一种水溶性卡巴他赛抗癌药物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种水溶性卡巴他赛抗癌药物的制备方法，属于医药领域。本发明专利技术以酸酐修饰透明质酸，再接于卡巴他赛，该聚合物表现出良好的注射安全性、自聚集特性和载药能力。并且本发明专利技术的CTX药物前体比临床药物CTX具有相类似的抗肿瘤活性，在体内可缓慢水解，有效减少了体内毒性。本发明专利技术的CTX药物前体在水中有较好的溶解性。本发明专利技术的CTX药物前体靶向性有所增加。

【技术实现步骤摘要】
一种水溶性卡巴他赛抗癌药物的制备方法
本专利技术涉及一种水溶性卡巴他赛抗癌药物的制备方法，属于医药领域。
技术介绍
前列腺癌在临床中是较为常见的一种男性泌尿生殖系统肿瘤，欧美地区具有极高发病率，在男性恶性肿瘤排名中占第2位。我国前列腺癌发病率虽然少于欧美地区，但也具有逐年增长趋势，为男性泌尿生殖系恶性肿瘤排名第3位。目前临床中对前列腺癌治疗时，方法主要包括保守治疗、外科手术治疗、内分泌治疗、化疗等，并根据患者分期差异选用不同治疗措施。卡巴他赛是治疗前列腺癌的一种新药。卡巴他赛，英文名cabazitaxel，其分子结构式如式Ⅰ所示，化学名(2α,5β,7β,10β,13α)-4-乙酰基-13-({(2R,3S)-3[(叔丁基氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯丙酸})-1-羟基-7，10-二甲氧基-9-氧代-5，20-环氧紫杉烷-11-烯-2-苯甲酰氧基-丙烷-2-酮，由赛诺菲-安万特公司研发，是2010年6月17日美国FDA批准上市的紫杉烷类微管抑制剂抗肿瘤药，与泼尼松联用治疗晚期前列腺癌。卡巴他赛水溶性差，体内毒性大，为解决上述问题，以纳米制剂为基础的给药系统备受关注，如水溶性前药、脂质体、聚合物胶束等。其中，疏水化修饰多糖聚合物胶束以其载药能力强，缓释特性和肿瘤靶向性等优势在药物传递系统领域备受关注。由N-乙酰基-D-葡糖胺和D-葡萄糖醛酸组成的天然多糖的透明质酸(HA)与细胞特异性表面标志物如CD44和RHAMM具有很强的亲合力。HA在生物功能上起着重要作用，如稳定和组织ECM，调节细胞粘附和运动，以及介导细胞增殖和分化。HA在许多类型的肿瘤中也与血管发生密切相关，其中HA受体(CD44和RHAMM)在表面上大量过表达。因此，具有高转移活性的恶性细胞通常表现出HA的增强的结合和摄取。HA及其衍生物已广泛用作各种治疗剂的靶向特异性药物递送载体。透明质酸作为药用高分子材料，可以与卡巴他赛偶合，形成前药。现有报道的该药物前体与透明质酸的结合，大多集中于将透明质的COOH进行修饰后与药物前体相连，透明质酸的羧酸部分是透明质酸受体CD44的识别位点，但是该处的位阻较大，不易与卡巴他赛连接。现有的对HA羟基改性的方法，多为与烷基琥珀酸酐或甲基丙烯酸酐进行酯化，但是反应条件不易控制。并且MeHA的取代度(DS)较低，DS的取值范围也较窄，在一定程度上，酯化不足是导致MeHA水凝胶机械性能不能满足的主要原因之一。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术将透明质酸与二酸酐反应，在透明质酸的羟基处对透明质酸进行修饰，修饰后的透明质酸既能与受体CD44结合，又能与卡巴他赛药物偶联。并且本专利技术的二酸酐改性方法具有高取代度和高性能。本专利技术的第一个目的是提供一种卡巴他赛(CTX)药物前体的制备方法，所述方法是通过二酸酐修饰透明质酸的羟基，然后再与卡巴他赛药物耦联。在本专利技术的一种实施方式中，所述卡巴他赛药物前体的结构式如下所示：在本专利技术的一种实施方式中，所述方法的具体步骤为：(1)在溶剂存在下，将透明质酸与二酸酐按照一定摩尔比，反应生成透明质酸衍生物；(2)透明质酸衍生物在缩合剂的存在下，与卡巴他赛发生酯化反应，生成卡巴他赛药物前体。在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(1)中的溶剂为甲酰胺、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、1,3-二甲基-2-咪唑啉酮或六甲基磷酰三胺中的一种或两种以上组合。在本专利技术的一种实施方式中，所述透明质酸与溶剂的比例为1:70～100(m/v)。在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(1)中二酸酐为马来酸酐、邻苯二甲酸酐、丁二酸酐或二甘醇酸酐。在本专利技术的一种实施方式中，所述透明质酸与二酸酐的摩尔比为1:4～4:1。在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(1)的反应条件为反应温度为40～60℃，反应时间为4～6h，反应结束后冷却至室温，用溶剂清洗后离心冻干。在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(2)中缩合剂为N,N’-二环己基碳二亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基、三吡咯烷基溴化鏻六氟磷酸盐、4-二甲氨基吡啶、1-羟基苯并三唑、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯或O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸中的一种或两种以上组合。在本专利技术的一种实施方式中，所述步骤(2)的反应条件为反应温度为30～50℃，反应时间为1～3天。本专利技术的第二个目的是提供所述方法制备得到的卡巴他赛药物前体。本专利技术的第三个目的是提供所述的卡巴他赛药物前体在制备前列腺药物中的应用。在本专利技术的一种实施方式中，所述的卡巴他赛药物前体由亲水基团与卡巴他赛药物通过可断裂的酯键连接，利于前提药物在体内通过水解的方式直接释放抗肿瘤成分。本专利技术提供的卡巴他赛药物前体既能溶解于吐温等两亲性表面活性剂又可以溶解于水，这大大增加了卡巴他赛药物的应用范围。本专利技术提供的卡巴他赛药物抗癌药物化合物，具有高抗癌活性且毒性更低，所述的化合物不仅可以溶于水，而且在水溶液中能够形成纳米颗粒，具有药物缓释功能。本专利技术的水溶性卡巴他赛药物化合物，含有抗癌药物活性部分和亲水部分，抗癌药物活性部分是具有抗癌活性的药物化合物分子卡巴他赛，亲水部分是水溶性透明质酸衍生物。它们以酯键共价结合形成本专利技术的抗癌药物化合物。本专利技术的优点和效果：(1)本专利技术的CTX药物前体比临床药物CTX具有相类似的抗肿瘤活性，在体内可缓慢水解，有效减少了体内毒性。(2)本专利技术的CTX药物前体在水中有较好的溶解性。(3)本专利技术的CTX药物前体靶向性有所增加。(4)本专利技术以酸酐修饰透明质酸，再接于卡巴他赛，该聚合物表现出良好的注射安全性、自聚集特性和载药能力。具体实施方案下面是对本专利技术进行具体描述。实施例1：马来酸—透明质酸衍生物的制备将1.0g透明质酸加入到80mL的甲酰胺中，50℃下强烈搅拌；将马来酸(透明质酸：马来酸摩尔比＝0.4：1.6、0.6：1.4、0.8：1.2、1：1、1.2：0.8、1.4：0.6、1.6：0.4)溶解于20mL甲酰胺中，加入到透明质酸溶液中，反应5h后将溶液冷却至室温。将冷却后的溶液溶解在无水乙醇下，强烈搅拌，沉淀。用无水乙醇反复清洗沉淀，11000r/min条件下离心3h。倾析，并用蒸馏水溶解。用2molNaOH溶液将上述溶液pH值调至8～9。用去离子水透析24小时。-63℃下冷冻24h,-112℃真空干燥48h。产率：75～90％。卡巴他赛药物前体1的制备将马来酸—透明质酸衍生物粉末600mg溶解在5mL无水DMSO中，分别加入不同摩尔比的DCC和DMAP。将溶液搅拌1小时以激活马来酸—透明质酸衍生物的羧基。将不同量卡巴他赛(10和20mg)溶解在1mL无水DMSO中，并使用注射器在干燥的N2下缓慢加入到上述溶液中。然后将混合物在40℃下搅拌2天。使用透析膜(MWCO：3500Da)将所得溶液用DMSO透析1天，用去离子水透析去离子水，以除去未反应的卡巴他赛。收集卡巴他赛药物前体1并冻干3天并进行分析。产率：65％～88％。在乙腈/水(50:50，v/v)的混合溶液中，通过在227nm的UV吸光度测量缀合物上卡巴他赛的载药量(重量％)。最低载药量为9.1％，最高载药量为23.8％。载药量与水溶性之本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种卡巴他赛药物前体的制备方法，其特征在于，所述方法是通过二酸酐修饰透明质酸的羟基，然后再与卡巴他赛药物耦联。

【技术特征摘要】
1.一种卡巴他赛药物前体的制备方法，其特征在于，所述方法是通过二酸酐修饰透明质酸的羟基，然后再与卡巴他赛药物耦联。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述卡巴他赛药物前体的结构式如下所示：3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤为：(1)在溶剂存在下，将透明质酸与二酸酐按照一定摩尔比，反应生成透明质酸衍生物；(2)透明质酸衍生物在缩合剂的存在下，与卡巴他赛发生酯化反应，生成卡巴他赛药物前体。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的溶剂为甲酰胺、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、1,3-二甲基-2-咪唑啉酮或六甲基磷酰三胺中的一种或两种以上组合。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中二酸酐为马来酸酐、邻苯二甲酸酐、丁二酸酐或二甘醇酸酐；所述透明质酸与二酸酐的摩尔比为1:4...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾惠雯，纵朝阳，陆超龙，张威，孙雅泉，
申请(专利权)人：盐城师范学院，南京工业大学大丰海洋产业研究院，
类型：发明
国别省市：江苏,32