创伤弧菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了创伤弧菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法，该试剂盒由两对引物、ＤＮＡ聚合酶、稳定液、反应液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒应用六个区段，四条引物，根据是否扩增就能判断靶标物质的存在与否，因此具有高特异性。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒快速、高效、灵敏度高，只需一个恒定温度就能扩增反应，不需要特殊试剂与设备，检测成本低。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒鉴定简便，从ｄＮＴＰ析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Ｍｇ↑［２＋］结合，产生副产物－焦磷酸镁沉淀，可通过肉眼观察鉴定，并且加入显色液后，阴阳性结果显色差异显著，更加明显可靠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测试剂，具体涉及一种创伤弧菌基因快速诊断 试剂盒及其检测方法。
技术介绍
目前对创伤弧菌有多种检测方法，从以病原微生物分离鉴定、形 态学鉴定和自动生化鉴定，到特异蛋白的免疫学检测技术、核酸探针、聚合酶链式反应(PCR)技术等分子生物学捡测方法。其中病原核酸检测在快 速性、安全性、准确性和灵敏性等方面都有很大的提高，这些新技术 试图突破传统的形态学、生化反应等微生物学检测旧模式，不需要对 微生物进行分离提纯，而直接用扭品或样品的增菌液对其基因及基因 产物进行快速检测，并且与分子生物学技术及生物信息学手段相结 合，向准确、快速、灵敏和自动化的方向发展。以聚合酶链式反应(PCR)技术为代表的病原核酸检测技术在实 际应用中也存在一些问题，如普通聚合酶链式反应(PCR)技术需要 专门的仪器，而且存在容易交叉污染和操作过程烦琐的缺点。而荧光 实时定量聚合酶链式反应(real time PCR)技术虽然较好地解决了交 叉污染的问题，并简化了操作过程，但却需要更复杂的定量测定仪器，因此不适用于现场快速检测。而且实时定量聚合酶链式反应PCR技术 中荧光探针的成本较高，加大了推广应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种创伤弧菌基因快速诊断试剂盒，其特征在于由Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶、反应液、稳定液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上五种液体分别置于容器中，　反应液内两对引物为：　外引物Ｆ３：ＴＧＡＧＡＡＣＧＧＴＧＡＣＡＡＡＡＣＧＧ； 　外引物Ｂ３：ＧＡＧＣＴＴＡＴＣＧＣＣＴＴＣＣＣＡＡＴ；　内引物ＦＩＰ：ＡＧＧＣＣＣＣＡＡＡＣＴＴＧＧＴＴＣＣＡＡＴＴＴＴＴＴＧＣＧＧＧＴＧＧＴＴＣＧＧＴＴＡ；　内引物ＢＩＰ：ＡＧＣＣＧＡＧＴＲＧＣＡＴＣＣＧＡＴＣＧＴＴＴ ＴＧＣＴＡＡＧＴＴＣＧＣＡＣＣＡＣＡＣＴ；　每１Ｌ反应液中含有１．６～２ｍｍｏｌ　ｄＮＴ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹以诚，李志勇，杜正平，陈洵，谭惠媚，易敏英，
申请(专利权)人：广州华峰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]