一种细胞消化器制造技术

本发明专利技术提供了一种细胞消化器。本发明专利技术的细胞消化器由消化罐、用于支撑消化罐的支架、消化罐顶盖组成；所述消化罐包括罐体和罐底，罐底为收集液体的腔体，腔体的最下端设置排液口，罐体和罐底连接处水平设置一个可拆卸的筛网，所述筛网与罐体相配合，可以将微载体或杂质团块截留，并使细胞流穿至罐底的腔体内；罐体外侧壁设置取样/回收口，取样/回收口位于筛网上方，用于取样或回收微载体。本发明专利技术的细胞消化器可用于原代细胞的消化和微载体培养细胞消化，在消化过程中可将细胞和微载体或大团块实时分离，大大缩短了细胞消化周期并避免底层细胞受压，有利于细胞的传代培养，适用于工厂化规模化细胞培养。

A cell digester

The present invention provides a cell digester. The cell digester of the invention is composed of a digestible tank, a bracket for supporting a digestive tank and a top cover of a digestive tank; the digestible tank consists of a tank and a tank bottom, the bottom of the tank is a chamber with a liquid collection, the bottom of the cavity is arranged at the bottom of the cavity, and a detachable screen is horizontally arranged at the connection between the tank and the bottom of the tank, and the screen is matched with the tank. In addition, the microcarrier or impurity mass can be intercepted and the cell flow is penetrated into the cavity at the bottom of the tank; the outer wall of the tank is set with a sampling / recovery port, and the sampling / recovery is located above the screen for sampling or recovering the microcarrier. The cell digester of the invention can be used for digestion of primary cells and microcarrier culture. In the process of digestion, cells can be separated from microcarriers or large masses in real time, greatly shortening the cell cycle and avoiding the pressure of the underlying cell, which is beneficial to the cell culture, and is suitable for the factory scale cell culture.

【技术实现步骤摘要】
一种细胞消化器
本专利技术涉及一种细胞消化器。
技术介绍
原代细胞制备过程中，需要把组织剪成小块，然后采用消化剂消化成组织团块进而消化成单个细胞。这个过程中，细胞是逐步从组织上游离下来变成单细胞悬液的。现有的消化技术无法实时收集细胞和终止消化，使细胞生物学特性受到很大破坏，导致细胞贴壁率低，难以成活。生物制品领域在制备细胞种子和细胞培养时，通常会将细胞接种到微载体上，采用发酵罐培养。细胞发酵培养过程中最重要的是细胞的消化。而现有技术公开的各种发酵罐的排液口均在发酵罐的最底端的上方，细胞消化的时候，通常要用适宜的洗涤液洗涤细胞表面。将洗涤液排出需要先将微载体沉降，每次需要30分钟以上，一般需要洗涤3次，沉降微载体3次，非常耗时。细胞洗涤结束后，添加消化剂消化。因为发酵罐内细胞较多，加上发酵罐本身的构造导致无法肉眼判断消化进程。消化过程中需要多次取样，观察细胞状态。然而市售发酵罐的取样口都高于发酵罐的最下方，导致必须添加过量的消化液增加体积使得液位高于取样口才能取到样。众所周知，过量的消化液极易对细胞造成不可逆的损害，从而改变细胞生物学特性，导致细胞在后续培养过程中成活率低，甚至影响生物制品的质量。而细胞消化结束后，微载体和细胞同时沉淀无法有效分离，因此极难应用到细胞种子的制备。因此，迫切需要一种无需添加过量消化液就能方便取样、且无需沉降微载体就能快速排放溶液的高效细胞消化器。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种细胞消化器。本专利技术提供的一种细胞消化器，该细胞消化器由消化罐、用于支撑消化罐的支架、消化罐顶盖组成，所述消化罐包括罐体和罐底，罐底为收集液体的腔体，腔体的最下端设置排液口，罐体和罐底连接处水平设置一个可拆卸的筛网，所述筛网与罐体相配合，可以将微载体或杂质团块截留，使细胞流穿至罐底的腔体内；罐体外侧壁下方、且在罐体和罐底连接处的上方设置取样/回收口。所述的罐体为圆柱形，所述罐底的底面为下凹的弧形或三角形，罐底底面的最下端设置一个排液口。该排液口用于连接外部容器或设备，排液口与外部容器或设备连接的管道上有止水夹，用于控制液体的排放。本领域技术人员可以根据待截留物质直径选择适合孔径的筛网。所述消化罐的材质为玻璃或不锈钢。所述筛网的材质为不锈钢。所述取样/回收口用于消化过程取样、判断消化程度，还可用于回收微载体。所述的罐体外表面设有保温夹套，夹套外侧壁上方设有夹套出水口，夹套外侧壁下方设有夹套进水口。所述消化罐顶盖设有可拆卸的搅拌桨、搅拌马达和搅拌速度调节器；消化罐顶盖盖在消化罐上开始工作时，搅拌桨始终位于所述筛网的上方。搅拌速度调节器用于调节搅拌桨的搅拌速度。搅拌桨、搅拌电机和搅拌速度调节器通过信号输入、输出设备相连接。进一步地，搅拌桨为独立双层搅拌，上层搅拌桨为洗涤细胞时起重要搅拌作用。下层搅拌桨为细胞消化过程中进行搅拌，下层搅拌桨有孔，是为了减小搅拌对细胞的损伤，搅拌桨边缘为流线型。搅拌桨具有一定角度，可降低搅拌过程中的剪切力。所述消化罐顶盖设有待消化细胞进口、洗涤液或消化液进口、消化终止液进口、压缩空气进口、尾气排放出口、压力表连接口、备用口。所述备用口有若干个，可以连接pH调节装置，溶氧控制装置或温度控制装置。本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术在消化罐的罐体与罐底连接处设置的筛网可以有效截留组织团块和微载体，实现溶液快速排放，实现单细胞与组织团块或者微载体的分离，可以有目的的收集单一产物。对于细胞种子制备过程，大大减少了微载体作为杂质在细胞冻存过程中产生的不利影响，保证了细胞的纯度。(2)由于设置了可以截留微载体和细胞团块的筛网，使整个消化过程无需等待微载体沉降过程，大大缩短了细胞消化周期，并克服了现有技术中长时间沉降微载体带来的底层细胞受压的弊端，减少了生物反应器原位消化过程中存在的底层细胞受压迫，溶氧传质差等问题，使细胞处于相对较好的状态，有利于细胞成活率高，并促进细胞在新的体系中快速贴壁和增殖。(3)本专利技术在消化罐罐底的最底端设置了排液口，分离的细胞或溶液可通过排液口进入下一级容器或设备。连接排液口与下一级容器或设备的管道上有止水夹，可以控制液体排放。(4)本专利技术在罐体的外壁、罐体和罐底连接处的上方设置取样/回收口，该取样/回收口由于位于消化罐罐体的下方，可以在不额外增加消化液的同时，回收微载体和杂质团块，且可以随时取样以判断消化程度、是否达到终点。(5)本专利技术双层可拆卸式搅拌桨：在消化过程中可以充分搅拌，使消化液分布均匀，达到细胞均一消化，克服了原位消化由于消化液体积较小无法充分搅拌的问题。搅拌速度可以根据需要实时调节。搅拌桨具备一定的角度和流线型，可以保证在搅拌消化过程中剪切力小，降低能耗和成本。(6)本专利技术提供的细胞消化器确保整个细胞消化过程中始终处于封闭的无菌环境中进行单一消化，降低了细胞被污染的风险。附图说明图1为本专利技术细胞消化器结构图，其中1为排液口，2为筛网，3为取样/回收口，4为夹套进水口，5为搅拌桨，6为夹套出水口，7为消化罐顶盖，8为支撑消化罐的支架，9为搅拌电机。图2为本专利技术细胞消化器顶盖的结构简图，其中10为顶盖提手，11为洗涤液或消化液进口，12为待消化细胞进口，13为消化终止液进口，14为压力表连接口，15、18为备用口，16为尾气排放出口，17为锁紧螺栓，19为压缩空气进口。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1细胞消化器如图1所示，细胞消化器由消化罐、用于支撑消化罐的支架8、消化罐顶盖7组成，消化罐包括罐体和罐底，消化罐材质为不锈钢，罐底为收集液体的腔体，腔体的最下端设置排液口1，罐体和罐底连接处水平设置一个可拆卸的筛网2，筛网与罐体相配合，筛网的直径与圆柱形罐体的直径相同，可以将微载体或杂质团块截留，使细胞流穿至罐底的腔体内；罐体外侧壁下方、且在罐体和罐底连接处的上方设置取样/回收口3。罐底的底面为下凹的弧形或三角形，罐底底面的最下端设置一个排液口1。该排液口用于连接外部容器或设备，排液口与外部容器或设备连接的管道上有止水夹，用于控制液体的排放。本领域技术人员可以根据待截留物质直径选择适合孔径的筛网。筛网2的材质为不锈钢。取样/回收口3用于消化过程取样、判断消化程度，还可用于回收微载体。所述的罐体外表面设有保温夹套，夹套外侧壁上方设有夹套出水口6，夹套外侧壁下方设有夹套进水口4。消化罐顶盖设有可拆卸的搅拌桨5、搅拌电机9和搅拌速度调节器；消化罐顶盖盖在消化罐上开始工作时，搅拌桨始终位于筛网的上方。搅拌速度调节器用于调节搅拌桨的搅拌速度。搅拌桨、搅拌电机和搅拌速度调节器通过信号输入、输出设备相连接。进一步地，搅拌桨为独立双层搅拌，搅拌桨边缘为流线型。搅拌桨具有一定角度，可降低搅拌过程中的剪切力如图2所示，消化罐顶盖设有待消化细胞进口12、洗涤液或消化液进口11、消化终止液进口13、压缩空气进口19、尾气排放出口16、压力表连接口14、备用口15、18。备用口有若干个，可以连接pH调节装置，溶氧控制装置或温度控制装置。实施例2采用本专利技术的细胞消化器进行原代细胞(鸡胚成纤维细胞)制备1)在无菌环境下选取鸡胚腿肌、胸肌，去除表皮、血管和结缔组织。将待消本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞消化器，由消化罐、用于支撑消化罐的支架、消化罐顶盖组成，其特征在于，所述消化罐包括罐体和罐底，罐底为收集液体的腔体，腔体的最下端设置排液口，罐体和罐底连接处水平设置一个可拆卸的筛网，所述筛网与罐体相配合，可以将微载体或杂质团块截留，使细胞流穿至罐底的腔体内；罐体外侧壁下方、且在罐体和罐底连接处的上方设置取样/回收口。

【技术特征摘要】
1.一种细胞消化器，由消化罐、用于支撑消化罐的支架、消化罐顶盖组成，其特征在于，所述消化罐包括罐体和罐底，罐底为收集液体的腔体，腔体的最下端设置排液口，罐体和罐底连接处水平设置一个可拆卸的筛网，所述筛网与罐体相配合，可以将微载体或杂质团块截留，使细胞流穿至罐底的腔体内；罐体外侧壁下方、且在罐体和罐底连接处的上方设置取样/回收口。2.如权利要求1所述的细胞消化器，其特征在于，所述的罐体为圆柱形，所述罐底的底面为下凹的弧形或三角形，罐底底面的最下端设置一个排液口。3.如权利要求1所述的细胞消化器，其特征在于，所述的罐体外表面设有保温夹套，夹套外侧壁上方设有夹套出水口，夹套外侧壁下方设有夹套进水口。4.如权利要求1所述的细胞消化器，其特征在于，所述消化罐顶盖设有可拆卸的搅拌桨、搅拌电机和搅拌速度调节器；...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜德玉，姚志东，吴君兰，尚继领，薛峰，阴彦辉，谭剑，高强，尹卫东，
申请(专利权)人：北京科兴生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11