1水平的升高和DNA的合成成正相关，在细胞周期中，TK1在G1期晚期开始升高，于S期达到最高，至G2期开始下降，由于TK1与细胞周期S期的特殊相关性，又被称为“S期关键酶”，是通过补救途径在S期合成DNA的关键酶。TK1通常有两种形式，其TK1全酶是分子量约为12KDa的四聚体，同时也有二聚体形式。通常四聚体的催化效率更高，约为二聚体的22倍。在ATP存在的情况下，TK1更倾向于形成四聚体，去除ATP则回复二聚体的形式，该过程可逆。TK1在组织或细胞萃取液中并不稳定，但是血本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含试剂A、试剂B和胸苷激酶1(TK1)校准品，其中试剂A为包被有抗胸苷激酶1(TK1)抗体的磁微粒混悬液，试剂B为碱性磷酸酶标记的抗胸苷激酶1(TK1)抗体酶结合物试剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含试剂A、试剂B和胸苷激酶1(TK1)校准品，其中试剂A为包被有抗胸苷激酶1(TK1)抗体的磁微粒混悬液，试剂B为碱性磷酸酶标记的抗胸苷激酶1(TK1)抗体酶结合物试剂。


2.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂A是由0.05-0.2mol/L的缓冲液、0.1％-0.5％防腐剂、1％-10％表面活性剂、0.01％-0.08％包被有TK1抗体的磁微粒配制而成。


3.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的磁微粒为Fe2O3或Fe3O4磁性纳米粒子与有机高分子材料的复合体，在所述磁微粒表面含有一种或多种活性功能基团。


4.根据权利要求2或3所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、3-(N-吗啉基)丙磺酸缓冲液、2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液中的一种或多种；所述缓冲液的pH值为6～9；
所述防腐剂选自叠氮化钠、N-甲基-异噻唑酮、N'-亚甲基-双[N'-(3-羟甲基-2,5-二酮-4-咪唑烷基)]脲或ProClin300中的一种或多种；
所述表面活性剂选自吐温20、吐温80、环氧乙烷-环氧丙烷嵌段共聚物或聚乙二醇辛基苯基醚；
所述包被有TK1抗体的磁微粒为选择不同粒径和表面活性功能基团的磁微粒与TK1抗体形成的复合物，所述磁微粒表面的活性功能基团选自对甲苯磺酰基或羧基，所述的磁微粒的粒径为0.1-5μm。


5.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂B是由0.05-0.2mol/L的缓冲液、0.1％-0.5％防腐剂、1％-10％表面活性剂、1％-10％保护蛋白、0.1-1.0μg/ml碱性磷酸酶标记的TK1抗体酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗紫臣，
申请(专利权)人：上海复星长征医学科学有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31