一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法技术

本发明专利技术属于图像处理技术领域，公开了一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法，所述方法依据建立的气相色谱指纹图谱库为样本；根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析方法分析特征峰数据；对金线莲的质量有效判别和区分。本发明专利技术可快速建立检测金线莲的气相色谱指纹图谱数据库，根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析特征峰数据，可以实现对金线莲的质量有效判别和区分；本发明专利技术得出的主成分分析方法与国标方法判别出的质量情况一致；本发明专利技术可以依据所建立的气相色谱指纹图谱库为样本，采用主成分分析的方法判别待测金线莲的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法
本专利技术属于图像处理
，尤其涉及一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法。
技术介绍
金线莲植物(Anoectohilusformosanus)可发现于台湾及琉球。金线莲醣苷已被证实具有保肝、抗脂质过多、抗发炎等能力，是金线莲植物及其衍生保健产品中重要的活性成分。金线莲醣苷(kinsenoside)本身缺乏发色基团，因此UV检测器对此化合物的检测灵敏度很差。过去文献报导使用HPLC-RI作为定量分析方法，但RI检测器本身即存在对温度敏感、基线不稳定、灵敏度不佳等问题。因此极需一种快速分离及定量分析金线莲植物及其衍生保健产品中的金线莲醣苷成分的方法。就挥发性成分研究而言，以往的学者们所采用的提取分离方法主要有：常压水蒸气蒸馏萃取法(SDE法)、减压蒸馏萃取法(VDE)、顶空吸附法(HAS法)、超临界二氧化碳萃取法(SFE)等。而在运用不同提取方式和不同溶剂提取的气相指纹图谱研究方面的报道相对较少。综上所述，现有技术存在的问题是：现有指纹图谱分析方法不方便、不安全、破坏了样品，且需衍生化、添加化学位移试剂进行分离及析金线莲植物活性成分金线莲醣苷(kinsenoside)及金线莲植物中其它四个主要化合物。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法。利用本专利技术，可快速建立多样本不同质量煎炸油气相指纹图谱数据库，采用主成分分析可对数据库中的煎炸老油和煎炸废油进行有效区别，并可以采用判别分析进一步判断待测样本是否应该废弃。本专利技术是这样实现的，一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法，所述依据建立的气相色谱指纹图谱库为样本；根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析方法分析特征峰数据；对煎炸油不同煎炸深度下的食用油的质量有效判别和区分。进一步，所述的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，具体包括：进行气相色谱-样品甲酯化及GC分析；进行相似度分析：GC仪器分析结束后，以AIA格式导出结果，然后导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统中，相似度软件依照各个样品峰的峰形和保留时间，自动匹配、筛选出样品中的共有峰，得到指纹图谱数据，将共有峰总量和为100％，计算出各个共有峰的比例；进行主成分分析：将多个无关变量映射为少数几个变量，用这几个少数、综合的变量去解释原来多变量的方差-协方差结构，把给定的一组相关变量通过线性变换转成另一组不相关的变量，这些新的变量按照方差依次递减的顺序排列；获得综合得分模型；具体包括：根据最小二乘法找到一条直线，使得所有样品到达该直线的残差和最小，得到第一主成分，然后在第一主成分垂直方向上找到差异最明显的直线，为第二主成分；依次类推，最后获得综合得分模型。进一步，进行气相色谱-样品甲酯化及GC分析，具体包括：精密量取样品0.1mL试样至具塞试管中，用移液管加入10mL正己烷溶解试样，再加入10mL0.4mol/L氢氧化钠甲醇溶液，静置30min，加入10mL水，振摇4分钟，静置分层，取上清液过滤膜，用于气相色谱分析；GC分析的方法，包括：色谱柱：DB-WAX毛细管柱；载气为99.99％高纯氮气；压力为1.40MPa；柱温：200℃；以恒定流速：1.0mL/min；分流比100：1；进样口温度：250℃；FID检测器温度：260℃；进样量：1.0μL；升温程序：起始温度设为100℃，再次温度下保持5min，然后以4℃/min速度升温至240℃，保持30min。进一步，主成分分析中，综合得分模型的获得方法包括：用主成分载荷矩阵中的数据除以主成分相对应的特征值开平方根便得到两个主成分中每个指标所对应的系数；将得到的特征向量与标准化后的数据相乘,然后得出主成分表达式；F1＝0.520918676*x1+-0.438057246*x2+0.513529759*x3+-0.520918676*x4+0.045916844*x5；F2＝-0.123754297*x1+-0.379513178*x2+-0.189756589*x3+0.087086357*x4+0.893781035*x5；以每个主成分所对应的特征值占所提取主成分总的特征值之和的比例作为权重计算主成分综合模型,用第一主成分F1中每个指标所对应的系数乘上第一主成分F1所对应的贡献率再除以所提取两个主成分的两个贡献率之和,然后加上第二主成分F2中每个指标所对应的系数乘上第二主成分F2所对应的贡献率再除以所提取两个主成分的两个贡献率之和,得到综合得分模型；F(total)＝0.360424777*x1+-0.423482467*x2+0.338443827*x3+-0.369553407*x4+0.256996004*x5。本专利技术的另一目的在于提供一种金线莲HPLC指纹图谱分析系统。本专利技术的优点及积极效果为：本专利技术的气相色谱及气质联用检测技术作为一种综合的、可量化的鉴定手段，主要用于评价物质质量的真实性、优良性和稳定性的一种现代分析方法。用气相色谱指纹图谱来鉴别某种物质中所共有的、具有特征性的成分，就能够得到反应物质本身固有的真实情况的相应图谱。利用所得到的气相色谱指纹图谱的主要特征性，就能够有效鉴别样品的真伪或产地，同时通过气相色谱指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效检测样品所含的被检测组分的含量，反映金线莲的整体化学组成成分特征。本专利技术可快速建立检测油品的气相色谱指纹图谱数据库，根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析特征峰数据，可以实现对金线莲的质量有效判别和区分。本专利技术得出的主成分分析方法与国标方法判别出的不同煎炸深度下的金线莲质量情况一致。本专利技术可以依据所建立的气相色谱指纹图谱库为样本，采用主成分方法判别待测金线莲的质量。本专利技术具有快捷简便，样品用量少，检测成本较低，重复性好，灵敏准确的特点。附图说明图1是本专利技术实施例提供的金线莲HPLC指纹图谱分析方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的用来判别煎炸油质量的好坏的综合得分图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。如图1所示，本专利技术实施例提供的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，包括：S101：依据建立的气相色谱指纹图谱库为样本；S102：根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析方法分析特征峰数据；对金线莲不同煎炸深度下进行质量有效判别和区分。下面结合具体实施例对本专利技术的应用原理作进一步描述。本专利技术实施例提供的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，具体包括：1、气相色谱-样品甲酯化及GC分析方法(甲酯化方法而非国标中的方法，突出有简便易操作)；精密量取样品0.1mL试样至具塞试管中，用移液管加入10mL正己烷溶解试样，再加入10mL0.4mol/L氢氧化钠甲醇溶液，静置30min，加入10mL水，振摇4分钟，静置分层，取上清液过滤膜，用做气相色谱分析。GC分析方法：色谱柱：DB-WAX毛细管柱(3m×0.320mm×0.25μm)；载气为高纯氮气(99.99％)，压力为1.40MPa。柱温：200℃，以恒定流速：1.0mL/min，分流比100：1；进样口温度：250℃；使用FID检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法，其特征在于，所述金线莲HPLC指纹图谱分析方法依据建立的气相色谱指纹图谱库为样本；根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析方法分析特征峰数据；对煎炸油不同煎炸深度下的食用油的质量有效判别和区分。

【技术特征摘要】
1.一种金线莲HPLC指纹图谱分析方法，其特征在于，所述金线莲HPLC指纹图谱分析方法依据建立的气相色谱指纹图谱库为样本；根据相似度软件提取共有特征峰，利用主成分分析方法分析特征峰数据；对煎炸油不同煎炸深度下的食用油的质量有效判别和区分。2.如权利要求1所述的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，其特征在于，所述的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，具体包括：进行气相色谱-样品甲酯化及GC分析；进行相似度分析：GC仪器分析结束后，以AIA格式导出结果，然后导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统中，相似度软件依照各个样品峰的峰形和保留时间，自动匹配、筛选出样品中的共有峰，得到指纹图谱数据，将共有峰总量和为100％，计算出各个共有峰的比例；进行主成分分析：将多个无关变量映射为少数几个变量，用这几个少数、综合的变量去解释原来多变量的方差-协方差结构，把给定的一组相关变量通过线性变换转成另一组不相关的变量，这些新的变量按照方差依次递减的顺序排列；获得综合得分模型；具体包括：根据最小二乘法找到一条直线，使得所有样品到达该直线的残差和最小，得到第一主成分，然后在第一主成分垂直方向上找到差异最明显的直线，为第二主成分；依次类推，最后获得综合得分模型。3.如权利要求2所述的金线莲HPLC指纹图谱分析方法，其特征在于，进行气相色谱-样品甲酯化及GC分析，具体包括：精密量取样品0.1mL试样至具塞试管中，用移液管加入10mL正己烷溶解试样，再加入10mL0.4mol/L氢氧化钠甲醇溶液，静置30min，加入10mL水，振摇4分钟，静置分层，取上清液过滤膜，用于气相色谱分析；GC分析的方法，包括：色谱柱：DB-WAX毛细管柱；载气为99.99％高纯氮气；压...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈吓俤，邹智岳，游美玲，陈锦秀，洪伟祥，
申请(专利权)人：武夷学院，
类型：发明
国别省市：福建,35