远志呫吨酮Ⅲ的对照品的制备方法及固体对照品技术

本发明专利技术提供一种远志呫吨酮Ⅲ的对照品的制备方法，该方法依次包括以下步骤：富集浓缩工序、正相色谱纯化工序、聚酰胺纯化工序、中压反相色谱纯化工序和溶剂处理工序。本发明专利技术是一种具有高通量，能提供高纯度远志呫吨酮Ⅲ，且适合大量制备的远志呫吨酮Ⅲ对照品制备方法，并且该方法的远志呫吨酮Ⅲ的提取率也比较高。本发明专利技术能迅速获得纯度达到98.5％以上的远志呫吨酮Ⅲ，而且通量上有较大改进。而且通量上有较大改进。而且通量上有较大改进。

【技术实现步骤摘要】
对照品。
[0023]在本专利技术优选的实施方式之中，所述含有远志呫吨酮Ⅲ的原料提取物粗品的制备方法为将原料远志药材粉碎，利用醇系的水溶液浸泡，并在65～80℃进行回流提取，过滤得滤液，将滤液在30～80℃的温度下避光浓缩，得到远志呫吨酮Ⅲ的原料提取物粗品。
[0024]在本专利技术优选的实施方式之中，正相色谱纯化工序中，所述酯类溶剂:醇类溶剂的比例为8～1:1。
[0025]在本专利技术优选的实施方式之中，聚酰胺色谱纯化工序中，所述酯类溶剂:醇类溶剂的比例为4～1:1。
[0026]在本专利技术优选的实施方式之中，所述酯类溶剂为乙酸乙酯或乙酸丁酯，所述醇类溶剂为甲醇或乙醇。
[0027]在本专利技术优选的实施方式之中，中压反相色谱纯化工序中，用浓度5～50％的乙腈水溶液以压力为0.1～0.3Mpa进行洗脱。
[0028]在本专利技术优选的实施方式之中，醇系的水溶液为50～70％的甲醇水溶液或者50～70％的乙醇水溶液。
[0029]在本专利技术优选的实施方式之中，正相色谱纯化工序中，正相色谱柱的填料为粒径为100～300目的硅胶，中压反相色谱柱的填料为粒径为40～60μm的十八烷基硅烷键合硅胶。
[0030]在本专利技术优选的实施方式之中，溶剂处理工序中：用以质量比计5倍～20倍的水将远志呫吨酮Ⅲ半成品溶解，在第1滤液中，缓慢加入的甲醇的量为滤液体积的0.2～0.5倍。
[0031]本专利技术的另一方面，还提供一种纯度为98.5％以上的远志呫吨酮Ⅲ的固体对照品，其通过上述本专利技术的制备方法制备得到。
[0032]与现有技术相比，本专利技术具有如下特点：
[0033]1、本专利能够获得大量的远志呫吨酮Ⅲ纯品，工艺成熟稳定，为远志药材的质量控制提供坚实的标准物质原料，具有较高的经济价值。
[0034]2、本专利技术分离过程中采用利用了苯乙烯类
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二乙烯苯骨架大孔树脂吸附性与正相色谱层析、聚酰胺的协同效应，对远志呫吨酮Ⅲ的HPLC纯度有显著的提升，本专利技术还利用了远志呫吨酮Ⅲ在不同溶剂间的溶解度差异，进一步提高了纯度，这些操作都简单易行，容易工业化放大。本专利技术通过溶剂法处理处理得到98.5％以上纯品，试剂用量少、效率高、成本低、更加环保、利于规模化生产。
附图说明
[0035]图1为本专利技术实施例1的远志呫吨酮Ⅲ提取大致的流程图；
[0036]图2为本专利技术实施例1获得的远志呫吨酮Ⅲ纯品的MS图谱；
[0037]图3为远志呫吨酮Ⅲ纯品的H
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NMR图谱(DMSO
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d6，600MHz)；
[0038]图4为远志呫吨酮Ⅲ纯品的C
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NMR图谱(DMSO
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d6，150MHz)；
[0039]图5为实施例1获得远志呫吨酮Ⅲ纯品的HPLC谱图；
[0040]图6为比较例1获得远志呫吨酮Ⅲ纯品的HPLC谱图。
具体实施方式
[0041]以下记载本专利技术的具体实施方式。
[0042]本专利技术中，远志呫吨酮Ⅲ有时也称为目标物、或分离目标物。
[0043]如果并未特殊说明，本专利技术中目标物的纯度和含量的百分数，为以质量比计的含量。如果并未特殊说明，本专利技术中液体与液体含量配比的百分数，例如甲酸在乙腈水溶液中的含量配比，以体积分数计量。
[0044]本专利技术通过简单高效的操作流程，能够分离得到纯度很高的远志呫吨酮Ⅲ。本专利技术的制备分离方法依次包括以下步骤：
[0045]依次包括以下步骤：
[0046]富集浓缩工序：将含有远志呫吨酮Ⅲ的原料提取物粗品水溶液上样至苯乙烯类
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二乙烯苯骨架大孔树脂吸附柱，用大孔树脂吸附柱体积10～30倍的水洗脱去除杂质，再利用大孔树脂吸附柱体积3～10倍的以体积比计10～25％的甲醇水溶液或者10～25％的乙醇水溶液洗脱去除杂质，再利用大孔树脂吸附柱体积3～10倍的以体积比计30～60％的甲醇水溶液或者30～60％的乙醇水溶液洗脱获得含目标物的溶液，浓缩得到含有远志呫吨酮Ⅲ的第一粗品的工序；
[0047]正相色谱纯化工序：将含有远志呫吨酮Ⅲ的第一粗品上样至正相色谱柱，用包含酯类溶剂、醇类溶剂、水的混合洗脱液进行洗脱，酯类溶剂:醇类溶剂的比例为10～0.8:1，醇类溶剂:水的比例为5～2:1根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得到第二粗品；
[0048]聚酰胺色谱纯化工序：将含有第二粗品上样至聚酰胺色谱柱，用包含酯类溶剂、醇类溶剂、水的混合洗脱液进行洗，酯类溶剂:醇类溶剂的比例为8～3:1，醇类溶剂:水的比例为8～3:1根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得到第三粗品；
[0049]中压反相色谱纯化工序：将第三粗品上样至中压反相色谱，用浓度5～60％的乙腈水溶液或者甲醇水溶液以压力为0.02～1Mpa进行洗脱，根据TLC或者HPLC检测收集含目标物的洗脱液，浓缩、去除溶剂，得到远志呫吨酮Ⅲ半成品；
[0050]溶剂处理工序：将远志呫吨酮Ⅲ半成品利用水进行溶解，过滤得到第1滤液，在第1滤液中，缓慢加入甲醇或者乙醇，析出固体沉淀，过滤沉淀，干燥，得到远志呫吨酮Ⅲ对照品。
[0051]本专利技术的专利技术人发现，常规的逐渐增加色谱分离的梯度的分离方法，无法得到大量得到纯度很高的远志呫吨酮Ⅲ，推测原因可能是远志呫吨酮Ⅲ因有羟基含量太多，在正相色谱上的吸附过于严重，因此难以利用正相色谱的梯度洗脱效果，为此专利技术人不断尝试各类有效的纯化分离方法的组合，降低正相色谱在整个分离纯化中的应用比例，通过不断探索，发现苯乙烯类
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二乙烯苯骨架大孔树脂吸附性与正相色谱层析、聚酰胺的协同使用，可以获得非常好的纯化效果和收率。本专利技术的方法中最终步骤的溶剂处理工序，也对于提高纯度起到至关重要的作用，该步骤中特定的溶剂的配合，使得前期步骤中不能分离的杂质部分被大部分去除。上述工序的顺序很重要，不能轻易替换。本专利技术的分离方法一个特别之处在于色谱柱分离工序和大孔树脂吸附柱的有机组合和协同，利用大孔树脂的吸附作用，迅速提高目标物纯度，是本专利技术首次使用的方法。具体进行以下说明。
[0052]富集和浓缩工序中利用苯乙烯
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二乙烯苯骨架大孔树脂对于远志呫吨酮Ⅲ的特异
性吸附作用，可以迅速的提高目标物的纯度，具体原因尚不清楚，可能是由于苯乙烯
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二乙烯苯骨架的大孔树脂的特定结构对于远志呫吨酮Ⅲ特异性更强，专利技术人也尝试过苯乙烯
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丙烯酸酯类的大孔树脂，发现收率上会比苯乙烯
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二乙烯苯骨架大孔树脂差。因此在富集和浓缩步骤中，优选使用苯乙烯
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二乙烯苯骨架，作为常用的苯乙烯
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二乙烯苯骨架大孔树脂，可以使用AB
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8、HPD
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100、D
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101等型号的大孔树脂等。苯乙烯
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二乙烯苯骨架大孔树脂的孔本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种远志呫吨酮Ⅲ的对照品的制备方法，其特征在于，该方法依次包括以下步骤：富集浓缩工序：将含有远志呫吨酮Ⅲ的原料提取物粗品水溶液上样至苯乙烯类
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二乙烯苯骨架大孔树脂吸附柱，用大孔树脂吸附柱体积10～30倍的水洗脱去除杂质，再利用大孔树脂吸附柱体积3～10倍的以体积比计10～25％的甲醇水溶液或者10～25％的乙醇水溶液洗脱去除杂质，再利用大孔树脂吸附柱体积3～10倍的以体积比计30～60％的甲醇水溶液或者30～60％的乙醇水溶液洗脱获得含目标物的溶液，浓缩得到含有远志呫吨酮Ⅲ的第一粗品的工序；正相色谱纯化工序：将含有远志呫吨酮Ⅲ的第一粗品上样至正相色谱柱，用包含酯类溶剂、醇类溶剂、水的混合洗脱液进行洗脱，酯类溶剂:醇类溶剂的比例为10～0.8:1，醇类溶剂:水的比例为5～2:1根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得到第二粗品；聚酰胺色谱纯化工序：将含有第二粗品上样至聚酰胺色谱柱，用包含酯类溶剂、醇类溶剂、水的混合洗脱液进行洗，酯类溶剂:醇类溶剂的比例为8～3:1，醇类溶剂:水的比例为8～3:1根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，得到第三粗品；中压反相色谱纯化工序：将第三粗品上样至中压反相色谱，用浓度5～60％的乙腈水溶液或者甲醇水溶液以压力为0.02～1Mpa进行洗脱，根据TLC或者HPLC检测收集含目标物的洗脱液，浓缩、去除溶剂，得到远志呫吨酮Ⅲ半成品；溶剂处理工序：将远志呫吨酮Ⅲ半成品利用水进行溶解，过滤得到第1滤液，在第1滤液中，缓慢加入甲醇或者乙醇，静置并析出固体沉淀，过滤沉淀，干燥，得到远志呫吨酮Ⅲ对照品。2.根据权利要求1所述的远志呫吨酮Ⅲ...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪松，戴军旗，舒亚平，余德洋，房强强，钱勇，
申请(专利权)人：上海诗丹德标准技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：