本发明专利技术公开一种重组肽rLj‑112在制备协同肝素抗凝药物中的应用。本发明专利技术发现了重组肽rLj‑112具有与肝素特异性结合的特点，作为协同肝素抗凝药物，可有效强效延长肝素的凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）及活化部分凝血活酶时间（APTT），即rLj‑112起到了促进肝素抗凝的作用，同时重组肽rLj‑112不会导致出血等不良反应，可应用于制备肝素的协同抗凝药物。
The recombinant peptide rLj 112 in the preparation of synergistic application of heparin in drugs
The present invention discloses a recombinant peptide rLj 112 in the preparation of synergistic application of heparin in drugs. The present invention found 112 rLj recombinant peptide combined with heparin has the characteristics of specificity, as co anticoagulation drugs, can effectively extend the potent heparin thrombin time (TT), prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (APTT), rLj 112 plays a promoting role and heparin. The recombinant peptide rLj 112 does not lead to bleeding and other adverse reactions, can be applied to the preparation of synergistic anticoagulant heparin.
【技术实现步骤摘要】
重组肽rLj-112在制备协同肝素抗凝药物中的应用
本专利技术涉及一种重组肽rLj-112的用途，尤其是一种重组肽rLj-112在制备协同肝素抗凝药物中的应用。
技术介绍
富组氨酸糖蛋白（HRG）在血液中能够与纤溶酶原、纤维蛋白原及凝血酶敏感蛋白结合，通过替代纤维凝块中的纤维蛋白与凝血酶的结合而具有抗血栓功能。富组氨酸糖蛋白与凝血酶的结合与Zn2+浓度相关，并且这种结合是具有高度特异性的，如HRG与凝血因子XIIa具有高亲和性，并能够延长活化部分凝血活酶时间（APTT），但是对凝血因子XII、XI和XIa并不具有结合能力，说明HRG对内在凝血途径的调节也是具有特异性的，并且Zn2+能够促进这种调节作用[1]。HRG与纤维蛋白原（Fbg）的相互作用具有二价阳离子依赖性，但是在乙二胺四乙酸（EDTA）存在时能够解除二者的结合。人类HRG的富组氨酸区361-389蛋白水解片段能够与固定的纤维蛋白原结合，证明富组氨酸区负责HRG与纤维蛋白原的结合[2]。通过对结合位点的分析，发现HRG的富组氨酸区通过Zn2+介导其与Fbg1、Fbg2的结合，并且与Fbg2的酸性区域有更高的亲和性[3]。有报道称在人类中发现了家族性HRG先天性缺陷，这种先天性缺陷使半胱氨酸酶抑制剂样结构域中一个甘氨酸替代谷氨酸，导致HRG降低至正常水平的20%，而这种缺陷更容易发生血栓疾病，所以HRG缺陷与血栓形成相关[4]。某些疾病状态也会改变HRG水平，在败血症、心脏病和肝硬化等疾病的患者中测量的HRG水平，患者血浆中HRG的浓度降低，而急性心肌梗塞的患者血浆中HRG的浓度则升高[5]。在子痫前期的女性，可以检测到胎盘中HRG水平降低和纤维蛋白原水平提高，与怀孕期间的血管生成有关[6]。HRG缺陷的小鼠在稳定期没有严重的异常，并可以进行繁殖，同时HRG-/-小鼠的止血参数也没有任何重大缺陷。研究认为小鼠中HRG的靶向缺失可能导致抗凝血酶活性的提高、纤维蛋白原含量的提高和血小板凝血异常，缩短出血时间，雌性小鼠表现更为显著。HRG缺陷小鼠的外周血中的血小板数目减少，说明血小板的活化增强[7]。这些研究成果证明了HRG的抗凝作用。由于肝素具有带强负电荷的理化特性，能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。其作用机制比较复杂，主要通过与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合而增强AT-Ⅲ对活化的凝血因子Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ的抑制作用，最后导致血小板凝集的抑制作用、阻止凝血激活酶的形成、阻止凝血酶原变为凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白［1］。肝素是需要迅速达到抗凝作用的首选药物，可用于外科预防血栓形成以及妊娠者的抗凝治疗，对于急性心肌梗死患者，可用肝素预防病人发生静脉栓栓塞病，并可预防大块的前壁透壁性心肌梗死病人发生动脉栓塞等。肝素的另一重要临床应用是在心脏、手术和肾脏透析时维持血液体外循环畅通。肝素也用于治疗各种原因引起的弥散性血管内凝血（DIC）等。重组肽rLj-112是以rLj-RGD3为原型进行RGD缺失突变获得的基因重组肽，富含有17个组氨酸，不含有其野生型母本的RGD模体，其在一级结构上与马来线虫富含组氨酸糖蛋白（Histidine-richglycoprotein，HRG）有约40%同源性，与人HRG的富含组氨酸/脯氨酸结构域（His/Pro-richdomain）有约30%同源性。目前已证实其具有HRG蛋白所特有的抗真菌及抗肿瘤活性，并已获中国专利技术专利（ZL201310487361.9，ZL201110094370.2.）。但是，迄今为止并没有关于重组肽rLj-112在制备协同肝素抗凝药物中应用的相关报道。参考文献：[1]MacQuarrieJL,StaffordAR,YauJW,LeslieBA,VuTT,FredenburghJCandWeitzJI.Histidine-richglycoproteinbindsfactorXIIawithhighaffinityandinhibitscontact-initiatedcoagulation.Blood.2011;117(15):4134-4141.[2]VuTT,StaffordAR,LeslieBA,KimPY,FredenburghJCandWeitzJI.Histidine-richglycoproteinbindsfibrin(ogen)withhighaffinityandcompeteswiththrombinforbindingtothegamma'-chain.TheJournalofbiologicalchemistry.2011;286(35):30314-30323.[3]LijnenHR,HoylaertsMandCollenD.Isolationandcharacterizationofahumanplasmaproteinwithaffinityforthelysinebindingsitesinplasminogen.Roleintheregulationoffibrinolysisandidentificationashistidine-richglycoprotein.TheJournalofbiologicalchemistry.1980;255(21):10214-10222.[4]ShigekiyoT,YoshidaH,KanagawaY,SatohK,WakabayashiS,MatsumotoTandKoideT.Histidine-richglycoprotein(HRG)Tokushima2:novelHRGdeficiency,molecularandcellularcharacterization.Thrombosisandhaemostasis.2000;84(4):675-679.[5]LijnenHR,JacobsGandCollenD.Histidine-richglycoproteininanormalandaclinicalpopulation.Thrombosisresearch.1981;22(4):519-523.[6]KarehedK,WikstromAK,OlssonAK,LarssonA,OlovssonMandAkerudH.Fibrinogenandhistidine-richglycoproteininearly-onsetpreeclampsia.ActaobstetriciaetgynecologicaScandinavica.2010;89(1):131-139.[7]Tsuchida-StraetenN,EnsslenS,SchaferC,WoltjeM,DeneckeB,MoserM,GraberS,WakabayashiS,KoideTandJahnen-DechentW.Enhancedbloodcoagulationandfibrinolysisinmicelackinghistidine-richglycoprotein(HRG).Journalofthrombosisandhaemostasis:JTH.2005;3(5):865-872。
技术实现思路
本专利技术是发现了重本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种重组肽rLj‑112在制备协同肝素抗凝药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种重组肽rLj-112在...
【专利技术属性】
技术研发人员：王继红，吕莉，郑媛媛，肖蓉，宁淑香，
申请(专利权)人：辽宁师范大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。