一株海洋放线菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株海洋放线菌，所述海洋放线菌为灰略红链霉菌

A marine actinomycetes and its application

The invention discloses a marine actinomycete, and the marine actinomycete is Streptomyces sostrenus.

【技术实现步骤摘要】
一株海洋放线菌及其应用
本专利技术属于海洋放线菌资源开发与利用领域，具体涉及一株海洋放线菌及其应用。
技术介绍
放线菌是产生天然生物活性物质的重要微生物资源，其开发利用一直备受各国重视。迄今所发现的20000余种微生物来源的生物活性物质中，约有50%是由放线菌产生的。因此，放线菌资源的开发以及采用新方法对放线菌资源的深入挖掘一直是放线菌代谢产物研究的重要内容。海洋具有低温、低营养、高盐、无光照、缺氧等独特的物理、化学和生态环境，故海洋放线菌必然产生与陆地微生物不同的代谢途径和机体防御机制，这对发现新型药物先导化合物、研究药物作用新机理、新靶点等具有重要的意义。产气杆菌为革兰氏阳性粗大梭菌，致病条件与破伤风梭菌相似。产气杆菌既能产生强烈的外毒素，又有多种侵袭性酶，并有荚膜，构成其强大的侵袭力，引起感染致病。产气杆菌产生的外毒素的毒性虽不如肉毒毒素和破伤风毒素强，但种类多，外毒素有α、β、γ、δ、ε、η、θ、ι、κ、λ、μ和ν，及具有毒性作用的多种酶，如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶和dna酶等，构成强大的侵袭力。变形杆菌为革兰氏阴性菌，可引起多种感染。常见感染有呼吸道感染、腹泻、尿路感染、腹膜炎、中耳炎、乳突炎、心内膜炎、脑膜炎、败血病，还可引起食物中毒。中毒食品主要以动物性食品为主，其次为豆制品和凉拌菜，发病季节多在夏、秋，中毒原因为被污染食品在食用前未彻底加热，变形杆菌食物中毒是我国常见的食物中毒之一。
技术实现思路
本专利技术提供了一种海洋放线菌。本专利技术还提供了该海洋放线菌的应用。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：一株海洋放线菌，所述海洋放线菌为灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8，于2017年11月17日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：CGMCCNo.14923。本专利技术的灰略红链霉菌取样地位于山东日照海岸线海泥，经腐殖酸培养基筛选，然后利用高氏一号培养基进行划线纯化获得。所述海洋放线菌的应用为海洋放线菌抑制产气杆菌和变形杆菌生长中应用。检测灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对产气杆菌和变形杆菌有抑制作用，采用牛津杯法进行抑菌实验，具体方法如下：（1）用竹签将灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8接种到高氏一号培养基三角瓶中，28℃、180rpm/min条件下摇床培养7天，菌液于10000rpm/min条件下离心l0min，取上清液抽滤除菌，得发酵上清液；（2）将变形杆菌、产气杆菌分别接种于LB培养基，37℃、150rpm/min条件下摇床培养8-10h，分别得变形杆菌病原菌和产气杆菌病原菌；（3）取变形杆菌病原菌和产气杆菌病原菌各100ul分别涂布于各自的LB培养基平板上，再在平板上相隔3cm等距离放置4个无菌的牛津杯，吸取120ul发酵上清液加入牛津杯中，移至37℃培养箱培养18-24h后，观察牛津杯周围是否形成抑制圈；（4）经过测量，灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对产气杆菌和变形杆菌的抑菌圈均达到2.5cm。所述LB培养基的配方为：酵母粉5g，蛋白胨10g，NaCl10g，蒸馏水1L。本专利技术腐殖酸培养基的配方为：腐殖酸1g，Na2HPO40.5g，KCl1.7gMgSO40.5g，FeSO4·7H2O0.01g，CaCO30.02g，复合维生素1mL，海水补充至1L，pH为7.5。本专利技术高氏一号培养基的配方为：可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，FeSO4·7H2O0.01g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，海水补充至1L，pH为7.5。本专利技术的有益效果：本专利技术的海洋放线菌为灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对抑制产气杆菌和变形杆菌生长具有很好的效果，具有广阔的应用前景。菌种保藏信息保藏时间：2017年11月17日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCCNo.14923，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101分类命名：灰略红链霉菌streptomycesgriseorubens。附图说明图1为本专利技术灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对变形杆菌的抑菌效果图。图2为本专利技术灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对产气杆菌的抑菌效果图。具体实施方式以下为列举的具体实施方式对本专利技术做进一步的说明，但并不因此而限制本专利技术的内容。本专利技术腐殖酸培养基的配方为：腐殖酸1g，Na2HPO40.5g，KCl1.7gMgSO40.5g，FeSO4·7H2O0.01g，CaCO30.02g，复合维生素1mL，海水补充至1L，pH为7.5。本专利技术高氏一号培养基的配方为：可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，FeSO4·7H2O0.01g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，海水补充至1L，pH为7.5。实施例1一株海洋放线菌，所述海洋放线菌为灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8，于2017年11月17日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：CGMCCNo.14923。本专利技术的灰略红链霉菌取样地位于山东日照海岸线海泥，经腐殖酸培养基筛选，然后利用高氏一号培养基进行划线纯化获得。所述海洋放线菌的应用为海洋放线菌抑制产气杆菌和变形杆菌生长中应用。检测灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对产气杆菌和变形杆菌有抑制作用，采用牛津杯法进行抑菌实验，具体方法如下：（1）用竹签将灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8接种到高氏一号培养基三角瓶中，28℃、180rpm/min条件下摇床培养7天，菌液于10000rpm/min条件下离心l0min，取上清液抽滤除菌，得发酵上清液；（2）将变形杆菌、产气杆菌分别接种于LB培养基，37℃、150rpm/min条件下摇床培养8-10h，分别得变形杆菌病原菌和产气杆菌病原菌；（3）取变形杆菌病原菌和产气杆菌病原菌各100ul分别涂布于各自的LB培养基平板上，再在平板上相隔3cm等距离放置4个无菌的牛津杯，吸取120ul发酵上清液加入牛津杯中，移至37℃培养箱培养18-24h后，观察牛津杯周围是否形成抑制圈；（4）经过测量，灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8对产气杆菌和变形杆菌的抑菌圈均达到2.5cm。所述LB培养基的配方为：酵母粉5g，蛋白胨10g，NaCl10g，蒸馏水1L。灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8的获取（1）称取1g海泥，加入10ml胆酸钠(0.1%w/v)和玻璃珠10颗，200r/min条件下振荡30min，500g离心力条件下离心1min，取上层海泥悬液转移至干净的管（1）中；下层海泥沉淀加入l0ml、0.05mol/L的4℃Tris缓冲液(pH7.4)中，200r/min振荡30min，500g离心力条本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株海洋放线菌，其特征在于，所述海洋放线菌为灰略红链霉菌

【技术特征摘要】
1.一株海洋放线菌，其特征在于，所述海洋放线菌为灰略红链霉菌（streptomycesgriseorubens）f8，于2017年11月17日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：CGMCCNo.14923。2.一种权利要求1所述海洋放线菌的应用，其特征在于，所述海洋放线菌的应用为海洋放线菌抑制产气杆菌和变形杆菌生长中应用。3.根据权利要求2所述海洋放线菌的应用，其特征在于，所述海洋放线菌抑制产气杆菌和变形杆菌生长的应用，具体方法如下：（1）用竹签将灰略红链霉菌f8接种到高氏一号培养基三角瓶中，28℃、180rpm/min条件下摇床培养7天，菌液于10000rpm/min条件下离心10min，取...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨革，梁光杰，车程川，巩志金，刘金锋，曹利，
申请(专利权)人：曲阜师范大学，
类型：发明
国别省市：山东,37