一种羟基红花黄色素A的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种羟基红花黄色素A的制备方法，具体的，本发明专利技术所述的羟基红花黄色素A的制备方法包括步骤：提供羟基红花黄色素A粗品C的溶液，对所述的溶液进行柱层析纯化，得到羟基红花黄色素A；其中，所述的柱层析使用的洗脱剂为5‑15％(v/v)乙醇水溶液；其所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素A的含量＞30wt％。本发明专利技术制备的羟基红花黄色素A的纯度在99.5％以上，对设备要求低，操作简便，安全性高，成本低，产品纯度高，适于工业化、规模化生产。

Preparation of hydroxysafflower yellow A

The invention relates to a preparation method of hydroxy safflower yellow A, in particular, the preparation method of the hydroxy safflower yellow A comprises the steps of providing a solution of crude product C of the hydroxy safflower yellow A, purifying the solution by column chromatography, and obtaining the hydroxy safflower yellow A, wherein the column chromatography is used. The eluent is 5_15%(v/v) ethanol aqueous solution, and the content of hydroxy safflower yellow A in crude product C of the hydroxy safflower yellow A is more than 30 wt%. The purity of the hydroxy safflower yellow A prepared by the invention is over 99.5%, and the requirements for equipment are low, the operation is simple, the safety is high, the cost is low, the purity of the product is high, and the product is suitable for industrialization and large-scale production.

【技术实现步骤摘要】
一种羟基红花黄色素A的制备方法
本专利技术涉及天然药物提取领域，具体涉及一种羟基红花黄色素A的制备方法。
技术介绍
羟基红花黄色素A是红花药理功效的最有效水溶性部位，具有抗血小板和抗心肌缺血作用，并具有抗凝血酶诱导的血小板聚集活性、抗炎活性、细胞保护活性、抗肿瘤活性。可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集与释放，可竞争性地抑制血小板激活因子与血小板受体的结合，是红花黄色素的活血化瘀有效成分。现有研究中，关于羟基红花黄色素A的稳定性、药理作用、临床药物制剂的报道已有很多。研究发现羟基红花黄色素A干粉受热时，温度易不应高于50℃。目前关于一些关于从中药红花中提取分离羟基红花黄色素A的研究，如采用超声法提取，再经柱层析分离精制及冷冻干燥，制备得到羟基红花黄色素A干粉的方法，但该方法采用的超声法对设备的要求高、噪音污染大，不利工业化生产。研究中也有经加热提取、柱层析分离精制和冷冻或喷雾干燥制备得到羟基红花黄色素A干粉的方法，改方法提取时温度高，对设备要求高，能耗高，安全性较低，不利于环保，亦不利于羟基红花黄色素A的稳定。因此，本领域亟需开发一种能够快速、低能耗、低成本、高纯度、安全性高和易于工业化制备羟基红花黄色素A的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能够快速、低能耗、低成本制备高度度的羟基红花黄色素A的方法。本专利技术的第一方面，提供一种羟基红花黄色素A的制备方法，包括步骤：(a)提供羟基红花黄色素A粗品C的溶液，对所述的溶液进行柱层析纯化，得到羟基红花黄色素A；其中，所述的柱层析使用的洗脱剂为5-15％(v/v)乙醇水溶液；其所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素A的含量＞30wt％。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的羟基红花黄色素A粗品C中羟基红花黄色素A的含量＜99wt％，优选＜90wt％，更优选＜70wt％，最优选＜60wt％。在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的溶液通过将羟基红花黄色素A粗品C用去离子水溶解得到。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述洗脱剂为6-15％(v/v)乙醇水溶液。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述柱层析步骤中使用的层析柱中的填料为葡聚糖凝胶填料。在另一优选例中，所述的葡聚糖凝胶填料选自下组：SephadexG50、SephadexLH20、SephadexG15、SephadexG20，或其组合。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的羟基红花黄色素A粗品C与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为1:6-18，优选为1:8-15。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的柱层析使用的层析柱的径高比为1:6-35；优选为1:10-25。在另一优选例中，所述步骤(a)中，纯化得到羟基红花黄色素A的纯度大于99.5wt％。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的纯化步骤包括：在所述柱层析步骤中，对含有羟基红花黄色素A的洗脱液进行减压浓缩和干燥。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的减压浓缩的温度为20-50℃，优选为30-40℃。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述的干燥为冷冻干燥。在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述洗脱剂的洗脱速度为3-10ml/min。在另一优选例中，所述羟基红花黄色素A粗品C通过以下方法制备：(b)对含有羟基红花黄色素A的粗品B的溶液进行柱层析，分离得到所述羟基红花黄色素A粗品C。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的溶液通过将羟基红花黄色素A的粗品B溶液溶于去离子水中得到。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的柱层析采用反相层析填料柱进行。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述反相层析填料柱的填料选自下组：ODS填料、十八烷基硅烷键合硅胶C18填料，或其组合。在另一优选例中，所述在步骤(b)中，所述的柱层析中，所述的粗品B与所述柱层析使用的层析柱中的填料的重量比为1:4-20，优选为1:4-10。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的柱层析步骤中，使用的洗脱剂为5-40％(v/v)乙醇水溶液，优选5-20％(v/v)乙醇水溶液。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述柱层析包括步骤：收集羟基红花黄色素A浓度大于30％洗脱液。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的分离包括步骤：对所述柱层析得到的洗脱液进行减压浓缩。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的减压浓缩温度为20-60℃，优选为30-50℃。在另一优选例中，所述步骤(b)中，所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素的含量＞30wt％。在另一优选例中，所述含有羟基红花黄色素A的粗品B通过以下方法制备：(c)对红花水提物进行大孔树脂柱柱层析，分离得到羟基红花黄色素A的粗品B。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的大孔树脂柱的填料选自下组：XDA-8型大孔树脂填料、AB-8极性树脂填料，或其组合。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的红花水提物与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为2-20:1，优选为2-10:1。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的柱层析包括步骤：洗脱先用水洗脱2-7倍柱体积，再用10-90％(v/v)的乙醇水溶液进行洗脱。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的柱层析包括步骤：洗脱先用水洗脱4-6倍柱体积，再用50-70％(v/v)的乙醇水溶液进行洗脱。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的分离包括步骤：对所述柱层析得到的洗脱液进行减压浓缩。在另一优选例中，所述步骤(c)中，所述的减压浓缩在20-60℃下进行。在另一优选例中，所述的红花水提物是通过以下方法制备的：(d)用去离子水对红花药材进行提取，得到红花水提取。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述的红花药材与去离子水的重量比例为1:10-35。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述的红花药材与去离子水的重量比例为1:10-25。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述方法还包括步骤：提取后，对提取液进行减压浓缩。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述的减压浓缩的温度为20-60℃，优选为30-50℃。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述的红花水提物的相对密度为1.05-1.52，优选为1.17-1.45。在另一优选例中，所述步骤(d)中，所述方法还包括步骤：对所述红花药材进行浸泡，所述浸泡的温度为0-60℃，优选为18-40℃，更优选为室温。在另一优选例中，所述浸泡的时间为12-24h。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为本专利技术实施例1制备的羟基红花黄色素A纯度检测的高效液相色谱图。图2为本专利技术对比例2制备的羟基红花黄色素A纯度检测的高效液相色谱图。具体实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，得到了一种能够快速、低能耗、低成本、高纯度、安全性高和易于工业化制备羟基红花黄色素A的方法。本专利技术通过对含有羟基红花黄色素A的粗品进行柱层析纯化，去除杂质，得到纯化的羟基红花黄色素A。基于上述发现，专利技术人完成了本专利技术。术语如本文所用，术语“HPLC”是指高效液相色谱法。羟基红花黄色素A的制备羟基红花黄色素A是红花药理功效的有效成分，可抑制血小板本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，包括步骤：(a)提供羟基红花黄色素A粗品C的溶液，对所述的溶液进行柱层析纯化，得到羟基红花黄色素A；其中，所述的柱层析使用的洗脱剂为5‑15％(v/v)乙醇水溶液；其所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素A的含量＞30wt％。

【技术特征摘要】
1.一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，包括步骤：(a)提供羟基红花黄色素A粗品C的溶液，对所述的溶液进行柱层析纯化，得到羟基红花黄色素A；其中，所述的柱层析使用的洗脱剂为5-15％(v/v)乙醇水溶液；其所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素A的含量＞30wt％。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述柱层析步骤中使用的层析柱中的填料为葡聚糖凝胶填料。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述的羟基红花黄色素A粗品C与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为1:6-18，优选为1:8-15。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述的柱层析使用的层析柱的径高比为1:6-35，优选为1:10-25。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述洗脱剂的洗脱速度...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛振强，张田勇，钱勇，谢天培，周霖，
申请(专利权)人：上海诗丹德标准技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31