一种寡糖肽及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种寡糖肽及其制备方法。具体地，本发明专利技术涉及菊糖精氨酸赖氨酸肽及其制备方法。本发明专利技术的寡糖肽具备良好的稳定性、工艺简单易于操作，可更好地用于临床治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种寡糖肽及其制备方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种菊糖精氨酸赖氨酸肽及其制备方法。本专利技术的寡糖肽具备良好的稳定性、工艺简单易于操作，可更好地用于临床治疗。
技术介绍
精氨酸是鸟氨酸循环中的一个组成成分，具有极其重要的生理功能。补充精氨酸，可以增加肝脏中精氨酸(arginase)的活性，有助于将血液中的氨转变为尿素而排泄出去，所以，精氨酸对高氨血症，肝脏机能障碍等均有功效。精氨酸也是精子蛋白的主要成分，有促进精子的质量，提高精子运动能量的作用。精氨酸是一种双基氨基酸，对成人来说虽然不是必需氨基酸，但在有些情况如机体发育不成熟或严重应激等条件下，如果缺乏精氨酸，机体便不能维持正氮平衡与正常的生理功能；病人若缺乏精氨酸，会导致血氨过高，出现甚至昏迷；婴儿若出现先天性缺乏尿素循环的某些酶，精氨酸对其也是必须的，否则将不能维持正常的生长与发育。所以精氨酸的药理作用非常多，比如在利用氨合成尿素而降低血氨，改善症状；促进细胞分裂；加快伤口复原；促进氨的排出和增强免疫功能等方面具有不可替代的作用。赖氨酸是人体必需的氨基酸，是不可缺少的营养物质。蛋白质是构成人体细胞的主要成份，食物中的蛋白质进入人体后经过消化先分解成氨基酸，然后人体又利用赖氨酸赖等人体必须的氨基酸重新合成新的人体蛋白质，如免疫抗体、消化酶、血浆蛋白、生长激素等。赖氨酸在合成蛋白质的各种氨基酸中是最重要的一种，缺少它，其它氨基酸就受到限制或得不到利用，所以又称为人体第一必需氨基酸。科学家还发现，赖氨酸是控制人体生长的重要物质生长素的必需成份，对人的中枢神经和周围神经系统都起着重要作用。人体不能自身合成赖氨酸，必须从食物中吸取赖氨酸是帮助其它营养物质被人体充分吸收和利用的关键物质，人体只有补充了足够的赖氨酸才能提高食物蛋白质的吸收和利用，达到均衡营养，促进生长发育。多糖结合蛋白在人体起作用的机理主要有以下行为：(1)由体液因素引起的免疫抑制，如转变生长因子(TGF)-b或作为外科和化疗的结果；(2)激活抗肿瘤免疫反应，包括树突状细胞的成熟，纠正th1/th2不平衡，并促进单核细胞间的白素-15生产；(3)通过对肿瘤细胞的直接作用，通过诱导细胞凋亡和抑制转移对化疗的抗肿瘤效果进行增强。多糖结合蛋白在临床疗上主要用于各种癌症，在胃癌或结直肠癌的患者中，联合使蛋白结合多糖和术后辅助化疗延长了患者的生存期，这一效果在多元分析中得到了证实。对于小细胞肺癌，蛋白结合多糖结合化疗延长了缓解期。此外，蛋白结合多糖被证明能有效对抗各种癌症，减少化疗的不良影响，提高生活质量。因此，有必要研究具有免疫调节作用的寡糖肽。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种具有免疫调节作用的菊糖精氨酸赖氨酸组成的寡糖肽，该寡糖肽具备良好的稳定性。本专利技术的技术方案如下：本专利技术提供一种寡糖肽，其特征在于，所述寡糖肽由菊糖与肽反应形成。优选地，所述肽选自短肽，优选二肽、三肽、四肽或五肽，更优选五肽。上述方案中，所述五肽由精氨酸赖氨酸组成。优选地，所述五肽中精氨酸与赖氨酸比例为3:5。本专利技术还提供一种制备寡糖肽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)精氨酸赖氨酸肽的制备：将碱基插入酵母中，培养酵母进行表达，将表达的颗粒回收后与内肽酶Lys-C反应，长肽切割后得到目标的精氨酸赖氨酸肽；(2)菊糖精氨酸赖氨酸肽的制备：将菊糖、精氨酸赖氨酸肽、水进行美拉德反应，得到菊糖精氨酸赖氨酸肽产物；(3)将产物浓缩后冻干；(4)将第(3)所得粉碎后得到菊糖精氨酸赖氨酸肽加入粉碎机中进行粉碎，得到寡糖肽粉末。优选地，所述酵母为毕赤酵母，表达出一串由100个四肽的重复组成序列，共计500个氨基酸，1500个碱基；回收的颗粒按3％的浓度与0.5％的内肽酶Lys-C反应，将含500个氨基酸的长肽切成只含100个氨基酸的五肽。更优选地，所述步骤(2)中菊糖为25％、精氨酸赖氨酸混合物五肽为1％、纯水为74％。本专利技术还涉及一种药物组合物，所述药物组合物由上述方案中所述的寡糖肽与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂组成。本专利技术还涉及所述的寡糖肽或药物组合物在制备预防和/或治疗与蛋白质激酶有关的疾病或病症药物中的用途，所述蛋白质激酶选自EGFR受体酪氨酸激酶或HER-2受体酪氨酸激酶，所述癌症选自胃癌、结直肠癌、肺癌、乳腺癌或表皮鳞癌，优选小细胞肺癌。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步阐述。这些实施例仅是出于解释说明的目的，而不限制本专利技术的范围和实质。实施例1、1％的精氨酸赖氨酸混合物五肽的制备(1)精氨酸赖氨酸肽的制备：称取RinkamideMBHA多肽合成树脂(0.58mmol/g)，加入到反应容器中，依次用二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺洗涤后，加入20％哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液混匀反应10分钟，重复上述操作一次，脱掉树脂末端的Fmoc保护基团。用N,N-二甲基甲酰胺洗涤脱保护后的树脂后，加入侧链和α氨基均被Fmoc基团保护的赖氨酸Fmoc-Lys(Fmoc)-OH、叔丁醇、DIC和2mLN,N-二甲基甲酰胺，充分溶解。Fmoc-Lys(Fmoc)-OH、叔丁醇和DIC与树脂的摩尔比均为5:1。将反应容器密封置于34℃恒温摇床振摇4小时，采用Kaiser颜色反应监测反应终点。反应完毕后加入N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂，同时脱掉赖氨酸的两个Fmoc保护基，再加入多肽连接物、叔丁醇、DIC和2mLN,N-二甲基甲酰胺，充分溶解。多肽连接物、叔丁醇和DIC与树脂的摩尔比均为10:1。多肽的连接物原料为Fmoc-Arg-OH保护的精氨酸。将密封的反应容器置于34℃恒温摇床振摇6小时，采用Kaiser颜色反应监测反应终点。反应完毕后加入DMF洗涤树脂，脱掉连接物上的Fmoc保护基，同法将氨基酸从羧基端到氨基端依次连接，形成多肽。将四肽由毕赤酵母表达出一串由100个四肽的重复组成序列，共计500个氨基酸，1500个碱基。将这1500个碱基插入毕赤酵母中，培养酵母进行表达，将表达的颗粒进行回收，回收的颗粒在37℃，按3％的浓度与0.5％的内肽酶Lys-C反应2小时，这种内肽酶Lys-C切割位点是K-Lys，将含500个氨基酸的长肽切成只含100个氨基酸的五肽，得到精氨酸赖氨酸混合物五肽(精氨酸:赖氨酸＝3:5)。实施例2、寡糖肽的制备(2)菊糖精氨酸赖氨酸肽的制备：将25％菊糖、1％的精氨酸赖氨酸混合物五肽(精氨酸：赖氨酸＝3:5)、74％纯水进行美拉德反应，反应条件为95℃水浴，反应时间3个小时，最后形成褐色膏体；(3)将褐色膏体在氮气环境下、负20℃进行冻干；(4)将第(3)所得粉碎后得到菊糖精氨酸赖氨酸肽加入粉碎机中进行进行超微粉碎，最后得到种寡糖肽粉末。本专利技术寡糖肽粉末每日补充量为3克，可用于各种食品及保健品的添加。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种寡糖肽，其特征在于，所述寡糖肽由菊糖与肽反应形成。

【技术特征摘要】
1.一种寡糖肽，其特征在于，所述寡糖肽由菊糖与肽反应形成。2.如权利要求1所述的寡糖肽，其特征在于，所述肽选自短肽，优选二肽、三肽、四肽或五肽，更优选五肽。3.如权利要求2所述的寡糖肽，其特征在于，所述五肽由精氨酸赖氨酸组成。4.如权利要求3所述的寡糖肽，其特征在于，所述五肽中精氨酸与赖氨酸比例为3:5。5.一种制备权利要求4所述的寡糖肽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)精氨酸赖氨酸肽的制备：将碱基插入酵母中，培养酵母进行表达，将表达的颗粒回收后与内肽酶Lys-C反应，长肽切割后得到目标的精氨酸赖氨酸肽；(2)菊糖精氨酸赖氨酸肽的制备：将菊糖、精氨酸赖氨酸肽、水进行美拉德反应，得到菊糖精氨酸赖氨酸肽产物；(3)将产物浓缩后冻干；(4)将第(3)步骤所得到的菊糖精氨酸赖氨酸肽加入粉碎机中进行粉碎，得到寡糖肽粉末。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：陈俊丞，
申请(专利权)人：广西天昌投资有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45