7α-羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术公开了7α‑羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用。本发明专利技术所提供的7α‑羟基类固醇脱氢酶其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，还公开了所述的7α‑羟基类固醇脱氢酶的基因的核苷酸序列SEQ ID NO.2所示。该7α‑羟基类固醇脱氢酶能够催化底物牛磺胆酸(TCA)生成牛磺7‑酮胆酸(T7K‑CA)、催化底物甘氨胆酸(GCA)生成甘氨7‑酮胆酸(G7K‑CA)、催化底物牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)生成牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA)、催化底物甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)生成甘氨7‑酮石胆酸(G7K‑LCA)、催化底物苯甲酰甲酸乙酯(Ethyl benzoylformate，EB)生成苯甲醇甲酸乙酯(Ethyl 2‑hydroxy‑2‑phenylacetate)，并且具有更好的催化活性，对TCDCA、GCDCA、EB的催化活性分别为撒丁岛梭菌7α‑HSDH的10倍、5倍、3倍，具有很大的工业应用价值。

7 alpha hydroxyl steroid dehydrogenase and its coding genes and their applications

The present invention discloses 7 alpha hydroxyl steroid dehydrogenase and its coding gene and application. The amino acid sequence of the 7 alpha hydroxy steroid dehydrogenase provided by the present invention, as shown by the SEQ ID NO.1, is also disclosed by the nucleotide sequence of the gene of the 7 alpha hydroxy steroid dehydrogenase, which is shown by ID NO.2. The 7 alpha hydroxy steroid dehydrogenase can catalyze the substrate taurocholic acid (TCA) to produce taurocholic acid (T7K CA), catalyze the substrate glycine cholic acid (GCA) to produce glycine 7 acetone cholic acid (G7K CA), catalyze the substrate of taurogoose deoxycholic acid (TCDCA) to produce taurocholic acid (T7K LCA), and catalyze the substrate of glycine deoxycholic acid (GCDCA). G7K LCA, Ethyl benzoylformate, EB (Ethyl benzoylformate, EB) produced ethyl benzoate (Ethyl 2 hydroxy phenylacetate), and have better catalytic activity. The catalytic activity for TCDCA, GCDCA and EB is 10 times, 5 times, 3 times that of Clostridium Clostridium of Clostridium of Clostridium of Clostridium Sardinia, respectively. It has great industrial application value.

【技术实现步骤摘要】
7α-羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用
本专利技术涉及生物
，特别涉及7α-羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用。
技术介绍
羰基的不对称还原一直是化学反应研究的热点之一。虽然目前化学方法已经取得了一定的成果，但是化学方法往往存在催化剂种类和数目有限、立体选择性不高、辅助试剂昂贵且不易回收等缺点。而酶促反应不仅具有高效性、化学选择性、区域选择性还具有高度的立体选择性。羟基类固醇脱氢酶(Hydroxysteroiddehydrogenase，HSDH)介导的酶促反应具有相对严格的立体选择性和“不”严格的底物特异性。例如，早在二十世纪八十年代初科学家就已经开始尝试利用微生物产生的7α-、7β-HSDH联合差向异构转化鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholicacid，CDCA)合成熊去氧胆酸(Ursodesoxycholicacid，UDCA)。而游离酶还可以催化结合态胆汁酸——牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholicacid，TCDCA)转化为牛磺熊去氧胆酸(Tauroursodeoxycholicacid，TUDCA)。HSDH的底物不仅仅局限在甾体类化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白，为如下(1)或(2)所示：(1)SEQ ID No.1所示的蛋白；(2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白，为如下(1)或(2)所示：(1)SEQIDNo.1所示的蛋白；(2)将SEQIDNo.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白。2.权利要求1所述蛋白的编码基因。3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因为如下中至少一种：1)SEQIDNo.2所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。5.权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伯初，季顺林，唐士金，祝连彩，娄德帅，谭君，
申请(专利权)人：重庆大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50