一种曲札茋苷长循环脂质体及其制备方法技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及一种曲札茋苷长循环脂质体及其制备方法。本发明专利技术提供的曲札茋苷长循环脂质体中包括曲札茋苷、磷脂、胆固醇和吐温‑80。还包括冻干保护剂乳糖。其组方合理，能够实现对药物的包封，和控制释放。另外，本发明专利技术还提供了该曲札茋苷长循环脂质体的制备方法，该工艺采用薄膜分散法，操作简单，参数适宜，从而获得了理想的包封率和脂质体形态。实验表明，本发明专利技术提供的脂质体在透射电镜下为球形或类球形，分散性较好，Zeta电位为‑39.34mV，平均粒径为161.95nm，分散指数PDI为0.3097，包封率达到54.5％。经冻干复水后，性质依然稳定。

A long circulating liposome of Qu saponins and its preparation method

The invention relates to the field of medicine technology, in particular to a long circulating liposome of Qu saponins and a preparation method thereof. The long circulating liposomes of Qu zagin include curzin, phospholipids, cholesterol and Twain 80. It also includes freeze-dried protectant lactose. Its prescription is reasonable, which can encapsulate and control the drug. In addition, the invention also provides the preparation method of the long circulating liposome of the saposide. This process uses thin film dispersing method, and the operation is simple and the parameters are suitable, thus the ideal encapsulation efficiency and the morphology of liposome are obtained. The experiment shows that the liposomes are spherical or spherical under transmission electron microscope, and the dispersibility is good. The Zeta potential is 39.34mV, the average particle size is 161.95nm, the dispersion index PDI is 0.3097, and the encapsulation efficiency is 54.5%. After freeze-drying and rehydration, the properties are still stable.

【技术实现步骤摘要】
一种曲札茋苷长循环脂质体及其制备方法
本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种曲札茋苷长循环脂质体及其制备方法。
技术介绍
曲札茋苷(Piceatannol-3'-O-β-D-glucopyranoside)，又名白皮杉醇-3'-O-β-吡喃葡萄糖苷，是从蓼科植物拉萨大黄(RheumlhasaenseA.J.LietP.K.Hsiao)的根或根茎中提取、分离、纯化而成的有效成分。曲札茋苷是天然药物的有效成分，临床前药效学研究表明，其可有效阻断脑缺血病理机制的多个环节，作用范围涵盖了血管-神经单元，并兼顾对外周体循环系统的调节作用(抑制ACE、保护血管内皮功能；抑制血小板聚集、降低血液粘度)，因而具有较强的抗脑缺血作用。研究表明，曲札茋苷对线栓法诱导的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型具有一定的保护作用，可以显著降低脑梗死百分率，改善行为学评分，且效力与依达拉奉相当。但是，曲札茋苷多次给药时对线栓诱导的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的治疗时间窗为3小时之内，缺血后6小时给药则对脑梗死的百分率没有显著降低作用。大鼠静脉注射曲札茋苷1、3、9mg/kg后，血浆中的曲札茋苷消除半衰期为18～32.7min。模型鼠脑中曲札茋苷的的分布有一定的增加，大鼠静脉注射曲札茋苷5min后脑中即能测到曲札茋苷，但随血药浓度降低，脑中曲札茋苷含量迅速降低。因此延长曲札茋苷的半衰期，增加曲札茋苷在脑中的分布，以期增加疗效和减少对其他脏器的毒性成了研究的重点。脂质体(liposome)系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。作为药物载体，脂质体能够保护所载的药物，控制药物的释放，提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量，降低药物的毒性。长循环脂质体(longcirculationliposomes)也成为隐形脂质体或空间稳定脂质体，能够降低脂质体被网状内皮系统的摄取，从而使脂质体在体内的清除速率减慢、在血液中的驻留时间延长，从而延长脂质体所载药物在体内的作用时间。因此，制备曲札茋苷的长循环脂质体具有良好的应用前景。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供及一种曲札茋苷长循环脂质体及其制备方法，本专利技术提供的曲札茋苷长循环脂质体平均粒径小，粒径分散均匀，且包封率较高。本专利技术提供的曲札茋苷长循环脂质体包括以下质量份的原料：曲札茋苷0.05份～0.5份；磷脂1～8份；胆固醇0份～1份；吐温-800.05份～0.2份。胆固醇和磷脂的不同质量比影响曲札茋苷纳米脂质体的包封能力。在曲札茋苷载药量一定的情况下，随着胆固醇和磷脂的质量比从0提高到2，曲札茋苷脂质体的包封率先增加后降低。这可能是因为胆固醇嵌入到脂质膜中增强了膜的致密度和刚性，水合过程中提高了脂质体的稳定性，使得脂质体的包封率增加。在胆固醇嵌入量超过一定的范围后，胆固醇又将干扰双分子层结构，导致溶质分子从脂质体中泄露。本专利技术中，胆固醇与磷脂的比例为(0～1)：(1～8)；优选为1:0.25。随着曲札茋苷投药量的增加，脂质体中包封的曲札茋苷分子也在增多，当然载药量也在增加。当曲札茋苷与磷脂的质量比为1:10时，曲札茋苷长循环脂质体的包封率达到最高值为65.3％。药脂比超过1:10将导致曲札茋苷包封率的降低。在较低的载量下，由于溶质分子的浓度低，所以脂质体囊泡对曲札茋苷的包封几率也小。在一定条件下，一定的磷脂形成的脂质体数量是有限的，所以随着载量的增加，包封率反而下降。载药量高可降低生产成本，但过高的载药量又会降低包封率，所以需考虑包封率和载药量两个指标，本实验选择载药量比较可观时，尽可能提高包封率。一些具体实施例中，曲札茋苷长循环脂质体包括以下质量份的原料：曲札茋苷0.1份；磷脂1份；胆固醇0.25份；吐温-800.2份。本专利技术中，磷脂由蛋黄卵磷脂和DSPE-PEG2000组成，其中蛋黄卵磷脂的摩尔百分数为95％。为了提高脂质体的稳定性，还包括冻干保护剂，所述冻干保护剂为乳糖。具体的，制剂中还包括乳糖，所述乳糖的质量分数为0.1～10份。作为优选，乳糖的质量分数为1～10份。实验结果表明，本专利技术提供的曲札茋苷长循环脂质体呈圆形或卵圆形，包封率可达65.3％，该实施例制得的曲札茋苷长循环脂质体的平均粒径为161.95nm，分散指数PDI为0.3097,Zeta电位为-39.34mV，各项指标良好。本专利技术还提供了曲札茋苷长循环脂质体的制备方法，包括：步骤1：将磷脂与胆固醇溶解于有机溶剂后，挥去有机溶剂制得脂质薄膜；步骤2：将曲札茋苷和吐温-80溶解于缓冲液，制得水相；步骤3：将水相与步骤1中制得的脂质薄膜混合，经震荡、超声后，过滤制得曲札茋苷长循环脂质体混悬液。所述挥去采用减压旋转蒸发的方式。有机溶剂的选择对能否形成均一的薄膜非常关键。常用的有机溶剂有乙醇、氯仿、乙酸乙酯、丙酮和乙醚等，有机溶剂的不同影响形成薄膜的质量，继而最终影响包封率和粒径。考虑到氯仿的毒性太大，本试验分别考察了用乙酸乙酯、乙醚、乙醇和丙酮的混合物(1:1)作为有机溶剂来溶解脂质材料，观察成膜效果。结果表明，乙酸乙酯对脂质材料的溶解性较差，成膜不均匀；用乙醚溶解脂质材料，溶解较好，但旋转蒸发时溶剂挥发较快，成膜不均匀；乙醇和丙酮的混合液(1:1)作为溶剂，对脂质材料的溶解性较好，成膜性较好。因此，本专利技术实施例中，有机溶剂为乙醇和丙酮的混合物，其中乙醇与丙酮的体积比为1：1。另外，本专利技术实验表明，过低或过高的步骤1中，将磷脂溶解后，过高或过低的磷脂浓度都会使曲札茋苷包封率下降。另一方面当磷脂浓度太高时，所制备脂质体的粒径和多分散性指数也变得很大，稳定性降低。实施例中，选择磷脂浓度为1.0％。本专利技术实施例中，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。实验表明，曲札茋苷在PBS中的溶解度随着pH的升高有所增加，同时结合文献资料，磷脂在pH6.5左右最稳定。同时考虑到曲札茋苷在中性及弱酸性溶液中较稳定，以及在不同pH的PBS中的溶解度，本专利技术实施例中采用的PBS缓冲液的pH值为7.4。水化介质(缓冲液)的离子强度对曲札茋苷脂质体包封率会产生影响。实验结果表明，磷酸盐缓冲液的离子强度在低于0.1mol·L-1时，对曲札茋苷脂质体的包封率影响不显著。但在离子强度较高时会导致包封率下降。这可能是由于磷脂水合作用和电解质之间对水化分子的竞争作用导致的包封率下降。所以，在保证足够的缓冲能力的前提下，离子强度越小越好。本实验确定的离子强度为0.05mol·L-1。震荡的目的是用磷酸盐缓冲液对脂质薄膜进行分散，从而进行药物包封。本专利技术实验结果表明，随着载药温度的升高，曲札茋苷脂质体的包封率先增大后降低，升高温度有利于药物的包封，但过高的温度又会导致脂质体破坏，所以得到较高的包封率需要合适的温度。而震荡时间超过一个小时之后，再增加载药时间，对包封率的影响则较小。所以考虑到效率问题可以选择一个小时作为载药时间。因此，本专利技术采用的震荡的温度为40℃，震荡时间为1h～4h。处于节省时间考虑，优选震荡时间为1h。超声的目的是进行整理，超声时间对脂质体的包封率和粒径均有一定的影响，适度超声可以减小粒径，但超声时间过长，或破坏脂质膜，导致药物的泄漏，包封率降低，所以综合考虑包封率和粒径，本专利技术实施例中，超声时间为10min。40～200W超声本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种曲札茋苷长循环脂质体，其特征在于，包括以下质量份的原料：

【技术特征摘要】
1.一种曲札茋苷长循环脂质体，其特征在于，包括以下质量份的原料：曲札茋苷0.05份～0.5份；磷脂1份～8份；胆固醇0份～1份；吐温-800.05份～0.2份。2.根据权利要求1所述的曲札茋苷长循环脂质体，其特征在于，包括以下质量份的原料：曲札茋苷0.1份；磷脂1份；胆固醇0.25份；吐温-800.2份。3.根据权利要求1所述的曲札茋苷长循环脂质体，其特征在于，还包括乳糖，所述乳糖的质量分数为1～10份。4.根据权利要求1所述的曲札茋苷长循环脂质体，其特征在于，所述磷脂由蛋黄卵磷脂和DSPE-PEG2000组成，其中蛋黄卵磷脂的摩尔百分数为95％。5.权利要求1～4任一项所述的曲札茋苷长循环脂质体的制备方法，包括：步骤1：将磷脂与胆固醇溶解于有机溶剂后，挥去有机溶剂制得脂质薄...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈云建，董爱莉，李正蓉，朱泽，杨兆祥，
申请(专利权)人：昆药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53