一种芽孢杆菌复合菌液及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种芽孢杆菌复合菌液，包括以下组分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌以及双歧杆菌。其中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC 14580，所述双歧杆菌的保藏编号为ATCC 15707；所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为10

A compound Bacillus liquid of Bacillus and its preparation method

The invention provides a Bacillus compound bacterial liquid, comprising the following components: Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis and Bifidobacterium. The preservation of Bacillus subtilis was numbered CGMCC1.3358, and the preservation of Bacillus licheniformis was numbered ATCC 14580, and the preservation of the Bacillus Bifidobacterium was numbered as ATCC 15707, and the number of Bacillus subtilis, Bacillus lichenibacillus and Bifidobacterium was 10.

【技术实现步骤摘要】
一种芽孢杆菌复合菌液及其制备方法
本专利技术属于生物制剂领域，具体涉及一种芽孢杆菌复合菌液及其制备方法。
技术介绍
枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，为细菌的一科，能形成芽孢(内生孢子)的杆菌或球菌对外界有害因子抵抗力强，分布广，存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处。可调整菌群失调达到治疗目的，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。双歧杆菌属的细菌是人和动物肠道菌群的重要组成成员之一，是一种重要的肠道有益微生物，可抑制有害病菌，起到生物防治作用。在土壤中的腐殖质是有机物经微生物分解转化形成的胶体物质，一般为黑色或暗棕色，是土壤有机质的主要组成部分。当前，由于不合理的使用化学肥料、过度垦殖、单一的耕作制度引起的土壤退化问题已严重威胁到农业的可持续性发展，其中，土壤中的腐殖质减少是重要原因。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种芽孢杆菌复合菌液，包括以下组分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌以及双歧杆菌。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液中，所述枯草芽孢杆菌为本领域中常用的枯草芽孢杆菌，优选地，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液中，所述地衣芽孢杆菌为本领域中常用的地衣芽孢杆菌，优选地，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液中，所述双歧杆菌为本领域中常用的双歧杆菌，优选地，所述双歧杆菌的保藏编号为ATCC15707。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液中，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为108～109CFU/g。本专利技术的另一方面为提供一种芽孢杆菌复合菌液的制备方法，包括以下步骤：1)枯草芽孢杆菌菌种，活化后接入液体培养基，加入双歧杆菌活菌粉、密封隔绝空气培养；2)将活化地衣芽孢杆菌，接入液体培养基培养；3)合并步骤1)与步骤2)两步菌液，混合菌液浓缩离心；4)将混合浓缩离心菌液加入营养液，即得芽孢杆菌复合菌液。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358；所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为108～109CFU/g。。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述步骤1)中培养条件为35～39℃，120～130rpm培养15～20h。优选地，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述步骤2)中培养条件为35～39℃，120～130rpm培养15～20h。本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：双歧杆菌的生长对环境要求比较严格，特别是需要严格厌氧，通过需要去除氧气进行培养，并不能直接用于土壤改良剂中；本专利技术通过对培养基与培养条件的优化，先培养枯草芽孢杆菌，使得枯草芽孢杆菌在生长消耗形成厌氧条件，促进双歧杆菌生长，使得芽孢杆菌与双歧杆菌形成共生，再通过地衣芽孢杆菌培养，进一步调节了生态菌群，使得复合菌液可以促进微生物分解有机物，形成腐殖质，通过改善土壤的理化性质，打破土壤板结和压实，促进土壤有机质的分解和营养成分的释放，提高土壤控肥能力，调节土壤pH，调节微生物菌群结构，抑制有害微生物的生长，增强植物根系对营养物质的吸收能力并促进其生长，达到改良土壤效果，进而具有保护土壤、促进有机质的分解、产生丰富的代谢物和抑制有害菌等作用，从而起到对植物的生长和保护作用，促进植物对营养物质的吸收和生长。通过后续实施例证明本专利技术的复合菌液具有良好增产增重作用。具体实施方式在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述双歧杆菌的保藏编号为ATCC15707。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为108～109CFU/g。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术提供例如一种芽孢杆菌复合菌液的制备方法，包括以下步骤：1)将枯草芽孢杆菌菌种，活化后接入液体培养基，加入双歧杆菌活菌粉、密封隔绝空气培养；2)将活化地衣芽孢杆菌，接入液体培养基培养；3)合并步骤1)与步骤2)两步菌液，混合菌液浓缩离心；4)将混合浓缩离心菌液加入营养液，即得芽孢杆菌复合菌液。在本专利技术的一个实施方式中，所述营养液优选的为植物生长营养液，更优选的为市售的Aron-Hoagland营养液；本专利技术中所述的芽孢杆菌复合菌液中营养液的体积百分含量优选的为45～55％，更优选的为50％。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358；所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580，所述双歧杆菌的保藏编号为ATCC15707。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述复合菌液产品中枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为108～109CFU/g。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述步骤1)中培养条件为35～39℃，120～130rpm培养15～20h。在本专利技术的一个实施方式中，本专利技术所述的芽孢杆菌复合菌液的制备方法中，所述步骤2)中培养条件为35～39℃，120～130rpm培养15～20h。下面将结合本专利技术中的实施例，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例11)菌株说明：枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358与的地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580，双歧杆菌的保藏编号为ATCC15707；以上菌株均为商购可得。2)芽孢杆菌与双歧杆菌培养：取2环活化的枯草芽孢杆菌菌种，接入装量为100mL液体培养基的500mL三角瓶中，并加入0.1g双歧杆菌活菌粉(商购可得)，将三角瓶密封，进行厌氧培养。通过优化液体培养基和培养条件，其中基础液体培养基成份为牛肉膏3.0g(即0.3％)，蛋白胨10.0g(1％)，氯化钠5.0g(0.5％)，蒸馏水1000ml。通过优化培养培养基中的牛肉膏0.2～0.8％，最优选为0.4％；蛋白胨选用酵母浸出粉替换作为氮源0.5～1％，其最优选比例为0.9％；氯化钠0.1～0.5％，其最优选为0.3％。利用枯草芽孢杆菌生长消耗形成厌氧条件，利用双歧杆菌生长，形成共生，枯草芽孢杆菌和双歧杆菌混合培养其最佳培养条件pH7.0～7.5，最优pH为7.2；培养转速在130～160rpm，最优为150rpm；最适温度35～38℃，最优温度条件为37℃。经过培养18～24h，芽孢杆菌达到108～1010CFU/g，双歧杆菌浓度108～1010CFU/g。3)地衣芽孢杆菌培养：取2环活化的地衣芽孢杆菌菌种，接入装量为100mL液体培养基的500mL三角瓶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种芽孢杆菌复合菌液，包括以下组分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌以及双歧杆菌。

【技术特征摘要】
1.一种芽孢杆菌复合菌液，包括以下组分：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌以及双歧杆菌。2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌复合菌液，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC1.3358。3.根据权利要求1所述的芽孢杆菌复合菌液，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌的保藏编号为ATCC14580。4.根据权利要求1所述的芽孢杆菌复合菌液，其特征在于，所述双歧杆菌的保藏编号为ATCC15707。5.根据权利要求2～4所述的芽孢杆菌复合菌液，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌与双歧杆菌的活菌数各自为108～109CFU/g。6.一种芽孢杆菌复合菌液的制备方法，包括以下步骤：1)将枯草芽孢杆菌菌种，活化后接入液体培养基，加入双歧杆菌活菌粉、密封隔绝空气培养；2)将地衣芽孢杆菌，接入液体培养基培养；3)合并步骤1)与步骤2...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜宗然，林茂，吴少坤，郭立，
申请(专利权)人：厦门昶青生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35