高纯度羟基红花黄素A的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种高纯度羟基红花黄素A的提取方法，包括：超临界CO2流体进行红花挥发性成分提取；醇水混合物对羟基红花黄素A的进行搅拌浸提；纳滤装置对羟基红花黄素A进行富集和初步纯化，采用离子交换树脂进一步纯化；以及真空干燥得到高纯度羟基红花黄素A。本发明专利技术的提取方法操作简单，效率高，分离羟基红花黄素A纯度达到95％以上，不仅提高了产品的质量还避免了现有技术中填料昂贵和分离条件中沉降过大等问题，大大降低了产品的成本，有利于中药提取类药物的发展，提高中药高端生物药品的国际的竞争力。

【技术实现步骤摘要】
高纯度羟基红花黄素A的提取方法
本专利技术属于红花药材的提取方法
更具体地说，本专利技术涉及一种生物法提取平均纯度不低于95％的羟基红花黄素A的高纯度羟基红花黄素A的提取方法。
技术介绍
红花属于双子叶植物纲的菊科红花属，为一年生草本植物。红花的原产地是埃及，经中东和印度等地首先传入到中国的西部地区，目前主要产地为新疆、甘肃、浙江、河南、四川等地区。红花在中国属于单一栽培植物，早在一千多年前就已被使用。红花的花朵具有活血通经、祛瘀止痛之功效，是传统的活血化瘀中药。红花还是天然红色素的原料，常用作染料和食用色素。红花的化学成分比较复杂，生物活性也很广泛，目前是亚洲地区研究和应用的“热点”植物之一。已有研究报道，红花中含有260多种化合物，比如核苷、核黄素及其降解产物、黄酮、木脂体、有机酸和箔醇类等，但其主要化学成分为查尔酮类色素和黄酮醇类化合物，其中查尔酮类色素的含量最高，主要包括红花黄素和红花红素，均属于黄酮类衍生物。黄酮醇类化合物包括山柰酚类和槲皮素等。红花黄色素(Saffloweryellow)是红花活血化瘀功效的有效成分，它有效阻止血栓进一步发展、促进血栓溶解，使阻塞的部分畅通、改善组织微循环，从而使组织得到更多的营养。它可以解除血管平滑肌的痉挛，具有镇痛、抗炎、抗疲劳、耐缺氧、降压等药理作用。因此，在平时的饮食中适当地补充红花黄色素，有益于人体健康。羟基红花黄素A的结构式目前一些企业正在开发的羟基红花黄素A制剂的主要有效成分即为羟基红花黄素A。20世纪80年代之前，大多学者认为羟基红花黄素A为Saffloweryellow或者Carthaminyellow，其化学分子式为C24H30015，但不能够确定其化学结构式。随后，羟基红花黄素A的化学组成及其化学结构式相继被给出。1981年，Onodera等分离得到safflominA，并确定是查尔酮的双糖碳甙；做ahashi等分离得到saffioryellowA和saffioryellowB，确定了其化学结构式，认为saffloryellowA与safllominA的化学结构相似。Onodera等分离得到safllominC，确定了其结构式。Meselhy等分离得到两种新的黄色素成HSYA(hydroxysaffioryellowA)和tinctorimine。Kazuma等分离得到precarthamin，并且认为其结构式与saffioryellowB相似。常见植物素的提取方法主要有：浸提法、纤维素酶法和有机溶媒提取法等。传统的浸提法具有操作简便、设备简单的优点，主要机理是相似相溶。选择溶剂的原则：选择性好，即对目标成分的溶解度大，对杂质的溶解度小；与其它组分不发生反应。羟基红花黄素A的极性较大，通常用水或者不同浓度的乙醇浸提。水的价格低廉且容易取得，而且安全无毒，大多数选用水提法。韩书昌等考察了水、30％的乙醇水溶液、70％的乙醇水溶液对羟基红花黄素A的提取效果。实验结果表明，在水中羟基红花黄素A的溶解性最好，提取率也最高，加热浸提优于常温浸提。但是，羟基红花黄素A受热易分解，加热影响提取率，因此采用常温提取。陆国权等用pH为3的酸性水提取羟基红花黄素A，料液比为1：50，在70℃下浸提72min，提取2次，收率达到93.4％。周平兰等确定的提取条件是，浸提2次，料液比是1：12或1：14，浸泡30rain，提取20min，其中浸泡时间和提取时间对羟基红花黄素A的提取都有重要的影响，回流提取比温浸法耗时短，中间不需要搅拌，节能省时。王义潮等确定的提取条件为，料液比1：40，在70℃下浸提时间90min、浸提3次。杨志福等分别用80％的丙酮、70％的甲醇和水提取羟基红花黄素A，其中70％的甲醇和水提取的效果好，但是甲醇有毒、挥发性大，故选用水提法。吴冬青等比较了几种浸取剂对羟基红花黄素A的提取效果，实验结果表明70％的酸性乙醇水溶液的提取效果最好。许珍珍等用HPLC法测定，以羟基红花黄素A百分含量为指标，对红花药液的醇沉工艺进行了评价和优化，并考察了醇沉浓度、药液浓度及pH值对羟基红花黄素A纯化效果的影响。杨晓君等考察了ZTC澄清剂对红花水提液的除杂效果的影响，以提取液中羟基红花黄素A含量和收膏率为指标对正交实验结果进行了综合评价。结果同时表明澄清剂的加入并没有造成有效成分的明显损失，可以应用于红花水提液的纯化。陈英等采用正交设计表，以羟基红花黄素A得率为指标，用HPLC法测定含量，对壳聚糖纯化红花的工艺进行了优化。雷玉霞等将红花水提液浓缩后大孔吸附树脂柱，以羟基红花黄素A含量为考察指标，对树脂柱进行了筛选，并对影响黄素色分离纯化的工艺参数进行了一系列的考察。目前红花的分离纯化技术除了传统的醇沉法外，澄清剂法(ZTC、壳聚糖凝胶等)、大孔树脂法都被广泛采用。醇沉法作为传统的纯化方法，曾经因为操作简便和工艺要求低而被广泛采用。但是醇沉法随着乙醇浓度的降低，红花中有效成分的含量也随之明显下降，要提高有效成分的含量需要提高醇浓度，而这样会导致生产成本的增加。澄清剂法和醇沉法相比较，在有效成分保留效果上相近，此外澄清剂多是以天然多糖为原料制成，安全无毒，适合药物和食品行业的纯化，与醇沉法相比显得更简单、更经济。大孔树脂法与其它两种方法相比较，所得羟基红花黄素A的纯度明显较高，比较适用于进一步的分离纯化提高纯度。但是，目前国内还未出现规模化生产红花黄素A的方法，随着红花黄素A被进一步的开发，市场的需求不断增加，提供一种能大规模生产高含量高品质的羟基红花黄素A产品的方法是目前市场上迫切需要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题或缺陷，并提供至少一个后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供一种获得高品质的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，采用超临界C02流体萃取技术来提取红花中的挥发油，不仅提高了提取率，还保护了药材中的其他热敏性成分，为接下来进一步从超临界萃余物里提取羟基红花黄素A打下了基础。本专利技术还有一个目的是提供一种避免现有技术中填料昂贵和分离条件中沉降过大等问题，大大降低了提取分离的成本的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，由于纳滤系统分离大分子进行富集和初步纯化，然后又用大孔树脂对红花提取液对其进行进一步纯化，再经过有机溶剂精制等工艺提取得到高品质的羟基红花黄素A，提取方法操作简单，效率高，分离羟基红花黄素A纯度达到95％以上。不仅提高了产品的质量还避免了现有技术中填料昂贵和分离条件中沉降过大等问题，大大降低了产品的成本。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，本专利技术提供了一种高纯度羟基红花黄素A的提取方法，包括：步骤一、红花挥发性成分提取：将粉碎过的红花药材置于超临界仪器中1000mL的萃取釜中以超临界CO2流体进行萃取得到红花超临界萃取物；步骤二、羟基红花黄素A的提取：向所述步骤一得到的红花超临界萃取物中加入醇水混合物，将温度升高到30～70℃，搅拌下提取1～4小时得到红花水提取液；步骤三、羟基红花黄素A的纯化：首先，将所述步骤二得到的红花水提取液采用纳滤装置进行富集和初步纯化；其次，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液；步骤四、将所述步骤三得到的洗脱液进行浓缩至干，将所得固体加入乙酸乙酯中，加入活性炭，搅拌下加热回流，趁热过滤，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、红花挥发性成分提取：将粉碎过的红花药材置于超临界仪器中1000mL的萃取釜中以超临界CO2流体进行萃取得到红花超临界萃取物；步骤二、羟基红花黄素A的提取：向所述步骤一得到的红花超临界萃取物中加入醇水混合物，将温度升高到30～70℃，搅拌下提取1～4小时得到红花水提取液；步骤三、羟基红花黄素A的纯化：首先，将所述步骤二得到的红花水提取液采用纳滤装置进行富集和初步纯化；其次，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液；步骤四、将所述步骤三得到的洗脱液进行浓缩至干，将所得固体加入乙酸乙酯中，加入活性炭，搅拌下加热回流，趁热过滤，滤液于‑20℃～‑5℃下冷却6～10小时，真空抽滤，2～3倍体积冷乙酸乙酯淋洗，所得固体在20～30℃真空干燥得羟基红花黄素A。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、红花挥发性成分提取：将粉碎过的红花药材置于超临界仪器中1000mL的萃取釜中以超临界CO2流体进行萃取得到红花超临界萃取物；步骤二、羟基红花黄素A的提取：向所述步骤一得到的红花超临界萃取物中加入醇水混合物，将温度升高到30～70℃，搅拌下提取1～4小时得到红花水提取液；步骤三、羟基红花黄素A的纯化：首先，将所述步骤二得到的红花水提取液采用纳滤装置进行富集和初步纯化；其次，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液；步骤四、将所述步骤三得到的洗脱液进行浓缩至干，将所得固体加入乙酸乙酯中，加入活性炭，搅拌下加热回流，趁热过滤，滤液于-20℃～-5℃下冷却6～10小时，真空抽滤，2～3倍体积冷乙酸乙酯淋洗，所得固体在20～30℃真空干燥得羟基红花黄素A。2.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤一中超临界CO2流体进行萃取的条件为：萃取温度为40～50℃、萃取压力为20～25MPa、萃取时间为2.5～4.0h。3.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤二中醇水混合物中醇水的体积比为1:5～30；提取条件为：提取温度为40～50℃、料液体积比为1:15～20、提取时间为2.5～4.5h。4.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，采用纳滤装置进行富集和初步纯化具体包括步骤：采用型号为UOF～4中空纤维膜为组件的纳滤装置，以20～30L/h，压力为0.2～0.4兆帕的流速进行浓缩，截留分子量为5000以上，得透过液。5.如权利要求1所述的高纯度羟基红花黄素A的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，采用离子交换树脂吸附洗脱得洗脱液具体包括步骤：将充分溶胀好的离子交换树脂进行湿法上柱，采...

【专利技术属性】
技术研发人员：张春颖，
申请(专利权)人：华远医药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11