一种长效整合素抑制剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐及其应用。所述长效整合素抑制剂具有抑制肿瘤血管生成、整合素亲和性和结合能力整合素阻断剂，经修饰后的多肽衍生物能够显著延长多肽的半衰期；多肽衍生物及其可用药盐可用于实体肿瘤的预防和治疗。本发明专利技术设计的长效多肽衍生物科学、合理、可行有效，能作为制备治疗人类实体肿瘤的药物，为将来药物开发提供了新的思路和前景，具有显著的社会价值和市场价值。

A long effective integrin inhibitor and its application

The present invention relates to a long effective integrin inhibitor or its physiological acceptable salt and its application. The long-acting integrin inhibitors can inhibit tumor angiogenesis, integrin affinity and binding capacity of integrin antagonists, the modified peptide derivatives could significantly prolong the half-life of peptide; peptide derivatives and their available medicated salt can be used for the prevention and treatment of solid tumors. The long-acting polypeptide derivative designed by the invention is scientific, reasonable, feasible and effective, and can be used as a drug for the treatment of human solid tumors. It provides new ideas and prospects for future drug development, and has significant social and market value.

【技术实现步骤摘要】
一种长效整合素抑制剂及其应用
本专利技术涉及药物
，具体涉及一种整合素阻断剂经修饰后的多肽衍生物，该多肽衍生物可用于制备治疗或预防实体肿瘤。
技术介绍
整合素受体是介导细胞之间以及细胞与细胞外基质之间相互作用的跨膜细胞受体家族，其在细胞迁移、伤口愈合、免疫和非免疫防御机制、凝血和血管生成、细胞癌变中起着非常重要的作用。文献报道，αvβ3表达的升高与致癌性转化和肿瘤进展即人肿瘤细胞的侵袭和转移特性密切相关。在中国专利“ZL2005100403785高效抑制血管生成多肽及其制备方法和应用”中介绍几种整合素抑制剂，其一为整合素阻断剂多肽HM-3，其序列为：Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，该序列包含了整合素配体序列(Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp)和新生血管抑制序列(Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro)，其中整合素配体序列中含有RGD(Arg-Gly-Asp)序列，可以有效地结合于肿瘤特异性表达的整合素亚型，并且该序列中含有新生血管抑制序列，从而抑制肿瘤新生血管生成，进而达到抑制肿瘤生长和转移的效果。目前HM-3多肽已经开始临床试验，但由于其半衰期短，拟用临床人的给药是每天静脉滴注，给患者带来一定痛苦。故本专利技术对其进行了修饰，显著延长了其半衰期。对分子结构进行修饰或改造是解决半衰期短的常用方法，其中以化学修饰应用最为广泛。目前对蛋白质多肽进行的化学修饰，应用较多的是聚乙二醇、融合蛋白和水溶性多糖等高分子，虽然这些方法能够延长其体内半衰期，但是由于修饰后相对分子量大，亲水性强，难于同细胞膜及靶向组织结合等不足之处。近年来，脂肪酸修饰蛋白质多肽类药物越来越受到研究人员的关注。脂肪酸是构成细胞膜磷脂及人体脂肪与类脂的重要成分，直接参与了细胞膜的组成以及蛋白质配体与膜受体的结合，因此脂肪酸修饰更有助于提高药物的脂溶性、肠道黏膜透过性及吸收效率。另外，脂肪酸修饰可遮蔽蛋白质多肽分子易受酶进攻的区域，从而延缓或抑制蛋白水解酶的破坏作用；同时，脂肪酸在体内能与血浆白蛋白(humanserumalbumin，HSA)可逆性地结合，结合后的复合体在跨膜转运中因分子过大而受到限制，因此脂肪酸修饰可延长药物在体内的滞留时间。例如，以棕榈酸修饰的exendin-4(Ex4-C16)给ICR小鼠皮下注射，其可在小鼠体内存在长达10d之久，而未修饰的exendin-4(Ex4)则在2d左右被清除。近年来，基于靶向血清白蛋白的多肽长效化技术路线受到重视。该技术路线是将治疗性多肽经过部分修饰，该部分能够与血流中白蛋白上存在的功能团反应。将该修饰肽注射到血液后，它与血液中白蛋白结合，被吸附的治疗肽借助与血清白蛋白的可逆性结合作用，延缓降解，从而达到长效的目的。马来酰亚胺基团(Mal)是常用的巯基标记基团，即使在中性条件下马来酰亚胺基团也可以与生物分子中的巯基反应，形成硫醚键。经马来酰亚胺基修饰的多肽与血清白蛋白上的巯基结合而达到长效的效果。值得注意的是马来酰亚胺基团与体内血清白蛋白的巯基是特异性结合，其主要有两方面原因：1.白蛋白中34位Cys具有5.5的极低pK值，这比通常半胱氨酸残基的典型pK值8.0低得多。由于这个pK值低，在正常生理条件下，白蛋白中的Cys34大部分呈离子化形式，这就显著增强了其反应性。2.白蛋白中Cys34的位置，它位于紧靠白蛋白V区域一个环表面的疏水袋中，该位置使Cys34非常有利于接触各种类型的配体。另外白蛋白中只含有一个游离的巯基，所以修饰后多肽与白蛋白是1:1结合。其中马来酰亚胺基丙酸(MPA)用于制备长效多肽，且已应用于多种肽类品种，如利用Alloc保护的赖氨酸合成了经MIPA修饰的长效利钠肽(利尿降压药)衍生物；利用MIPA修饰合成了长效GLP-1肽；谢利用Fmoc-lys(Alloc)-OH经MIPA修饰合成了HIV融合抑制长效多肽FB006M。但是该技术路线并未见报道应用在整合素抑制剂方面，本专利技术将基于靶向血清白蛋白的多肽长效化方法应用到具有整合素抑制作用和抑制血管生成双重作用的HM-3上，不仅得到了长效化多肽衍生物，且意外的多肽衍生物抗癌活性有所提高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术中整合素阻断剂HM-3的血浆半衰期较短的问题，提供结构修饰方法得到多肽衍生物即长效整合素抑制剂。此多肽衍生物可以合成，也可以通过基因工程手段获得。所得多肽衍生物具有较好的抗肿瘤效果，具有抑制肿瘤血管生成、整合素亲和性和结合能力整合素阻断剂，经修饰后的多肽衍生物能够显著延长多肽的半衰期；多肽衍生物及其可用药盐可用于实体肿瘤的预防和治疗。血浆半衰期显著延长，便于提高患者适用性。本专利技术首先提供一种长效整合素抑制剂。本专利技术的技术方案如下：1、脂肪酸修饰。在整合素抑制剂Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp(即HM-3)的N端或C端连接含有不同长度碳链的脂肪酸，其序列通式为：Cn-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-Cn；所述Cn为不同长度碳链的脂肪酸。进一步地，所述Cn为C2-C20的脂肪酸；优选为C2、C4、C6、C8、C10、C12(月桂酸)、C14(肉豆蔻酸)、C16(棕榈酸)、C18(硬脂酸)、C20(花生酸)。具体地，所述整合素抑制剂序列为：C12-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C14-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C16-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C18-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C20-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-C12，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-C14，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Ar本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐，其特征在于，所述长效整合素抑制剂序列通式为：Cn‑Ile‑Val‑Arg‑Arg‑Ala‑Asp‑Arg‑Ala‑Ala‑Val‑Pro‑Gly‑Gly‑Gly‑Gly‑Arg‑Gly‑Asp，或Ile‑Val‑Arg‑Arg‑Ala‑Asp‑Arg‑Ala‑Ala‑Val‑Pro‑Gly‑Gly‑Gly‑Gly‑Arg‑Gly‑Asp‑Cn；所述Cn为不同长度碳链的脂肪酸。

【技术特征摘要】
1.一种长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐，其特征在于，所述长效整合素抑制剂序列通式为：Cn-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-Cn；所述Cn为不同长度碳链的脂肪酸。2.根据权利要求1所述的长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐，其特征在于，所述Cn为C2-C20的脂肪酸。3.根据权利要求1所述的长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐，其特征在于，所述Cn为C2、C4、C6、C8、C10脂肪酸，月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸中任一种。4.根据权利要求1所述的长效整合素抑制剂或其生理上可接受的盐，其特征在于，所述长效整合素抑制剂序列为：C12-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C14-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C16-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C18-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或C20-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp-C12，或Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹存彬，孔双泉，宋梦薇，马骉，
申请(专利权)人：北京赛升药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11