一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基及培养方法技术

本发明专利技术涉及一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基及培养方法，其中，种子培养基包括：混合碳源2g/L、酵母浸粉2g/L、麦芽浸粉2g/L、蛋白胨5g/L；发酵培养基包括：混合碳源100g/L、混合氮源7g/L、酵母浸粉5g/L、麦芽浸粉5g/L、蛋白胨6g/L、硫酸镁1.5g/L、番茄粉10g/L、无水乙醇6mL；其中，所述混合碳源为糖蜜40％和淀粉糖60％；所述混合氮源为玉米浆40％和硫酸铵60％。通过该培养基可发酵产生3种天然类胡萝卜素：虾青素、角黄素和β‑胡萝卜素，并且三种类胡萝卜素的比例合理，适宜作为产禽蛋和对虾的饲料添加，从而获得最佳的着色效果。

【技术实现步骤摘要】
一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基及培养方法
本专利技术涉及生物发酵
，具体涉及一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的发酵培养基及培养方法。
技术介绍
类胡萝卜素是可用作饲料添加剂、食品添加剂、药品等的天然色素。类胡萝卜素包括：例如虾青素、角黄素、玉米黄素、番茄红素、β-胡萝卜素、海胆酮等。其中，研究表明，在日粮中添加β-胡萝卜素能提高蛋鸭的产蛋率、改善蛋黄色泽。角黄素也可改善鸡蛋蛋黄的色泽。因此，β-胡萝卜素和角黄素在畜牧业的应用中受到越来越多的关注。红法夫酵母最先由Phaff及其合作者在高纬度地区落叶木的渗出粘液中发现，属于杂担孢子菌，该菌具有有氧呼吸和发酵两种代谢方式，是目前常用于生产虾青素的真菌。培养基组分对红法夫酵母的生长和虾青素的合成有很大的影响。相关技术中，对红法夫酵母的培养基的研究更多是如何提高虾青素的含量，而对于优化红法夫酵母的培养基以同时生产虾青素、角黄素和β-胡萝卜素，还未见报道。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供一种红法夫酵母产类胡萝卜素的培养基及培养方法。该培养基可使红法夫酵母菌同时生产3种天然类胡萝卜素，作为产禽蛋和对虾的饲料添加，从而获得最佳的着色效果。为此，根据本专利技术的实施例，本专利技术提出了一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，其中，种子培养基包括：混合碳源2g/L、酵母浸粉2g/L、麦芽浸粉2g/L、蛋白胨5g/L；发酵培养基包括：混合碳源100g/L、混合氮源7g/L、酵母浸粉5g/L、麦芽浸粉5g/L、蛋白胨6g/L、硫酸镁1.5g/L、番茄粉10g/L、无水乙醇6mL；其中，所述混合碳源为糖蜜40％和淀粉糖60％；所述混合氮源为玉米浆40％和硫酸铵60％。根据本专利技术实施例的红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，通过该培养基可发酵产生3种天然类胡萝卜素：虾青素、角黄素和β-胡萝卜素，并且三种类胡萝卜素的比例合理，适宜作为产禽蛋和对虾的饲料添加，从而获得最佳的着色效果。另外，根据本专利技术上述实施例提出的提高禽蛋中虾青素含量的饲料红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，还可以具有如下附加的技术特征：可选地，所述发酵培养基中，混合氮源在发酵开始时加入25g/L，发酵后期流加75g/L；番茄粉在发酵开始时加5g/L，发酵后期再加5g/L；无水乙醇在发酵开始时加3mL，发酵后期加3mL。根据本专利技术的实施例，本专利技术还提出了一种利用上述的培养基产类胡萝卜素的方法，其包括以下步骤：(1)、将红法夫酵母接种于所述种子培养基进行菌种的活化，活化三代；(2)、将活化后的菌种接种于所述发酵培养基中，发酵培养，收集发酵液中的虾青素、β-胡萝卜素和角黄素。另外，根据本专利技术上述实施例提出的产类胡萝卜素的方法，还可以具有如下附加的技术特征：可选地，在步骤(1)中，将红法夫酵母接种到种子培养基中，于20～22℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得一代种子；一代种子以6％的接种量接种于新的种子培养基中，于30℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得二代种子；二代种子以6％的接种量接种于新的种子培养基中，于20～22℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得三代种子。可选地，在步骤(2)中，将活化后的菌种以10％的接种量接种于所述发酵培养基中，调节pH5.0～5.5，温度20～22℃，弱光培养，搅拌速率250～350r/min。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的技术方案。应理解，本专利技术提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
的情况下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本专利技术的示例性实施例。虽然显示了本专利技术的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面参考具体实施例，对本专利技术进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本专利技术。实施例种子培养基的制备：配制液体培养基分装于250mL(装液量为50～70mL)及1000mL(装液量为300mL)三角瓶中，调节pH5.5～6.0，于高温121℃条件下灭菌30min后备用；种子培养基配方为包含混合碳源(糖蜜40％、淀粉糖60％)2g/L、酵母浸粉2g/L、麦芽浸粉2g/L、蛋白胨5g/L。红法夫酵母的种子培养：将红法夫酵母菌种(来源于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCCM2019083)从生物安全柜中接种到种子培养基中(250mL三角瓶)，于20～22℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得一代种子；然后将一代种子继续接种到种子培养基(250mL三角瓶)，接种量6％，于30℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得二代种子；将二代种子接种到种子培养基(1000mL三角瓶)，接种量6％，于20～22℃、转速为150r/min条件下摇床培养40h，得三代种子。发酵培养：将上述培养好的三代种子接种到5L的发酵罐中，接种量10％，装液量3L，pH5.0～5.5，温度20～22℃，弱光培养24h，搅拌速率250～350r/min，收集发酵液。其中，发酵培养基为：混合碳源(糖蜜40％、淀粉糖60％)100g/L(其中发酵开始加25g/L，发酵18h开始流加75g/L)、混合氮源(玉米浆40％和硫酸铵60％)7g/L、酵母浸粉5g/L、麦芽浸粉5g/L、蛋白胨6g/L、硫酸镁1.5g/L、番茄粉10g/L(发酵开始加5g/L，发酵18h加5g/L)、无水乙醇6mL(发酵开始为3mL，发酵18h加3mL)。取5ml发酵液经RCF：3000r/min离心10min后，用去离子水洗两遍，在离心后的酵母中，加入55℃、2ml二甲基亚砜，震荡，搅散后加入2ml丙酮提取试剂搅匀等菌体变白后离心(3000r/min)5min得提取液。收集上清液，采取液相色谱进行检测。得三种类胡萝卜素结果为虾青素906ug/g，角黄素302ug/g，β-胡萝卜素302ug/g。试验例选取体质健康、体重和体尺相近、产蛋率相似的28～31周龄芦花鸡随机分成3组(对照组、试验1、试验2)，每组5个重复，每个重复30只鸡。对照组饲喂基础日粮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，其特征在于，种子培养基包括：混合碳源2g/L、酵母浸粉2g/L、麦芽浸粉2g/L、蛋白胨5g/L；发酵培养基包括：混合碳源100g/L、混合氮源7g/L、酵母浸粉5g/L、麦芽浸粉5g/L、蛋白胨6g/L、硫酸镁1.5g/L、番茄粉10g/L、无水乙醇6mL；其中，所述混合碳源为糖蜜40％和淀粉糖60％；所述混合氮源为玉米浆40％和硫酸铵60％。/n

【技术特征摘要】
1.一种红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，其特征在于，种子培养基包括：混合碳源2g/L、酵母浸粉2g/L、麦芽浸粉2g/L、蛋白胨5g/L；发酵培养基包括：混合碳源100g/L、混合氮源7g/L、酵母浸粉5g/L、麦芽浸粉5g/L、蛋白胨6g/L、硫酸镁1.5g/L、番茄粉10g/L、无水乙醇6mL；其中，所述混合碳源为糖蜜40％和淀粉糖60％；所述混合氮源为玉米浆40％和硫酸铵60％。


2.如权利要求1所述的红法夫酵母发酵产类胡萝卜素的培养基，其特征在于，所述发酵培养基中，混合氮源在发酵开始时加入25g/L，发酵后期流加75g/L；番茄粉在发酵开始时加5g/L，发酵后期再加5g/L；无水乙醇在发酵开始时加0.1％，发酵后期加0.1％。


3.一种利用如权利要求1或2所述的培养基产类胡萝卜素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、将...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜宗然，
申请(专利权)人：厦门昶青生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35