Etonogestrel在制备抗B细胞淋巴瘤产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了Etonogestrel在制备抗B细胞淋巴瘤产品中的应用。本发明专利技术提供了Etonogestrel在制备治疗B细胞淋巴瘤产品中的应用。本发明专利技术的实验证明，本发明专利技术对FDA,CFDA已获批准的药物Etonogestrel进行肿瘤药物重定位，根据肿瘤不同的细胞系(组织类型)以及突变位点对适应症不是抗肿瘤的药物进行筛选，发现Etonogestrel抗B细胞淋巴瘤这种新用途，实现旧药新用。

【技术实现步骤摘要】
Etonogestrel在制备抗B细胞淋巴瘤产品中的应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种Etonogestrel在制备抗B细胞淋巴瘤产品中的应用。
技术介绍
肿瘤是威胁人类健康的最常见也是最严重的一种疾病，研发高效抗肿瘤药物对延长患者的生存周期至关重要。近年来，随着肿瘤基因组学学和分子药理学的飞速发展，新型抗肿瘤药物的研发取得了不错的成果，但由于新药研发投入大，周期长等瓶颈无法克服，以及肿瘤个体遗传变异大等特征，导致许多传统抗肿瘤药物效果不加，新药价格昂贵，副作用未明。Etonogestrel是一种主要用于避孕的皮下植入剂，属于甾体孕激素。该药物的避孕机制主要通过对垂体-性腺轴的排卵抑制作用来实现，同时还可以增加子宫颈粘液的粘稠程度，防止精子的进入。目前也有人在背侧海马注射Etonogestrel来对痴呆大鼠学习记忆影响机制进行药物重定位研究。
技术实现思路
本研究正是通过整合癌症组学Cosmicversion72数据库的癌症基因谱CancerGeneCensus以及蛋白质相互作用STRINGversion10数据库和DrugBankversion4.2中FDA批准的药物数据库，获得的候选重定位药物，对肿瘤细胞系进行筛查实验，筛选出新的抗肿瘤药物。做肿瘤细胞系筛选的候选肿瘤抑制药物见如下:Nicardipine,Promethazine,Estrone,Etonogestrel,Sulindac,Etonogestrel,Etonogestrel,Levonorgestrel,Mesalazine,Indomethacin,Sulfasalazine,Balsalazide,Irbesartan,Ibuprofen,Isoprenaline,PentosanPolysulfate。本专利技术的一个目的是提供Etonogestrel的新用途。本专利技术提供的Etonogestrel在制备治疗B细胞淋巴瘤产品中的应用。本专利技术的第二个目的是提供Etonogestrel的新用途。本专利技术提供了Etonogestrel在制备抑制B细胞淋巴瘤细胞增殖产品中的应用。本专利技术的第三个目的是提供Etonogestrel的新用途。本专利技术提供了Etonogestrel在制备降低B细胞淋巴瘤细胞IC50值产品中的应用。上述应用中，所述B细胞淋巴瘤细胞为BC-3。上述应用中，所述产品为药物或试剂盒。本专利技术的第四个目的是提供一种产品。本专利技术提供的产品，其活性成分为Etonogestrel；所述产品具有如下1)-3)中至少一种功能：1)治疗B细胞淋巴瘤；2)抑制B细胞淋巴瘤细胞增殖；3)降低B细胞淋巴瘤细胞IC50值。上述产品中，所述B细胞淋巴瘤细胞为BC-3。上述产品中，所述产品为药物或试剂盒。本专利技术的实验证明，本专利技术对FDA,CFDA已获批准的药物Etonogestrel进行肿瘤药物重定位，根据肿瘤不同的细胞系(组织类型)以及突变位点对适应症不是抗肿瘤的药物进行筛选，发现Etonogestrel抗B细胞淋巴瘤这种新用途，实现旧药新用。附图说明图1为96孔培养板药筛药物板型分布。图2为Etonogestrel对B细胞淋巴瘤敏感；EC50＝9.3750；IC50＝6.5544；R2＝0.9991。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中待测药物为Etonogestrel，其化学结构式为：其为drugbank产品，产品目录号为DB00294。下面实施例中的B细胞淋巴瘤细胞BC-3、人肺鳞癌细胞NCI-H1703和人肺癌细胞NCI-H2122的出处如下：BC-3ATCCCRL-2277NCI-H1703ATCCCRL-5889NCI-H2122ATCCCRL-5985下面实施例中的主要的仪器及耗材DMSO(fromSigma,Cat.No.D4540)96-well白色底透细胞培养板(fromCorning,Cat.No.3610)CellTiterGlo试剂盒(fromPromega,Cat.No.G7573)Doxorubicin阳性药(fromMCE,Cat.No.HY-15142)FetalBovineSerum(fromGibco,Cat#10099141)100mm培养皿(fromCorning,Cat#430167)RPMI-1640medium(fromGibco,Cat#A1049101)DMEMmedium(fromGibco,Cat#11995081)DMEM/F12medium(fromGibco,Cat#11330057)EMEMmedium(fromGibco,Cat#10370021)Mutidrop384细胞分液器(Thermo,Cat#5840150)EnSpire多功能读板机(PerkinElmer,Cat#2300-001M)实施例1、CELLTITER-GLO检测Etonogestrel抗B细胞淋巴瘤一、待测孔板的制备1、细胞铺板a)配制各个细胞所需完全培养基。b)实验开始前，确认标记在100mm培养皿上的药筛细胞名字，培养基以及传代时间，代次等信息，确保实验无误。c)贴壁细胞操作参考步骤d)到i),悬浮细胞操作参考步骤j)到l)。d)无菌操作时利用真空泵吸取细胞培养基。e)用2ml的无菌PBS溶液润洗细胞表层，再用真空泵吸出PBS废液。f)向培养皿轻轻加入1ml0.25％(w/v)Trypsin-0.038％(w/v)EDTA溶液消化细胞，轻轻混匀几下，溶液覆盖住细胞表层，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，在细胞将要脱落时终止胰酶消化作用。g)向培养皿中加入5ml37℃预热好的完全培养基，用移液管轻轻吹打细胞，使其从培养皿底部脱落下来。h)将此细胞悬液转移到15ml或50ml无菌离心管中，1000rpm离心5min。i)利用真空泵无菌操作吸出上清培养基。加入5ml37℃预热好的完全培养基重悬细胞沉淀，轻轻吹打混匀。j)用移液管轻轻吹打细胞，使其从培养皿底部完全脱落下来。k)将此细胞悬液转移到15ml或50ml无菌离心管中，1000rpm离心5min。l)利用真空泵无菌操作吸出上清培养基。加入5ml37℃预热好的完全培养基重悬细胞沉淀，轻轻吹打混匀。m)用细胞计数仪对细胞悬液进行计数，调整细胞悬液至合适密度接板进行细胞铺板实验。将BC-3细胞按照上述方法进行，得到BC-396孔细胞培养板。BC-3细胞，完全培养基为RPMI-1640，为life产品，A1049101，接板密度(cells/well)为4000。2、待测药物Etonogestrel配制和加药(200X终浓度):1)待测药物Etonogestrel母板配制a)用DMSO将待测药物Etonogestrel稀释到20mM待用。取a)步骤中配置好的20mM待测药物79μL加入稀释板第一行第一孔中，随后加入54μL的DMSO溶剂到第一行第二孔至第九孔中，从第一孔中取25μL溶液到第二孔中，混匀后从第二孔中取25μL溶液到第三孔中，依次类推到第九孔，保证药物逐次进行3.16倍倍比梯度稀释。2)阳性药Doxorubicin(MCE,Cat本文档来自技高网...

【技术保护点】
Etonogestrel在制备治疗B细胞淋巴瘤产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.Etonogestrel在制备治疗B细胞淋巴瘤产品中的应用。2.Etonogestrel在制备抑制B细胞淋巴瘤细胞增殖产品中的应用。3.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：师咏勇，宋智健，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31