与NK/T细胞淋巴瘤的过度炎症反应相关的突变位点及应用制造技术

本发明专利技术公开了与NK/T细胞淋巴瘤的过度炎症反应相关的突变位点及应用，属于医学检测领域。申请人首次发现NF‑κB信号通路中进化保守的接头蛋白ECSIT基因在约20％的NK/TCL患者中都存在V140A的突变，并进一步利用收集丰富的NK/TCL临床样品和病例资料做进一步验证，揭示了ECSIT基因V140A突变激活NF‑κB信号通路诱导炎症反应的作用和机制，并检测靶向ECSIT对NK/TCL的潜在疗效，大规模临床样本分析表明ECSIT突变与肿瘤生存及预后的相关性。本发明专利技术研究成果为NK/T细胞淋巴瘤辅助诊断或肿瘤治疗/预后评估提供理论基础，为改善NK/TCL的治疗效果提供新的突破口。 1

【技术实现步骤摘要】
与NK/T细胞淋巴瘤的过度炎症反应相关的突变位点及应用
本专利技术属于医学检测领域，具体涉及与NK/T细胞淋巴瘤的过度炎症反应相关的突变位点及应用。
技术介绍
NK/T细胞淋巴瘤(NK/Tcelllymphoma,NK/TCL)属结外非霍奇金淋巴瘤，是一种具有独特生物学特性的淋巴瘤亚型，好发于鼻咽，我国较西方国家多见，发病率可占非霍奇金淋巴瘤的5-10％。NK/T细胞淋巴瘤虽然好发于鼻腔，但是与鼻咽癌有较大区别。目前鼻咽癌的治疗已取得比较明显进展，经治疗后患者5年生存率超过50％。而NK/TCL疾病进展快，具高度侵袭性，预后不良。经放疗或放化疗结合治疗，早期NK/TCL患者5年生存率为30％-70％，晚期NK/TCL患者的5年生存率仅为7％-31％。目前医学界并未研究清楚NK/TCL发病机制，所以对于NK/TCL患者的治疗还是采用传统的放、化疗，对于II期以上的NK/TCL患者来说传统放化疗根本难以改善患者生存。而NK/TCL肿瘤在早期时就能及时得到发现的情况是比较少见的，多数是在中晚期发现，最终导致了NK/TCL患者的预后不良。所以研究NK/TCL发病机制对于NK/TCL的早期筛查，以及NK/TCL发病过程中的治疗和预后的评估等都具有重大意义。炎症(Inflammation)是机体组织对内外环境的有害刺激所产生的一种复杂的生理和病理反应。它既是一种保护性防御反应，亦是引起人体多种重要疾病的共同通路。1863年，RudolfVirchow观察到肿瘤组织中存在炎症细胞，并首次提出了炎症和肿瘤存在关联的假设。目前，炎症与肿瘤之间因果联系的临床证据主要来自于流行病学研究。流行病学(epidemiology)是研究特定人群中疾病、健康状况的分布及其决定因素，并研究防治疾病及促进健康的策略和措施的科学。流行病学是预防医学的一个重要组成部分，是预防医学的基础。流行病学研究证实，炎症患者更易继发各种肿瘤，约15％-20％的肿瘤患者中都存在潜在的炎症。也即，流行病学仅发现了炎症与肿瘤的相关性，而炎症的致瘤机制仍不清楚，一般认为炎症反应中巨噬细胞(macrophages)、T细胞、树突状细胞(dendriticcells)等分泌的大量炎性介质激活NF-κB信号通路，NF-κB家族广泛调控一系列基因的表达，促进癌症的发生发展。NF-κB是一类能与免疫球蛋白κ轻链基因的增强子κB序列特异结合的蛋白因子。NF-κB家族由P50、P52、RelA、c-Rel和RelB五个成员组成，通过同源或异源二聚体的形式形成不同的转录因子。NF-κB家族的调控包括：如通过转录cyclinD1、c-MYC等促进肿瘤细胞增殖，转录MMP-9、VCAM-1等促进肿瘤转移，转录VEGF等促进肿瘤中血管生成。同时，转录IL-6、TNF-α等炎症因子进一步促进了炎症反应的发生。虽然流行病学发现了炎症与肿瘤的相关性，但是由于炎症反应的细胞信号通路非常复杂，而且肿瘤根据发生的位置不同，其特点和发病机理也是千差万别的。所以在没有经过系统研究的情况下，很难说随意靶向一些炎症反应的信号通路的节点就可以获得治疗的效果，因为也可能会获得危害巨大的反作用。NK/TCL的发生发展与炎症相关，多数NK/TCL患者在发病前有多年“慢性鼻炎”病史，在就诊时有明显的发热、溃疡糜烂、坏死等炎症表现。该病好发于面部中线如鼻腔、鼻咽和口咽等部位，且以面部中线部位的进行性损坏性破坏为特征，因此也称为“中线致死性肉芽肿”；后期常浸润至周围组织造成严重坏死。其他淋巴结外病变部位如皮肤可表现为结节、溃疡和黏膜红斑等；胃肠道受累可引起腹痛、肠梗阻或穿孔等。此外，NK/TCL无论是在病程初期还是晚期均容易出现噬血细胞综合症，表现为发热、肝脾肿大、血乳酸脱氢酶升高等。NK/TCL病灶局部的炎症细胞浸润更为明显，可见大量炎症细胞(包括巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞、粒细胞)，而肿瘤细胞较少。免疫组化检测炎症因子如IL-1，TNF-α，IL-6等呈阳性。因此，NK/TCL是具有明显炎症背景的恶性肿瘤，而目前NK/TCL中关于炎症促进肿瘤发生发展的机制研究还很少。Nagato等检测SNK-6及SNT-8两株NK/TCL细胞系，发现IL-9,IL-10,IP-10等因子高表达。Ho等检测了3例NK/TCL病例的组织，发现IL-6,TNF-α,IL-10,IL-1Rα等升高。上述研究仅仅是说明NK/TCL的发生伴随着大量的炎性因子的释放，但由于出现异常的炎性因子很多，这些研究并未指明哪一类因子在NK/TCL中起主要作用，无法对这些因子一一进行靶向。目前，系统性研究NK/TCL患者中炎症状态的调控机制，包括分子机制，尤其是其中细胞遗传学基础，及炎症状态的调控机制在NK/TCL发生发展中的具体作用还未见报道。此外，NK/T细胞淋巴瘤是相对小众的恶性肿瘤，在国际上的一些肿瘤信息平台，如Tumorscape中并没有相关的标本数据，所以在研究时会存在一定的难度，需要研究者自行获取相关足够数量的标本做研究，此外还需要在大量标本中进行验证，非本行业技术人员可以随意得到的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供与NK/T细胞淋巴瘤的过度炎症反应相关的突变位点、应用及相关试剂盒。本专利技术所采取的技术方案是：一种与肿瘤相关的突变位点，所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。ECSIT(EvolutionarilyconservedsignalingintermediateinTollpathway)基因为Toll信号通路上重要的调节基因，NCBI登记号(GeneID)为51295。ECSIT基因编码的蛋白(NP_057665.2)全长为431个氨基酸。V140A描述的是在该蛋白第140位的氨基酸由缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala)，V140A的写法为本行业的公知常识。优选的，ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG，导致遗传密码子对应的缬氨酸突变为丙氨酸。也即，人类基因组19号染色体第11624714位碱基由T突变为C，或者互补位置的碱基A突变为G，使这一位置的遗传密码子由GTC突变为GCC，或互补位置的CAG突变为CGG，导致该基因编码蛋白的第140位的氨基酸由缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala)。优选的，所述肿瘤为NK/T细胞淋巴瘤。一种与NK/T细胞淋巴瘤相关的突变位点，所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。优选的，ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG，导致遗传密码子对应的缬氨酸突变为丙氨酸。一种引起NK/T细胞淋巴瘤炎性反应的突变位点，所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。优选的，ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG，导致遗传密码子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与肿瘤相关的突变位点，其特征在于：所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的

【技术特征摘要】
1.一种与肿瘤相关的突变位点，其特征在于：所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。2.根据权利要求1所述的突变位点，其特征在于：ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG。3.根据权利要求1-2任一项所述的突变位点，其特征在于：所述肿瘤为NK/T细胞淋巴瘤。4.一种与NK/T细胞淋巴瘤相关的突变位点，其特征在于：所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。5.根据权利要求4所述的突变位点，其特征在于：ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG。6.一种引起NK/T细胞淋巴瘤炎性反应的突变位点，其特征在于：所述突变位点为ECSIT氨基酸序列的V140A。7.根据权利要求6所述的突变位点，其特征在于：ECSIT氨基酸序列的V140A所对应的ECSIT基因的突变情况包括：编码ECSIT氨基酸序列第140位氨基酸的遗传密码子对应的DNA由GTC突变为GCC，或DNA互补位置的CAG突变为CGG。8.用于检测权利要求1～7任...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘强，文海军，马华娟，雷鑫星，何斌，王自峰，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心，
类型：发明
国别省市：广东,44