一种放线菌菌株KN37及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体公开一种放线菌菌株KN37及其应用。通过显微观察和16S rDNA序列分析，将分离得到的放线菌菌株KN37鉴定为链霉菌属，其保藏编号为CGMCC No.13160。菌株KN37的发酵液对葡萄灰霉病菌、番茄早疫病菌、棉花枯萎病菌、番茄叶霉病菌等多种植物病原菌具有较好的抑制作用，可制备用于防治农作物病害的微生物药剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，涉及微生物及其应用，具体涉及一种隶属于链霉菌属的放线菌菌株KN37，以及其在抑制多种农作物病原菌的应用。
技术介绍
新疆优越的自然条件使其在农产品生产方面具有先天的优势。种植业是新疆农业中的主要产业，占农业总产值的76％，是增加农业收入的主要来源。新疆种植作物主要包括粮食类、油料类、棉花类、蔬菜类、瓜果类和其他经济作物。然而，植物病害严重威胁着农作物的正常生产，几乎每种农作物都受到多种病原真菌的危害。据统计，全世界每年因植物病害造成的经济损失高达20000亿美元，其中仅蔬菜作物一项每年的经济损失就可达到2000亿美元。我国每年因植物病害造成的损失也是难以计数的，尤其是新疆地区。如新疆棉花每年因病害损失皮棉约36万吨，市价约70亿元。植物病害造成新疆地区加工番茄的损失同样巨大，每年造成经济损失达30亿元之多。因此，植物病害的防治一直以来都是困扰农业生产的一大难题。近些年，化学农药的大量使用导致农产品出口受限、抗药性、环境污染等问题的产生。因此，开发新型高效、广谱、低毒、环保的杀菌剂(微生物药剂)一直是当今农药研究的难点和热点。
技术实现思路
本专利技术提供一种放线菌菌株KN37，菌株KN37的发酵液可抑制多种农作物病原菌，可用于开发成新型高效、广谱、低毒、环保的微生物杀菌剂。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：一种放线菌菌株KN37，是专利技术人在新疆喀纳斯地区采集的土壤中分离得到的一种放线菌。该菌株(生物材料)的保藏信息为：名称：Streptomycessp.KN37，以下简称为KN37；保藏编号：CGMCCNo.13160；保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；保藏时间：2016年10月27日。本专利技术通过16SrDNA序列方法对菌株KN37进行了分类鉴定。提取此菌的DNA，扩增16SrDNA的序列。从菌株KN37与链霉菌已有效发表种16SrDNA序列构建出的系统发育树可以获知，菌株KN37归属于链霉菌属。进一步地，本专利技术给出了菌株KN37的种子培养基及其培养条件。其培养条件为：在28℃、120rpm条件下，在培养基中摇床培养36h；所述培养基组成为：蛋白胨10g/L、酵母膏2g/L、酸水解酪蛋白2g/L、氯化钠6g/L、pH值7.4。同时，本专利技术还结合形态学特征对菌株KN37进行了分类鉴定。将菌株KN37接种在培养基上，呈现的形态学特征为：菌落绒毛状，菌落的颜色为白色，在培养基中基内菌丝无横隔、不断裂，气生菌丝生长旺盛，孢子柱形，表面光滑，不产生可溶性色素。结合菌株形态观察、培养特性及16SrDNA的鉴定结果，本专利技术所述放线菌菌株KN37隶属于链霉菌属，因而本专利申请专利技术人将其命名为Streptomycessp.KN37。另一方面，本专利技术还给出了所述放线菌菌株KN37在生产广谱抗菌活性物质的用途。所述广谱抗菌活性物质来源于菌株KN37经液体发酵培养后的发酵液，所述发酵培养条件为：在28℃、180rpm条件下摇床培养7d；培养基组成为：1％豆粉浸汁1L、葡萄糖10g、蛋白胨3g、氯化钠2g、碳酸钙2g，pH自然。根据试验数据，所述菌株KN37的发酵液可抑制多种农作物病原菌。优选地，所述菌株KN37的发酵液用于抑制葡萄灰霉病菌(Botrytiscinerea)、番茄早疫病菌(Alternariasolani)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporum)、番茄叶霉病菌(Fulviafulva)的生物活性。鉴于放线菌菌株KN37发酵液的生物活性，所述菌株KN37的发酵液制备用于防治农作物病害的微生物药剂，即本专利技术所述杀菌剂。与现有技术相比，本专利技术至少具有下述的有益效果或优点：(1)本专利技术提供一种新的放线菌菌株KN37。该菌株可作为研制高效、广谱、低毒、环保的微生物杀菌剂的生物材料，菌株KN37的发酵液能够直接用于杀菌物质抑制多种农作物病原菌。尤其是，菌株KN37的发酵液对葡萄灰霉病菌、番茄早疫病菌、棉花枯萎病菌、番茄叶霉病菌具有较好的抑制作用。(2)本专利技术优化了菌株KN37种子培养基及其培养条件。其培养条件为：在28℃、120rpm条件下，在培养基中摇床培养36h；所述培养基组成为：蛋白胨10g/L、酵母膏2g/L、酸水解酪蛋白2g/L、氯化钠6g/L、pH值7.4。(3)本专利技术给出了菌株KN37具有杀菌活性的发酵液的制备条件。其发酵培养条件为：在28℃、180rpm条件下摇床培养7d；培养基组成为：1％豆粉浸汁1L、葡萄糖10g、蛋白胨3g、氯化钠2g、碳酸钙2g，pH自然。附图说明图1是本专利技术所述放线菌菌株KN37的菌落形态图。图2是本专利技术所述放线菌菌株KN37与相关种16SrDNA序列的系统发育树。具体实施方式以下将结合实施例对本专利技术的技术方案做进一步详细阐述。实施例1：菌株KN37的分离和鉴定(1)放线菌菌株KN37是从新疆喀纳斯地区采集的土壤中分离得到一种放线菌。该菌株KN37的种子培养条件为：在28℃、120rpm条件下，在培养基中摇床培养36h；所述培养基组成为：蛋白胨10g/L、酵母膏2g/L、酸水解酪蛋白2g/L、氯化钠6g/L、pH值7.4。(2)采用16SrDNA基因测序法对放线菌菌株KN37进行分类鉴定。16SrDNA序列测定委托上海生工生物工程股份有限公司进行。具体测序方法如下：用溶菌酶法从新鲜菌体中提取基因组DNA，采用通用引物(27F和1492R)进行16SrDNA扩增，PCR产物经检测后测序。经测定，该菌株KN37的16SrDNA序列如下所示：ACCATGCAAGTCGAACGATGAACCACTTCGGTGGGGATTAGTGGCGAACGGGTGAGTAACACGTGGGCAATCTGCCCTGCACTCTGGGACAAGCCCTGGAAACGGGGTCTAATACCGGATAACACACGCTCAGGCATCTGAGTGTGTTGAAAGCTCCGGCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAGAAGCTCACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCAGCAGGGAAGAAGCGAAAGTGACGGTACCTGCAGAAGAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGCGGCTTGTCACGTCGGTTGTGAAAGCCCGGGGCTTAACCCCGGGTCTGCAGTCGATACGGGCAGGCTAGAGTGTGGTAGGGGAGATCGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGATCTCTGGGCCATTACTGACGCTGAG本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种放线菌菌株KN37，该菌株于2016年10月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.13160。

【技术特征摘要】
1.一种放线菌菌株KN37，该菌株于2016年10月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.13160。2.根据权利要求1所述放线菌菌株KN37，其特征在于，所述菌株KN37归属于链霉菌属。3.根据权利要求1所述放线菌菌株KN37，其特征在于，所述菌株的形态学特征描述为：菌落绒毛状，菌落的颜色为白色，在培养基中基内菌丝无横隔、无断裂，气生菌丝生长旺盛，孢子柱形，表面光滑，无可溶性色素产生。4.根据权利要求1所述放线菌菌株KN37，其特征在于，所述菌株的种子培养条件为：在28℃、120rpm条件下，在培养基中摇床培养36h；所述培养基组成为：蛋白胨10g/L、酵母膏2g/L、酸水解酪蛋白2g/L、氯化钠6g/L、pH值7...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国强，杨德松，韩小强，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65