气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法技术

本发明专利技术公开一种气相色谱‑串联质谱法测定饲料中硫丹的方法，该方法包含样品前处理和检测步骤；它是称取一定量的样品，以有机溶剂色谱纯乙腈为萃取试剂萃取样品中的硫丹后，氮吹仪浓缩，经过弗罗里硅藻土SPE固相萃取柱对浓缩液进行净化，再用气相色谱‑串联质谱法定性及定量。本发明专利技术以有机溶剂色谱纯乙腈为萃取溶剂，浓缩后经过弗罗里SPE固相萃取柱净化，该前处理简便且耗时短；气相色谱‑串联质谱法采取多反应检测（MRM）模式进行测定，灵敏度及精密度高，定性及定量准确；本发明专利技术的方法普适性强，适用于不同配料的饲料样品，能够满足饲料样品中硫丹的快速分离及检测。

Determination of endosulfan in feed by gas chromatography tandem mass spectrometry

The present invention discloses a method for the determination of endosulfan in feed by gas chromatography tandem mass spectrometry, which includes sample pretreatment and detection steps; it is called a certain amount of sample, and is concentrated by a nitrogen blowing instrument after the extraction reagents of pure acetonitrile as the extraction reagent of organic solvent chromatography, and through the solid phase extraction of Flori diatomite SPE The column was purified and concentrated by gas chromatography tandem mass spectrometry (GC / MS). The invention uses the organic solvent chromatography pure acetonitrile as the extraction solvent and purifies by the Flori SPE solid phase extraction column after concentration. The pretreatment is simple and time-consuming; the gas chromatography tandem mass spectrometry is determined by the multi reaction detection (MRM) model with high sensitivity, high precision, qualitative and quantitative accuracy. The method of the invention is universal. It is suitable for quick separation and detection of endosulfan in feed samples.

【技术实现步骤摘要】
气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法
本专利技术涉及一种测定饲料中农药残留硫丹的方法，特别是针对饲料这种复杂基质的前处理及气相色谱-串联质谱的检测方法。
技术介绍
随着畜禽业的发展，饲料生产量也大幅提升，饲料生产质量也备受关注。每年都会由于畜禽产品的农药、兽药残留问题影响其出口量。饲料的原料主要来自农作物，因此饲料的农药残留是致使畜禽产品农药残留的主要因素。饲料中的农药残留不仅对畜禽有着致毒、致畸、致癌等影响，而且通过畜禽产品进入人体危害健康。通过控制主要源头饲料农药残留是控制畜禽产品中农药残留的很好手段，所以饲料中农药残留检测就显得十分必要。硫丹主要用于农用杀虫剂，普遍用于防治谷物、蔬菜、水果等作物的害虫。硫丹做为有机氯类杀虫剂不仅具有剧毒性、生物蓄积性等特点，而且结构稳定，在环境中降解的时间长。残留在环境中的硫丹对人体影响神经中枢系统、免疫功能及激素的分泌，并由此被《斯德哥尔摩公约》列为禁用物质。目前，硫丹定量检测方法主要包括：近红外快速检测方法、酶联免疫法、气相色谱法、气相色谱-质谱法等方法。诸多方法中的硫丹检测针对的是茶叶、蔬菜、水果及水产品的基质，然而对于饲料基质中硫丹检测目前很少有报道。气相色谱-串联质谱由于其抗干扰力强定性可靠且灵敏度高性能稳定，定量准确被广泛用于农残的检测。
技术实现思路
本专利技术的目的是：设计一种气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法，针对饲料基质采用弗罗里硅土SPE小柱净化，用气相色谱-串联质谱测定硫丹含量，此方法处理耗时短，耗材价格低，且可以很好的将饲料中硫丹提取并净化；同时气相色谱-串联质谱选择离子扫描参数能够准确检测硫丹含量，建立的气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹方法前处理快速、简单、检出限低(1μg/kg)，准确度及精密度高。本专利技术的技术解决方案是：该气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法包含样品前处理和检测步骤；其特征是：所述的样品前处理步骤是：称取一定量的样品，以有机溶剂色谱纯乙腈为萃取试剂萃取样品中的硫丹后，氮吹仪浓缩，采用弗罗里硅藻土SPE固相萃取柱对浓缩液进行净化；所述的检测步骤是：净化后的待测液，采用气相色谱-串联质谱分离并检测，多反应检测（MRM）模式进行定性和定量。其中，所述的样品前处理具体步骤是：（1）制备样品：取饲料用粉碎机粉碎，过0.25mm孔径(60目)筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用；（2）萃取浓缩：精确称取20g（精确至0.01g）粉碎饲料样品至100mL均质杯中，加入40mL色谱纯乙腈均质2min，将混合物转移至漏斗中过滤，取滤液10mL于试管中氮吹至尽干，加入1mL正己烷待净化；（3）柱净化：弗罗里硅藻土SPE小柱加2cm高度的无水Na2SO4，用3mL正己烷–丙酮溶液活化，其中正己烷与丙酮的体积比为10∶1；将步骤（2）的浓缩液转移至小柱，再每次用2mL正己烷–丙酮溶液2~3次洗涤氮吹管，并将洗涤液移入柱中；用8mL正己烷–丙酮溶液洗脱，滤液氮吹至尽干，正己烷定容至1mL，过0.22μm针式尼龙滤膜于色谱进样瓶中，待测定。其中，所述的检测具体步骤是：进样瓶中待测溶液采用气相色谱-串联质谱法进行测定；其中色谱条件为：色谱柱：Agilent122-5532UIDB-5MS（30m×0.25mm，0.25μm，美国安捷伦公司）；进样口温度：280℃；载气：高纯氦，流速1.0mL/min；不分流进样；进样量：1μL；柱温箱升温程序：初始温度70℃保持1min，以15℃/min升至280℃，保持2min；其中质谱条件为：电离模式：电子轰击（EI），70eV；传输线温度280℃；扫描方式：多反应检测模式MRM；离子源温度：230℃；循环周期：24s；色谱过滤峰宽：0.8s；碰撞气：高纯氮气，流量为1.5mL/min；溶剂延迟：5min；母离子、子离子、碰撞能量及驻留时间参数见表1；表1多反应监测模式（MRM）参数注：a定量离子，b定性离子本专利技术的优点是：1、针对饲料基质，采取有机溶剂色谱纯乙腈作为提取溶剂，经过浓缩、弗罗里硅藻土SPE小柱净化的前处理方式，操作简单，提取效率高，过程经济；2、采用气相色谱-串联质谱法测定，进样量少，检测限、灵敏度及精密度高；3、该方法的普适性强，适用于不同类型的饲料样品，能够满足多种饲料样品中硫丹残留的一次性快速萃取、净化、分离及检测的要求。附图说明图1是实施例1中样品溶液的MRM色谱图（1-α-硫丹；2-β-硫丹）；图2是实施例1中样品溶液的MRM质谱图（1-α-硫丹；2-β-硫丹）。具体实施方式下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术的技术方案。这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。实施例1：对10μg/Kg水平添加量空白饲料样品的检测（1）样品前处理步骤：取饲料粉碎机粉碎，过0.25mm孔径(60目)筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用；精确称取20g（精确至0.01g）粉碎饲料样品至100mL均质杯中，添加10μg/Kg水平添加量的标准品，加入40mL色谱纯乙腈均质2min；将液体转移至漏斗中过滤，取滤液10mL于试管中氮吹至尽干，加入1mL正己烷待净化；SPE小柱加2cm高度的无水Na2SO4，用3mL正己烷–丙酮溶液（体积比为10∶1，下同）活化；将浓缩液转移至小柱，再每次用2mL正己烷–丙酮溶液2~3次洗涤氮吹管，并将洗涤液移入柱中，用8mL正己烷–丙酮溶液洗脱，滤液氮吹至尽干，正己烷定容至1mL，过0.22μm针式尼龙滤膜于色谱进样瓶中待测；（2）检测的步骤：进样瓶溶液采用气相色谱-串联质谱法测定；其中色谱条件为：色谱柱：Agilent122-5532UIDB-5MS（30m×0.25mm，0.25μm，美国安捷伦公司）；进样口温度：280℃；载气：高纯氦，流速1.0mL/min；不分流进样；进样量：1μL；柱温箱升温程序：初始温度70℃保持1min，以15℃/min升至280℃，保持2min；其中质谱条件为：电离模式：电子轰击（EI），70eV；传输线温度280℃；扫描方式：多反应检测模式（MRM）；离子源温度：230℃；循环周期：24s；色谱过滤峰宽：0.8s；碰撞气：高纯氮气，流量为1.5mL/min；溶剂延迟：5min；母离子、子离子、碰撞能量及驻留时间参数见表1。检测结果：样品经过有机溶剂提取、浓缩、净化后进入气相色谱-串联质谱检测的MRM色谱图如图1所示，MRM质谱图如图2所示，二种硫丹化合物能够得到有效分离，检测时间为17分钟。实施例2：（1）样品前处理步骤：精确称取25g（精确至0.01g）粉碎饲料样品至100mL均质杯中，加入50mL色谱纯乙腈均质2min；将液体转移至漏斗中过滤，取滤液10mL于50mL梨形瓶用旋转蒸发仪旋至尽干，加入1mL正己烷待净化；弗罗里硅藻土SPE小柱加1cm高度的无水Na2SO4，用2mL正己烷–丙酮溶液（体积比为10∶1，下同）活化；将浓缩液转移至小柱，再每次用2mL正己烷–丙酮溶液2~3次洗涤氮吹管，并将洗涤液移入柱中，用10mL正己烷–丙酮溶液洗脱，滤液用旋转蒸发仪旋至尽干，正己烷定容至1mL，过0.22μm针式尼龙滤膜于色谱进样瓶中待测；（2）检测的步骤：进样瓶溶液采用气相色谱-串联质谱法测定；其中色谱条件为：色谱柱：Ag本文档来自技高网...

【技术保护点】
气相色谱‑串联质谱法测定饲料中硫丹的方法，该方法包含样品前处理和检测步骤；其特征是：所述的样品前处理步骤是：称取一定量的样品，以有机溶剂色谱纯乙腈为萃取试剂萃取样品中的硫丹后，氮吹仪浓缩，采用弗罗里硅藻土SPE固相萃取柱对浓缩液进行净化；所述的检测步骤是：净化后的待测液，采用气相色谱‑串联质谱分离并检测，多反应检测MRM模式进行定性和定量。

【技术特征摘要】
1.气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法，该方法包含样品前处理和检测步骤；其特征是：所述的样品前处理步骤是：称取一定量的样品，以有机溶剂色谱纯乙腈为萃取试剂萃取样品中的硫丹后，氮吹仪浓缩，采用弗罗里硅藻土SPE固相萃取柱对浓缩液进行净化；所述的检测步骤是：净化后的待测液，采用气相色谱-串联质谱分离并检测，多反应检测MRM模式进行定性和定量。2.如权利要求1所述的气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹的方法，其特征是所述的样品前处理具体步骤是：（1）制备样品：取饲料用粉碎机粉碎，过0.25mm孔径筛，充分混匀后装入磨口瓶中备用；（2）萃取浓缩：精确称取20g，粉碎饲料样品至100mL均质杯中，加入40mL色谱纯乙腈均质2min，将混合物转移至漏斗中过滤，取滤液10mL于试管中氮吹至尽干，加入1mL正己烷待净化；（3）柱净化：弗罗里硅藻土SPE小柱加2cm高度的无水Na2SO4，用3mL正己烷–丙酮溶液活化，其中正己烷与丙酮的体积比为10∶1；将步骤（2）的浓缩液转移至小柱，再每次用2mL正己烷–丙酮溶液2~3次洗涤氮吹...

【专利技术属性】
技术研发人员：何正和，魏云计，何健，朱臻怡，秦娴，冯民，
申请(专利权)人：淮安出入境检验检疫局综合技术服务中心，
类型：发明
国别省市：江苏,32