一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法技术

本发明专利技术涉及医药领域产品利拉洛肽的合成方法。该方法采用固液相相结合的方法合成利拉洛肽产品。采用6+8的合成方式，先合成6肽片段，之后将片段偶联到固相树脂上，通过对Cys不同位置的保护基，在固相树脂上完成了三个二硫环的选择性合成，之后将其从树脂上切割下来，直接进行纯化，大大提高了合成效率及合成收率，同时极大的减少了三废的产生，同时大大降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法
本专利技术为多肽合成制备领域，特别涉及利拉洛肽的合成制备方法。技术背景：利拉洛肽结构式如下：L-cysteinyl-L-cysteinyl-L-glutamyl-L-tyrosyl-L-cysteinyl-L-cysteinyl-Lasparaginyl-L-prolyl-L-alanyl-L-cysteinyl-L-threonyl-glycyl-L-cysteinyl-L-tyrosine，cyclic(1-6)，(2-10)，(5-13)-tris(disulfide)。利那洛肽于2012年8月和2012年11月分别获得了美国FDA和欧盟EMEA批准上市。它是一种含有14个氨基酸的鸟苷酸环化酶C激动剂，它与肠道GC-C结合后，导致细胞内和细胞外鸟苷酸(cGMP)浓度升高。细胞内cGMP升高可以刺激肠液分泌，加快胃肠道移行，从而增加排便频率，细胞外cGMP浓度升高会降低痛觉神经的灵敏度、降低肠道疼痛。主要用于治疗便秘肠易激综合症(IBS-C)和慢性特发性便秘(CIC)，它是首个具有此种作用机制的治疗便秘的药物。原研专利US7304036未本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于：该方法采用6+8的合成方式，先合成6肽片段，之后将片段偶联到固相树脂上，通过对Cys不同位置的保护基，在固相树脂上完成了三个二硫环的选择性合成，之后将其从树脂上切割下来，直接进行纯化。

【技术特征摘要】
1.一种利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于：该方法采用6+8的合成方式，先合成6肽片段，之后将片段偶联到固相树脂上，通过对Cys不同位置的保护基，在固相树脂上完成了三个二硫环的选择性合成，之后将其从树脂上切割下来，直接进行纯化。2.根据权利要求1所述的一种采利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于：其具体步骤如下：A、片段缩合成各类利拉洛肽中间体，氨基酸保护基在下面赋予种类：（1）R-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;（2）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;（3）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;（4）R-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;（5）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-R3的合成;（6）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-R3的合成;（7）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3的合成;（8）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成;（9）R-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成;（10）R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3;（11）R-Cys(-S-S-)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(R1)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚键环；(12)R-Cys(-S-S-)-Cys(-S-S-)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(-S-S-)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚环基础上，2号位和10号位的两个半胱氨酸再成硫醚环；(13)R-Cys(-S-S-)-Cys(-S-S-)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(-S-S-)-Asn-Pro-Ala-Cys(-S-S-)-Thr(R4)-Gly-Cys(R1)-Tyr(R4)-R3的合成，1号位和6号位的两个半胱氨酸成硫醚环基础上，2号位和10号位的两个半胱氨酸再成第二个硫醚环，5号位和13号位的两个半胱氨酸形成第三个硫醚环；以上所述的各种保护氨基酸片段缩合后，形成的利拉洛肽各种中间体片段；其中：R为Z、Boc、Cl-Z、Fmoc、oNBS、dNBS、Troc、Dts、pNZ、oNZ、NVOC、NPPOC、HFA、Ddz、Bpoc、Nps、Nsc、Bsmoc、α-Nsmoc、ivDde、Fmoc*、MTT、Alloc其中任意一个；R1为Meb、Mob、TRT、Tmob、Mmt、Xan、Pmbf、Bn、tBu、Fm、Dnpe、Fmoc、Acm、Phacm、StBu、Npys、Alloc其中任意一个；R2为H、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb其中任意一个；R3为H、OMe、OEt、Otbu、Bn、cHX、Mpe、2-ph1pr、TEGbn、Damb、Al、pNB、pTMSE、Dmnb、wang树脂、CTC树脂其中任意一个；R4为Bn、cHx、tBu、Trt、TBDMS、Dmnb、Poc其中任意一个；B、全保护利拉洛肽的去保护；得到L-Cys-L-Cys-L-Glu-L-Tyr-L-Cys-L-Cys-L-Asn-L-Pro-L-Ala-L-Cys-L-Thr-Gly-L-Cys-L-Tyr，cyclic(1-6)，(2-10)，(5-13)-tris(disulfide)；C、利拉洛肽的纯化和冻干。3.根据权利要求2所述的利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于，8个多肽片段的合成过程中用到的偶联体系是：（1）单一缩合剂：DIC、DCC、EDC、氯乙酰氯、叠氮化物、TBTU、PyBOP、HBTU（2）二体系缩合剂：DIC/HOBT、DCC/HOBT、EDC/HOBT、DIC/HOSu、DCC/HOSu、EDC/HOSu（3）环合试剂：哌啶/DMF、H2O2/DMF、I2/DMF、DMSO/DMF、H2O2/H2O、I2/H2O、DMSO/H2O。4.根据权利要求2所述的利拉洛肽的固液相相结合的合成方法，其特征在于，所述的R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成方法如下：（1）、R-Cys(R1)-Cys(R1)-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-Cys(R1)-R3的合成采用纯液相合成，包含多种片段合成方法，具体片段如下：R-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3、R-Glu(R2)-Tyr(R4)-Cys(R1)-R3、R-Cys(R1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐峰，柳铎芳，谷海涛，苏军，孙美禄，王小涛，
申请(专利权)人：江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32