miRNA在制备检测心脏病试剂、试剂盒中的应用及检测试剂、检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了miRNA在制备检测心脏病试剂、试剂盒中的应用及检测试剂、试剂盒和检测方法，属于医学生物技术领域。通过开发新型的miRNA包括miR‑155‑5p、miR‑216a‑5p或miR‑217F‑5p，发现在患有心脏疾病的心肌细胞中表达显著上升，因此本发明专利技术中提供的miR‑155‑5p、miR‑216a‑5p或miR‑217F‑5p可以作为心脏相关疾病的风险预估与检测，另外，本发明专利技术还提供了miR‑155‑5p、miR‑216a‑5p或miR‑217F‑5p的检测试剂和检测试剂盒，借助于实时定量PCR的技术来统计微小RNA变化，具有分析样本需要量小、自动化程度高、避免污染等优点。 1

【技术实现步骤摘要】
miRNA在制备检测心脏病试剂、试剂盒中的应用及检测试剂、检测试剂盒
本专利技术涉及医学生物
，具体而言，涉及miRNA在制备检测心脏病试剂、试剂盒中的应用及检测试剂、检测试剂盒。
技术介绍
目前，心血管疾病是导致人类死亡的第一杀手，心力衰竭是心血管疾病中的一种，心力衰竭并不是一个独立的疾病，而是心脏疾病发展的终末阶段，但近几年心力衰竭群体年轻化趋势十分明显，但并没有引起年轻一族的足够重视。如何有效诊断和预防心力衰竭目前医学和生物学研究亟待解决的问题。微小RNA(microRNA，miR)是一类广泛存在于真核生物、长度为21-25nt的非蛋白质编码小RNA，它们能以序列特异性方式调节基因表达，在发育、凋亡、代谢以及人类疾病方面都起着不容忽视的作用。miR的生理病理调控机制是近几年来受到高度重视的一门新型学科。近年来的研究表明，心血管疾病会导致体内特殊的微小RNA的表达量发生明显的变化，因此，通过检测体液中的特定微小RNA的变化即可起到诊断、预防心血管疾病的作用。但是，目前对心力衰竭的相关特定微小RNA的研究尚存在不足。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供如下(a)-(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：(a)miR-155-5p；(b)miR-216a-5p；(c)miR-217F-5p；以缓解现有技术中存在的对心脏疾病相关的特定miR研究尚有不足的技术问题。本专利技术的第二目的在于提供一种用于诊断心脏疾病的试剂。本专利技术的第三目的在于提供一种用于诊断心脏疾病的试剂盒。为了实现本专利技术的上述目的，采用以下技术方案：如下(a)-(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：(a)miR-155-5p；(b)miR-216a-5p；(c)miR-217F-5p。一种用于诊断心脏疾病的试剂，试剂包括如下(A)-(C)任意一种或多种物质：(A)用于检测miR-155-5p的引物；(B)用于检测miR-216a-5p的引物；(C)用于检测miR-217F-5p的引物。一种用于诊断心脏疾病的试剂盒，试剂盒包括上述的用于诊断心脏疾病的试剂。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：通过开发新型的miRNA包括miR-155-5p、miR-216a-5p或miR-217F-5p，发现在患有心脏疾病的心肌细胞中表达显著上升，因此本专利技术中提供的miR-155-5p、miR-216a-5p或miR-217F-5p可以作为心脏相关疾病的风险预估与检测，另外，本专利技术还提供了miR-155-5p、miR-216a-5p或miR-217F-5p的检测试剂和检测试剂盒，借助于实时定量PCR的技术来统计微小RNA变化，具有分析样本需要量小、自动化程度高、避免污染等优点。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实验例提供的miR-155-5p荧光定量实验图；图2为本专利技术实验例提供的miR-216a-5p荧光定量实验图；图3为本专利技术实验例提供的miR-217F-5p荧光定量实验图；图4为本专利技术实验提供的miR-155-5p的ROC曲线图；图5为本专利技术实验例提供的miR-216a-5p的ROC曲线图；图6为本专利技术实验例提供的miR-217F-5p的ROC曲线图；图7为本专利技术实验例提供的miR-155-5p与miR-216a-5p相关性结果图；图8为本专利技术实验例提供的miR-155-5p与miR-217F-5p相关性结果图；图9为本专利技术实验例提供的miR-216a-5p与miR-217F-5p相关性结果图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的miRNA在制备检测心脏病试剂、试剂盒中的应用及检测试剂、检测试剂盒进行具体说明。如下(a)-(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：(a)miR-155-5p；(b)miR-216a-5p；(c)miR-217F-5p。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，miR-155-5p的碱基序列如SEQIDNO.1所示，miR-216a-5p的碱基序列如SEQIDNO.2所示，miR-217F-5p的碱基序列如SEQIDNO.3所示。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，产品为检测心脏病的检测试剂或检测试剂盒。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，心脏疾病为心力衰竭。一种用于诊断心脏疾病的试剂，试剂包括如下(A)-(C)任意一种或多种物质：(A)用于检测miR-155-5p的第一引物序列；(B)用于检测miR-216a-5p的第二引物序列；(C)用于检测miR-217F-5p的第三引物序列。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，用于检测miR-155-5p的第一引物序列的碱基序列如SEQIDNo.4所示；用于检测miR-216a-5p的第二引物序列的碱基序列如SEQIDNo.5所示；用于检测miR-217F-5p的第三引物序列的碱基序列如SEQIDNo.6所示。一种用于诊断心脏疾病的试剂盒，试剂盒包括上述的用于诊断心脏疾病的试剂进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，心脏疾病为心力衰竭，还包括核酸提取试剂和核酸检测试剂。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，核酸提取试剂包括Trizol试剂。进一步地，在本专利技术较佳的实施例中，核酸检测试剂为PCR反应缓冲液、TaqDNA聚合酶、dNTPs中的至少一种以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供如下(a)-(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：(a)miR-155-5p；(b)miR-216a-5p；(c)miR-217F-5p。miR-155-5p的碱基序列如SEQIDNO.1所示，miR-216a-5p的碱基序列如SEQIDNO.2所示，miR-217F-5p的碱基序列如SEQIDNO.3所示。miR-155-5p的核苷酸序列为：uuaaugcuaaucgugauaggggu(SEQIDNo.1)，miR-216a-5p的核苷酸序列为uaaucucagcuggcaacuguga(SEQIDNo.2)，miR-217F-5p的核苷酸序列为uacugcaucaggaacugauugga(SEQIDNo.3)。可以将miR-155-5p、miR-216a-5p和miR-217F-5p应用到心脏疾病尤其是心力衰竭；可以将miR-155-5p、miR-216a-5p和miR-217F-5p应用到检测心脏疾病的试剂或试剂盒中。实施例2本实施例提供一种用于诊断心脏疾病的试剂。诊断心脏疾病的试剂包括miR-155-5p，miR-155-5p的碱基序列如SEQIDNO.1所示。以及检测miR-155-5p本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如下(a)‑(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：

【技术特征摘要】
1.如下(a)-(c)任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用：(a)miR-155-5p；(b)miR-216a-5p；(c)miR-217F-5p。2.根据权利要求1所述的任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用，其特征在于，所述miR-155-5p的碱基序列如SEQIDNO.1所示，所述miR-216a-5p的碱基序列如SEQIDNO.2所示，所述miR-217F-5p的碱基序列如SEQIDNO.3所示。3.根据权利要求2所述的任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用，其特征在于，所述产品为检测心脏病的检测试剂或检测试剂盒。4.根据权利要求3所述的任意一种或多种物质在制备用于诊断心脏疾病的产品中的应用，其特征在于，所述心脏疾病为心力衰竭。5.一种用于诊断心脏疾病的试剂，其特征在于，所述试剂包括如下(A)-(C)任意一种或多种物质：(A)用于检测miR-155-5p的第一引物序列；(B)用于检测miR-216...

【专利技术属性】
技术研发人员：李培峰，丁晗，张蕾，王玉，张媛，薛升，亓洪昭，
申请(专利权)人：青岛大学，
类型：发明
国别省市：山东,37