使用受刺激的胎盘干细胞的血管生成制造技术

本文提供了受刺激的胎盘干细胞以及使用受刺激的胎盘细胞治疗患有循环系统疾病或紊乱的个体的方法。本发明专利技术还提供了使用这种受刺激的细胞或包含这种受刺激的细胞的细胞群诱导血管生成的方法。

Angiogenesis in the use of stimulated placental stem cells

This article provides methods of stimulating placental stem cells and the use of stimulated placental cells in the treatment of individuals with circulatory disorders or disorders. The present invention also provides a method for inducing angiogenesis using such stimulated cells or cell populations containing such stimulated cells.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用受刺激的胎盘干细胞的血管生成本申请要求2015年5月26日提交的美国临时专利申请No.62/166,504的权益，其公开内容通过引用整体并入本文。1.
本文提供了使用已经被一种或多种细胞因子刺激的组织培养塑料粘附胎盘细胞(例如胎盘干细胞，本文称为PDAC)促进血管生成和治疗循环系统疾病或紊乱(例如与血管形成不足或血流不足相关或由其引起的疾病或紊乱，或通过改善血管生成而可治疗的疾病或紊乱)的方法。2.
技术介绍
胎盘是特别有吸引力的干细胞来源。因为哺乳动物胎盘是丰富的，并且通常被作为医疗废物丢弃，因此它们代表医学上有用的干细胞的独特来源。本文提供了这样的分离的胎盘干细胞、胎盘干细胞的群体，以及使用其促进血管生成和治疗循环系统疾病或紊乱(例如通过促进血管生成而可治疗的疾病或紊乱)的方法。3.
技术实现思路
在一个方面，本文提供了组织培养塑料粘附胎盘细胞，例如胎盘干细胞，本文也称为PDAC(胎盘衍生粘附细胞，例如下文第5.2节中描述的胎盘衍生粘附细胞)，其已经被一种或多种细胞因子刺激。在某些实施方式中，受刺激的PDAC被促炎细胞因子刺激。在具体实施方式中，促炎细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18、TNF-α和/或INF-γ中的一种或多种。在具体实施方式中，促炎细胞因子是IL-Ιβ。在具体实施方式中，本文提供的受刺激的PDAC粘附于组织培养塑料，并且是通过例如流式细胞术确定的CD34-、CD10+、CD105+、CD200+。在一些实施方式中，本文所述的受刺激的PDAC(例如IL-1β刺激的PDAC)以比未受刺激的PDAC(例如尚未被细胞因子(例如促炎细胞因子，如IL-Ιβ)刺激的PDAC)更高的水平分泌促血管生成因子。在具体实施方式中，所述分泌因子包括GM-CSF、G-CSF、IL-6、GRO、MCP-1、卵泡抑素和/或IL-8。在具体实施方式中，本文所述的所述受刺激的PDAC(例如IL-1β刺激的PDAC)具有促血管生成特性。在另一方面，本文提供了治疗患有循环系统疾病或紊乱的个体的方法，其包括向所述个体施用治疗有效量的组织培养塑料粘附胎盘细胞，例如胎盘干细胞，本文也称为PDAC(胎盘衍生粘附细胞，例如下文第5.2节中描述的胎盘衍生粘附细胞)，其已经被一种或多种细胞因子刺激，其中所述受刺激的PDAC被以足以可检测地改善所述疾病或紊乱的一种或多种症状的量和时间施用于所述个体。在某些实施方式中，受刺激的PDAC被促炎细胞因子刺激。在具体实施方式中，促炎细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18、TNF-α和/或INF-γ中的一种或多种。在具体实施方式中，促炎细胞因子是IL-Ιβ。在具体实施方式中，本文提供了治疗有需要的受试者的疾病或紊乱的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的受刺激的PDAC，例如IL-Ιβ刺激的PDAC，例如IL-Ιβ刺激的CD34-、CD10+、CD105+、CD200+PDAC。在具体实施方式中，所述受刺激的PDAC被配制成药物组合物。在具体实施方式中，所述疾病或紊乱是心肌梗死。在另一个具体实施方式中，所述疾病或紊乱是充血性心力衰竭。在另一个具体实施方式中，所述疾病或紊乱是心肌病。在另一个具体实施方式中，用受刺激的PDAC，例如IL-Ιβ刺激的PDAC，例如IL-Ιβ刺激的CD34-、CD10+、CD105+、CD200+PDAC治疗的疾病或紊乱是糖尿病足溃疡(DFU)。在具体实施方式中，根据本文提供的方法治疗的具有DFU的受试者具有I型糖尿病。在另一个具体实施方式中，根据本文提供的方法治疗的具有DFU的受试者具有II型糖尿病。在某些实施方式中，根据本文提供的方法治疗的受试者具有多于一处DFU，例如受试者在单脚上具有多于一处DFU，或在每只脚上具有至少一处DFU。在具体实施方式中，受试者在一只脚或两只脚的底部具有一处或多处DFU。在某些实施方式中，根据本文提供的方法治疗的受试者具有外周神经病，例如对腿和/或脚的神经中的一个或多个的损伤。在某些实施方式中，根据本文提供的方法治疗的具有DFU的受试者具有DFU，其具有导致受试者的外周脉管系统中的血流中的中断的情况。在具体实施方式中，受试者具有外周动脉疾病(PAD)。在某些实施方式中，所述DFU由PAD引起和/或与PAD相关。在某些实施方式中，本文提供的治疗DFU的方法导致根据本文提供的方法治疗的受试者中的DFU的一种或多种症状的可检测的改善。DFU的示例性症状包括但不限于脚和/或小腿上的疮(sore)、溃疡和水疱；脚(或双脚)和/或小腿的疼痛；走路困难；脚(或双脚)的变色，例如脚(或双脚)显示出黑色、蓝色和/或红色；和感染的迹象(例如发烧、皮肤发红和/或肿胀)。在某些实施方式中，本文提供的治疗DFU的方法包括向具有DFU的受试者施用足以可检测地改善一个或多个改善征象的量和时间的受刺激的PDAC(例如包含受刺激的PDAC的药物组合物)，其中所述改善征象包括(i)溃疡尺寸减小；(ii)溃疡闭合：不存在引流或对敷料的需要的一个或多个溃疡的皮肤闭合；(iii)闭合后溃疡闭合保持指定时间段，例如闭合后2周、3周、4周、5周或6周；(iv)增加的到溃疡闭合的时间；(v)踝臂指数(ABI)的改善，踝臂指数是当受试者处于静止时测量踝部处和手臂中的血压，然后在受试者处于运动中(例如在跑步机上行走)时重复的测试，并且其可用于预测/评估PAD的严重度；(vi)趾肱指数(TBI)的改善，趾肱指数是与脚踝血压相反使用脚趾血压的类似于ABI的测试；(vii)经皮氧水平的改善，即接近溃疡的皮肤下面的组织中的氧水平(参见例如Ruangsetakit等.,JWoundCare,2010,19(5):202-6)；(viii)脉搏容积记录的改善，其是非侵入性血管测试，其中使用血压袖带和手持式超声设备获得关于手臂和腿中的动脉血流的信息；(ix)到大截肢(majoramputation)的时间，例如脚踝以上的截肢；(x)Wagner评分量表的改善，Wagner评分量表使用分级系统评估溃疡深度和骨髓炎或坏疽的存在：等级0(溃疡前或溃疡后病灶(lesion))、等级1(部分/全层溃疡)、等级2(探查到肌腱或囊)、等级3(深度，伴有骨炎)、等级4(部分脚坏疽)和等级5(全脚坏疽)；(xi)卢瑟福标准的改善，卢瑟福标准用于外周动脉疾病的分期，具有七个分类阶段：阶段0-无症状、阶段1-轻度跛行、阶段2-中度跛行、阶段3-严重跛行、阶段4-静息痛、阶段5-不超出足部的足趾的溃疡的缺血性溃疡，和阶段6-严重缺血性溃疡或明显坏疽；以及(xii)腿部静息痛评分的改善，腿部静息痛评分是疼痛的0-10量表，0为无疼痛，而10代表最大疼痛。在某些实施方式中，本文提供的治疗DFU的方法包括向患有DFU的受试者施用足以可检测地改善通过例如以下评估的受试者的生活质量的量和时间的胎盘干细胞(例如包含胎盘干细胞的药物组合物)：(i)36项简易格式健康调查(ShortFormHealthSurvey，SF-36)(参见如Ware等.,MedicalCare30(6):473-483)；(ii)糖尿病足溃疡量表简易格式(DiabeticFootUlce本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的受刺激的胎盘衍生粘附细胞，其中所述细胞粘附于组织培养塑料，并且其中所述细胞是CD10+、CD34‑、CD105+和CD200+，其中所述细胞已经在体外与一种或多种促炎细胞因子接触，并且其中所述细胞(1)促进内皮细胞的增殖；(2)促进内皮细胞群体中的芽或管状结构的形成；或(3)促进内皮细胞的迁移。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.26 US 62/166,5041.一种分离的受刺激的胎盘衍生粘附细胞，其中所述细胞粘附于组织培养塑料，并且其中所述细胞是CD10+、CD34-、CD105+和CD200+，其中所述细胞已经在体外与一种或多种促炎细胞因子接触，并且其中所述细胞(1)促进内皮细胞的增殖；(2)促进内皮细胞群体中的芽或管状结构的形成；或(3)促进内皮细胞的迁移。2.权利要求1所述的分离的细胞，其中所述细胞是如通过流式细胞术确定的CD10+、CD34-、CD105+和CD200+。3.权利要求1所述的分离的细胞，其中所述促炎细胞因子是IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18、TNF-α或INF-γ中的一种或多种。4.权利要求3所述的分离的细胞，其中所述促炎细胞因子是IL-1β。5.权利要求1-4中任一项所述的分离的细胞，其中所述细胞以比未与所述一种或多种促炎细胞因子接触的分离的胎盘衍生粘附细胞更高的水平分泌营养因子。6.权利要求5所述的分离的细胞，其中所述营养因子包括GM-CSF、G-CSF、IL-6、GRO、MCP-1、卵泡抑素或IL-8中的至少一种。7.权利要求5所述的分离的细胞，其中所述营养因子包括GM-CSF、G-CSF、IL-6、GRO、MCP-1、卵泡抑素和IL-8。8.一种分离的细胞群体，其包含权利要求1-7中任一项所述的细胞。9.权利要求8所述的分离的细胞群体，其中所述群体中至少50％的所述细胞是权利要求1所述的细胞。10.权利要求8所述的分离的细胞群体，其中所述群体中至少90％的所述细胞是权利要求1所述的细胞。11.一种治疗患有循环系统疾病或紊乱的个体的方法，其包括向所述个体施用权利要求1-7中任一项所述的细胞的群体。12.权利要求11所述的方法，其中所述方法包括向所述个体施用足以可检测地改善所述疾病或紊乱的一种或多种症状的量和时间的权利要求1所述的细胞的群体。13.权利要求11或12所述的方法，其中所述疾病或紊乱是糖尿病足溃疡(DFU)。14.权利要求13所述的方法，其中所述DFU由外周动脉疾病(PAD)引起和/或与其相关。15.权利要求11所述的方法，其中所述循环系统疾病或紊乱是心脏疾病或损伤。16.权利要求11所述的方法，其中所述疾病或紊乱是肢体中或周围的血流中断。17.权利要求16所述的方法，其中肢体中或周围的所述血流中断是由外周动脉疾病(PAD)或外周血管疾病(PVD)引起。18.权利要求11至13所述的方法，其中所述疾病或紊乱是外周动脉疾病(PAD)。19.权利要求11至13所述的方法，其中所述疾病或紊乱是外周血管疾病(PVD)。20.权利要求11至19所述的方法，其中所述方法包括在第1天和第8天以(i)3×106；(ii)1×107；或(iii)3×107个所述细胞的浓度向所述个体肌内施用权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·E·卡拉西维兹门德兹，A·弗兰克基，J·图纳，E·劳，J·帕雷德斯，K·拉巴佐，H·拉纳，W·霍夫加尔特纳，R·J·哈里里，
申请(专利权)人：细胞结构公司，
类型：发明
国别省市：美国,US