琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体公开了琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用。本发明专利技术发现琥珀酸通过提高细菌的质子动力势，从而使进入细菌内部的抗生素数量增加，最终使细菌死亡，因此琥珀酸能够提高细菌对抗生素的敏感性，从而克服细菌耐药性的问题。将琥珀酸与抗生素联用可以显著提高抗生素的杀菌作用，与现有的只用抗生素作为抗细菌药物相比，具有更好的效果以及更高的安全性和可操作性。

【技术实现步骤摘要】
琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用
本专利技术属于医药
，具体地，涉及琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用。
技术介绍
病原性细菌严重危害人类身体健康和养殖业的可持续性发展，需要采取有效措施进行防治。自从1929年弗莱明(Fleming)发现青霉素以来，各种抗生素的大量研究开启了人类的抗生素时代，其在感染疾病的治疗中发挥着重大的作用，使得抗生素的使用日益广泛。虽然采用抗生素可以有效防治疾病，但抗生素的滥用和误用会导致细菌产生耐药性。耐药菌株对原本有效的抗生素产生耐受，导致感染难以控制。因此，采用新的方法控制细菌特别是耐药菌的感染十分重要。目前研究的热点是通过提高耐药菌对抗生素的敏感性，使得原本无效或低效的抗生素变得有效，将耐药菌杀死。近年来，已发现一些小分子可以协同抗生素促进杀菌作用，将其与抗生素一起制备成复方制剂，对控制细菌特别是耐药菌的感染具有重要意义。琥珀酸是三羧酸循环中重要的四碳二羧酸中间产物，也是某些氨基酸的降解物。琥珀酸的天然来源是松属植物的树脂久埋于地下而成的琥珀等，此外还广泛存在于多种植物、动物的组织中。医药工业中可用它合成解毒剂、利尿剂、镇静剂、止血药、抗痉挛剂、松痰剂、磺胺药、抗生素以及维生素A、维生素B等。琥珀酸还可作为化学试剂，用作碱量法标准试剂、缓冲剂、气相色谱对比样品。在食品工业中可用于调味剂、酸味剂、缓冲剂，用于火腿、香肠、水产品、调味液等，还可用做防腐剂、pH值调节剂和助溶剂。但是，关于琥珀酸能否提高细菌对抗生素敏感性尚未见相关报道。
技术实现思路
本专利技术为了克服现有技术的上述不足，提供琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用，本专利技术发现琥珀酸能够提高细菌对抗生素的敏感性，从而克服细菌耐药性的问题。本专利技术的另一目的在于提供一种抑菌或杀菌的药物。本专利技术的另一目的在于提供一种提高细菌对抗生素敏感性的方法。本专利技术的另一目的在于提供琥珀酸在制备清除生物膜细菌的制剂或药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：本专利技术发现添加琥珀酸后，可以提高临床大肠埃希菌对氨苄青霉素的敏感性，该作用具有抗生素浓度梯度、琥珀酸浓度梯度和时间效应。本专利技术还发现添加琥珀酸后，可以提高临床大肠埃希菌对其它抗生素(如氨苄青霉素、羟苄青霉素、青霉素G、庆大霉素、环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素和利福平等)的敏感性。以上结果表明，可以通过抗生素与琥珀酸联用提高细菌对抗生素敏感性的方法来达到治疗耐药菌的目的。本专利技术发现添加琥珀酸后，氨苄青霉素对其它细菌或耐药菌(如大肠杆菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华菌、铜绿假单胞菌和乙型链球菌)的杀菌作用明显提高，结果表明，琥珀酸可以增强其它细菌或耐药菌对氨苄青霉素的敏感性。本专利技术发现琥珀酸通过提高细菌的质子动力势，从而使进入细菌内部的抗生素含量增加，最终使细菌死亡。本专利技术构建了体外临床大肠埃希菌生物膜，通过琥珀酸和氨苄青霉素联用的方法，证明能有效清除生物膜细菌。进一步采用小鼠慢性尿道感染模型，于尿道中植入临床大肠埃希菌生物膜，然后注射琥珀酸和氨苄青霉素。结果发现，添加琥珀酸和氨苄青霉素的实验组具有明显的杀菌效果，能显著减少生物膜上的耐药菌，说明琥珀酸可提高临床大肠埃希菌生物膜对氨苄青霉素的敏感性。以上结果表明，琥珀酸联合抗生素可以清除动物机体内的耐药菌。综上所述，在抗生素中添加琥珀酸能明显提高细菌或耐药菌对抗生素的敏感性，从而达到抑菌或杀菌的目的。因此，本专利技术请求保护琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用。优选地，所述细菌为大肠杆菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华菌、铜绿假单胞菌或乙型链球菌中的至少一种。优选地，所述抗生素选自氨苄青霉素、羟苄青霉素、青霉素G、庆大霉素、环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素或利福平中的至少一种。优选地，为琥珀酸在提高大肠杆菌对氨苄青霉素敏感性方面的应用。优选地，为琥珀酸在提高大肠杆菌对羟苄青霉素、青霉素G、庆大霉素、环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素或利福平敏感性方面的应用。优选地，为琥珀酸在提高溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华菌、铜绿假单胞菌或乙型链球菌对氨苄青霉素敏感性方面的应用。本专利技术还请求保护一种抑菌或杀菌的药物，含有抗生素和琥珀酸。本专利技术还请求保护一种提高细菌对抗生素敏感性的方法，将琥珀酸与抗生素联用。在上述方法中，所述细菌为敏感菌或耐药菌。优选地，所述细菌包括但不限于大肠杆菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华菌、铜绿假单胞菌和乙型链球菌。因为这些细菌是常见的人类和养殖动物致病菌，如大肠杆菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华氏菌和铜绿假单胞菌均为革兰氏阴性菌，乙型链球菌为革兰氏阳性菌。这些细菌可以是耐药菌，也可以是敏感菌。优选地，所述抗生素选自但不限于氨苄青霉素、羟苄青霉素、青霉素G、庆大霉素、环丙沙星、四环素、红霉素、克林霉素和利福平。因为氨苄青霉素、羟苄青霉素、青霉素G为β-内酰胺类抗生素；庆大霉素为氨基糖苷类抗生素；环丙沙星为喹诺酮类抗生素；四环素为四环素类抗生素；红霉素为大环内酯类抗生素；克林霉素为林可酰胺类抗生素；利福平为抗结核药类。这些包括了目前临床使用的主要抗生素类型。优选地，所述的琥珀酸与抗生素的剂量比按重量计为1：0.0015～300。优选地，应用上述方法来提高细菌对抗生素的敏感性时，琥珀酸的使用量为3mg～30g/次给药。本专利技术还请求保护琥珀酸在制备清除生物膜细菌的制剂或药物中的应用。优选地，所述细菌为临床大肠埃希菌。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术首次发现琥珀酸能够提高细菌对抗生素的敏感性，从而克服细菌耐药性的问题，进一步研究发现琥珀酸通过提高细菌的质子动力势，从而使进入细菌内部的抗生素含量增加。将琥珀酸与抗生素联用可以显著提高抗生素的杀菌作用，与现有的只用抗生素作为抗细菌药物相比，具有更好的效果以及更高的安全性和可操作性，具有较好的应用前景。附图说明图1为实施例1在不同浓度的氨苄青霉素中添加20mM琥珀酸后，临床大肠埃希菌的生存率；A为临床大肠埃希菌YT16，B为临床大肠埃希菌YT28。图2为实施例1在10mg/mL氨苄青霉素中添加20mM琥珀酸后，不同时间下临床大肠埃希菌YT16和YT28的生存率。图3为实施例1在10mg/mL氨苄青霉素中添加不同浓度琥珀酸后，临床大肠埃希菌YT16和YT28的生存率。图4为实施例1在10mg/mL氨苄青霉素中添加20mM琥珀酸后，28株临床大肠埃希菌的生存率和杀菌率增加的倍数；A为生存率，B为杀菌率增加的倍数。图5为实施例2在不同青霉素类抗生素中添加20mM琥珀酸后，临床大肠埃希菌YT16和YT28的生存率；A为羟苄青霉素，B为羧苄青霉素，C为青霉素G钠盐。图6为实施例2在不同中抗生素中添加20mM琥珀酸后，临床大肠埃希菌YT16的生存率；A为庆大霉素，B为环丙沙星，C为四环素、红霉素、克林霉素和利福平。图7为实施例3在氨苄青霉素中添加20mM琥珀酸后，不同细菌的生存率。图8为实施例4琥珀酸联合氨苄青霉素对临床大肠埃希菌的治疗效果；A为临床大肠埃希菌生物膜体外杀菌实验结果，B为在小鼠体内尿道和肾脏中耐药菌的清除效果。图9为实施例5在氨苄青霉素中添加琥珀酸后，细菌体内氨苄青霉素含量变化情况。图10为实施例6添加本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用。

【技术特征摘要】
1.琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用。2.一种抑菌或杀菌的药物，其特征在于，含有抗生素和琥珀酸。3.一种提高细菌对抗生素敏感性的方法，其特征在于，将琥珀酸与抗生素联用。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述细菌为敏感菌或耐药菌。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述细菌为大肠杆菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、迟缓爱德华菌、铜绿假单胞菌或乙型链球菌中的至少一种。6.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李惠，彭博，彭宣宪，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44