本发明专利技术属于基因和蛋白的功能与应用领域，涉及磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(phosphatidylinositol transfer protein cytoplasmic 1,PITPNC1)的新用途，特别是涉及PITPNC1在制备治疗胃癌的药物中的应用。本发明专利技术证实了沉默PITPNC1慢病毒转染对胃癌细胞网膜转移的抑制性。本发明专利技术为研究抑制胃癌网膜转移的新靶点和新策略提供了理论依据和临床基础。
The application of PITPNC1 in the preparation of drugs for the treatment of gastric cancer
The present invention belongs to the functional and application fields of genes and proteins, involving the new use of the phosphatidyl inositol transporter cytoplasmic 1 (phosphatidylinositol transfer protein cytoplasmic 1, PITPNC1), especially the application of PITPNC1 in the preparation of drugs for the treatment of gastric cancer. The present invention confirms the inhibitory effect of silencing PITPNC1 lentiviral transfection on the omental metastasis of gastric cancer cells. The present invention provides a theoretical basis and a clinical basis for the study of new targets and new strategies for inhibiting the omental metastasis of gastric cancer.
【技术实现步骤摘要】
PITPNC1在制备治疗胃癌的药物中的应用
本专利技术属于基因和蛋白的功能与应用领域，涉及磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(PITPNC1)的新用途，特别是涉及PITPNC1在制备治疗胃癌的药物中的应用。
技术介绍
胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率与死亡率均位列我国各类肿瘤前三位[Chen,W.,etal.,CancerstatisticsinChina,2015.CACancerJClin,2016.66(2):p.115-32.]，整体治疗效果及预后较差。网膜转移是胃癌常见的转移方式和特征性表现，是胃癌患者预后不良的重要因素之一，深入研究其机制对改善患者预后具有重要意义。胃癌早期诊断率低，网膜转移后失去根治手术机会，预后较差，寻找有效的抑制网膜转移的药物可改善患者预后，目前缺乏有效的用药靶点。胃癌发生网膜种植性转移是一个多阶段、多因素参与的复杂过程。其基本步骤包括：原发灶癌细胞脱落进入腹腔；脱落癌细胞抵抗失巢凋亡；癌细胞黏附大网膜，增殖侵袭，新生血管形成，发展成转移癌结节。可见抵抗失巢凋亡、具备黏附功能是大网膜转移灶形成的必要条件。肿瘤细胞抵抗失巢凋亡的机制研究涉及整合素转变、抗凋亡通路激活、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)及非编码RNA调控等多个领域，而失巢后的肿瘤细胞通过能量代谢重组增加抵抗凋亡的能力成为近年来研究热点。研究表明，脱离细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)的肿瘤细胞因葡萄糖摄取减少激活AMPK(Adenosine5‘-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase)，抑制乙酰辅酶A羧化酶1/2(acetyl-CoAcarboxylases1and2,ACC1/2)从而减少因脂肪酸合成消耗的NADPH((Reduced)NicotinamideAdenineDinucleotidePhosphate)，促进脂肪酸β氧化增加NADPH产生，避免肿瘤细胞发生失巢凋亡[Paoli,P.,E.Giannoni,andP.Chiarugi,Anoikismolecularpathwaysanditsroleincancerprogression.BiochimBiophysActa,2013.1833(12):p.3481-3498.]。可见对于失巢后的肿瘤细胞，脂肪酸氧化在其代谢重组以维持生存及促进转移发生过程中具有重要作用。就胃癌网膜转移而言，网膜脂肪细胞在网膜转移过程中可能有重要作用：已有研究发现，转移灶中的脂肪细胞可为肿瘤细胞提供能源物质，促进肿瘤细胞代谢重组和定植；与脂肪细胞共培养的胃癌细胞脂肪酸摄取增加，脂肪酸分解代谢加强，通过PI3K-Akt通路上调侵袭能力[Xiang,F.,etal.,Omentaladipocytesenhancetheinvasivenessofgastriccancercellsbyoleicacid-inducedactivationofthePI3K-Aktsignalingpathway.IntJBiochemCellBiol,2017.84:p.14-21.]。然而，网膜脂肪细胞是否可通过促进胃癌细胞脂肪酸β氧化从而诱导抵抗失巢凋亡仍不明确。磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(phosphatidylinositoltransferproteincytoplasmic1,PITPNC1)是一个新发现的参与高尔基体分泌的蛋白[Halberg,N.,etal.,PITPNC1RecruitsRAB1BtotheGolgiNetworktoDriveMalignantSecretion.CancerCell,2016.29(3):p.339-53.]，与肿瘤转移相关[Png,K.J.,etal.,AmicroRNAregulonthatmediatesendothelialrecruitmentandmetastasisbycancercells.Nature,2011.481(7380):p.190-4.]，具有结合与转运磷脂酸的能力，可维持细胞内膜系统间的磷脂酰肌醇循环，进而维持细胞内膜系统的稳定及细胞第二信使功能的正常进行[Garner,K.,etal.,Phosphatidylinositoltransferprotein,cytoplasmic1(PITPNC1)bindsandtransfersphosphatidicacid.JBiolChem,2012.287(38):p.32263-76.]。而关于此磷脂酸转运蛋白在网膜脂肪细胞诱导胃癌细胞抵抗失巢凋亡过程中的作用未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(phosphatidylinositoltransferproteincytoplasmic1,PITPNC1)的新用途，具体是PITPNC1的表达调控物在制备治疗胃癌的药物中的应用。根据本专利技术所述的应用的进一步特征，所述PITPNC1的表达调控物是PITPNC1的抑制剂。优选地，所述PITPNC1的抑制剂是含PITPNC序列的shRNA的慢病毒。根据本专利技术所述的应用的进一步特征，所述治疗胃癌的药物是抑制胃癌网膜转移的药物。在本专利技术中，专利技术人对111例胃癌患者的石蜡组织标本进行PITPNC1免疫组化(immunohistochemistry,IHC)表达量评估，并在功能学实验中探索脂肪细胞对胃癌细胞的黏附、抵抗失巢凋亡功能的影响。在机制挖掘层面，专利技术人检测了与脂肪细胞共培养后胃癌细胞脂肪酸摄取水平及β氧化水平，并针对PITPNC1调控胃癌细胞脂质代谢、黏附及抵抗失巢凋亡的分子机制进行研究。综合有关实验结果表明，PITPNC1的表达水平与胃癌网膜转移相关，参与胃癌细胞脂质代谢从而诱导黏附及抵抗失巢凋亡。故确定PITPNC1检测可以有效预测胃癌患者预后，可以将PITPNC1的表达调控物应用于制备治疗胃癌的药物，特别是将PITPNC1的抑制剂用于制备抑制胃癌网膜转移的药物。本专利技术构造了含PITPNC序列的shRNA的慢病毒，获得了PITPNC1稳定沉默的细胞株。实验结果表明，沉默PITPNC1的胃癌细胞的脂肪酸β氧化速率明显降低，细胞黏附功能明显下降，失巢凋亡增加，明显的证实了沉默PITPNC1慢病毒转染对胃癌细胞网膜转移的抑制性。本专利技术首次揭示了在胃癌中，肿瘤细胞可通过脂肪酸β氧化利用网膜脂肪细胞来源的脂肪酸；首次证实网膜脂肪细胞可以增加胃癌细胞黏附能力，诱导抵抗失巢凋亡；首次发现PITPNC1在网膜转移胃癌病灶中的特异性表达，并提供PITPNC1作为抑制胃癌网膜转移的药物靶标。总的来说，PITPNC1是介导胃癌网膜转移的重要分子，其通过促进胃癌细胞以脂肪酸β氧化途径利用网膜细胞来源的脂肪酸，增加了胃癌细胞黏附能力和失巢凋亡抵抗。因此，可以认为，沉默PITPNC1有可能成为抑制胃癌网膜转移的重要手段之一。因此，本专利技术为研究抑制胃癌网膜转移的新靶点和新策略提供了理论依据和临床基础。附图说明图1A是从8例癌旁组织及胃癌组织的手术标本所提取的PITPNC1蛋白的蛋白质印迹杂交(Westernblo本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(phosphatidylinositol transfer protein cytoplasmic1,PITPNC1)的表达调控物在制备治疗胃癌的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.磷脂酰肌醇转运蛋白细胞质1(phosphatidylinositoltransferproteincytoplasmic1,PITPNC1)的表达调控物在制备治疗胃癌的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PITP...
【专利技术属性】
技术研发人员：石敏，谭宇静，刘雅静，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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