一种固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法。本发明专利技术利用固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法具体如下：首先制备重组枯草芽孢杆菌，构建L‑阿拉伯糖异构酶固定化酶催化剂；将重组枯草芽孢杆菌芽孢加入到D‑半乳糖反应液中，一定条件下振荡转化，得到D‑塔格糖。本发明专利技术构建一种新型的食品安全的固定化酶催化剂，并优化固定化酶合成D‑塔格糖的生物转化工艺，提高其转化率；其中，固定化酶催化剂的比活力高达2.10×10

【技术实现步骤摘要】
一种固定化酶催化剂生物合成D-塔格糖的方法
本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种固定化酶催化剂生物合成D-塔格糖的方法，特别涉及一种L-阿拉伯糖异构酶固定化酶催化剂转化D-半乳糖合成D-塔格糖的方法。
技术介绍
D-塔格糖是自然界存在的一种稀有己酮糖，它与蔗糖有相同的口感，甜度为蔗糖的92％，美国食品药品监督管理局(FDA)已经确认了其食品安全性(GRAS)。D-塔格糖作为低热量甜味益生元，代替蔗糖广泛应用于果汁、饮料、口香糖等食品领域，并且具有改善肠道菌群、治疗Ⅱ型糖尿病、降低胆固醇、预防结肠癌等功效；此外，D-塔格糖对于治疗贫血症等疾病有潜在的效果，也可用于抗氧化剂和细胞保护方面，在医药行业也具有广泛的应用。D-塔格糖在欧洲市场的份额逐年增加，据预测D-塔格糖将会以每年20％-50％的稳定速度增长。而国内D-塔格糖的生产消费市场还是空白。由于中国人口基数大，糖尿病患者高居世界首位，功能性甜味剂市场广阔，D-塔格糖在中国市场上的发展潜力极大。目前，D-塔格糖的生产有化学法和生物酶法两种，两种方法的底物均为D-半乳糖，而D-半乳糖可以通过水解乳清(脱蛋白乳清)或乳糖获得，而乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种固定化酶催化剂生物合成D‑塔格糖的方法，其特征在于，所述固定化酶为重组枯草芽孢杆菌芽孢表面存在的L‑阿拉伯糖异构酶，所述重组枯草芽孢杆菌芽孢即为构建的固定化酶催化剂，包括以下步骤：（1）制备重组枯草芽孢杆菌芽孢，并将其配成重组枯草芽孢杆菌芽孢悬浮液；（2）将一定量的重组枯草芽孢杆菌芽孢悬浮液加入反应液中，得到混合液；（3）将步骤（2）的混合液置于一定温度下振荡转化一段时间，得到含有D‑塔格糖的转化液。

【技术特征摘要】
1.一种固定化酶催化剂生物合成D-塔格糖的方法，其特征在于，所述固定化酶为重组枯草芽孢杆菌芽孢表面存在的L-阿拉伯糖异构酶，所述重组枯草芽孢杆菌芽孢即为构建的固定化酶催化剂，包括以下步骤：（1）制备重组枯草芽孢杆菌芽孢，并将其配成重组枯草芽孢杆菌芽孢悬浮液；（2）将一定量的重组枯草芽孢杆菌芽孢悬浮液加入反应液中，得到混合液；（3）将步骤（2）的混合液置于一定温度下振荡转化一段时间，得到含有D-塔格糖的转化液。2.根据权利要求1所述的固定化酶催化剂生物合成D-塔格糖的方法，其特征在于，步骤（1）中，重组枯草芽孢杆菌芽孢的制备方法为：将重组枯草芽孢杆菌在DSM培养基中37℃，160rpm条件下培养36h；8000rpm离心，将沉淀物重悬于pH6.5的磷酸缓冲液中，加入0.5%的溶菌酶，37℃处理1h；8000rpm离心收集沉淀物，并用1MNaCl和1MKCl洗涤后，8000rpm离心收集，得重组枯草芽孢杆菌芽孢。3.根据权利要求1所述的固定化酶催化剂生物合成D-塔格糖的方法，其特征在于，步骤（1）中，重组枯草芽孢杆菌芽孢悬浮液的浓度为0...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐向辉，张欢欢，员君华，杨苗苗，朱婧斐，田纳，张国艳，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32