The present invention discloses ASPCR primers for detecting the main resistance mutation site D30N of the nucleoside reverse transcriptase inhibitor, each of which is composed of the upstream specific sequence and the downstream sequence. Accordingly, inventors have established corresponding detection methods and kits. The invention can detect the mutation of the base of the 270 - bit amino acid of the pol gene of the HIV 1 virus RNA. The designed ASPCR primers can only specifically amplify the mutant template for the specific location point base mutation sequence to effectively detect the low abundance resistance of AIDS, and overcome the long experimental period and high detection abundance of the genotypic detection method. Shortcomings. The invention only involves the common method of real time PCR detection, which is easy to master, fast in operation, with high specificity, high sensitivity, simple and fast, low cost and so on. The gene type can be judged according to the amplification curve of PCR and the value of CT.
【技术实现步骤摘要】
艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点D30N的引物及其应用
本专利技术属于PCR检测
,尤其涉及艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点D30N的引物及其应用。
技术介绍
艾滋病自1981年发现以来,迅速在全世界蔓延,已成为危害人类健康的重大公共卫生问题。据UNAIDS报道,截至2016年11月30日,全国报告现存活艾滋病病毒(HIV)感染者/AIDS病人659990例,报告死亡206336例。现存活HIV感染者383983例,AIDS病人276007例。高效抗逆转录病毒治疗已广泛应用于艾滋病患者的临床治疗,目前约有1560万艾滋病病毒感染者接受抗逆转录病毒治疗,极大地提高了患者的生存率。然而,抗病毒治疗的人数及地区的快速扩大也导致艾滋病耐药毒株的传播和流行。我国不同地区抗病毒治疗人群耐药发生率从3%到56%不等。对于艾滋病初治患者,抗病毒治疗方案为2种核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)+1种非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)或2种NRTIs+1种蛋白酶抑制剂(PIs),分别以HIV病毒pol基因上的逆转录酶和蛋白酶为靶标。艾滋病的耐药发生在艾滋病病毒pol基因(SEQ.ID.NO.7)上,主要分为NRTIs耐药突变、NNRTIs耐药突变和PIs耐药突变。其中PIs药物有沙奎那韦,利托那韦,茚地那韦,奈非那韦,安普那韦和洛匹那韦等,可诱导产生D30N、I54V、G73C等耐药突变。病毒耐药是导致治疗失败的主要原因之一,采用经济高效的耐药检测方法,及时了解HIV治疗患者的耐药性,对于提高艾滋病治疗效果和控制艾滋病疫情有重要意义。临床上广泛使用的耐药检测 ...
【技术保护点】
1.艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点D30N的引物,其特征在于为引物对一、引物对二或引物对三,每个引物对均由上游特异序列和下游序列组成;所述引物对一的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2的碱基序列;所述引物对二的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.3和SEQ.ID.NO.4的碱基序列;所述引物对三的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.5和SEQ.ID.NO.6的碱基序列。
【技术特征摘要】
1.艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点D30N的引物,其特征在于为引物对一、引物对二或引物对三,每个引物对均由上游特异序列和下游序列组成;所述引物对一的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2的碱基序列;所述引物对二的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.3和SEQ.ID.NO.4的碱基序列;所述引物对三的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.5和SEQ.ID.NO.6的碱基序列。2.权利要求1所述引物在检测艾滋病治疗药物核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变位点D30N中的应用。3.艾滋病治疗药物核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变位点D30N的ASPCR检测方法,其特征在于采用权利要求1所述引物,针对D...
【专利技术属性】
技术研发人员:梁浩,蒋俊俊,叶力,臧宁,余军,陈荣风,杨全略,黄颉刚,宁传艺,廖艳研,梁冰玉,
申请(专利权)人:广西医科大学,
类型:发明
国别省市:广西,45
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