一种新的多肽——人蛋白磷酸酶1调控蛋白13和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人蛋白磷酸酶１调控蛋白１３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人蛋白磷酸酶１调控蛋白１３的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人蛋白磷酸酶1调控蛋白13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。蛋白磷酸酶1是一个在脑中有重要功能的基因家族，其与很多不同的调节蛋白(调控亚基)结合决定了它可以在不同的亚细胞环境中作用，并有各异的酶作用底物。(J Comp Neurol 1999 Oct 25；413(3):373-84)蛋白磷酸酶1在体内的不同形式和功能是由于其催化亚基与不同的调节蛋白结合而造成的。(EMBO J 1997 Apr 15；16(8):1876-87)PP-1除了有磷酸化活性位点外，还存在二硫化物氧化还原位点，因此推测，PP-1还具有氧化还原酶的功能，但这一点还未得到证实。(FASEB J 1999Oct；13(13):1866-74)磷酸蛋白酶可以与钙调蛋白组成复合物调控细胞膜双分子层的融合，在胞吐过程中起重要作用。(Science 1999 Aug 13；285(5430):1084-7)脑中表达的蛋白磷酸酶的主要作用是帮助细胞骨架的形成和保持其完整性，相关的蛋白磷酸酶调节蛋白在此过程中的影响还有待进一步的生理学研究。(JNeurochem 1997 Sep；69(3):920-9)PP-1可与很多种调控蛋白结合共同作用，其中，PP-1的核结合因子(NIPPl)PP-1的较为常见的结合蛋白。研究结果表明，NIPPl-PP1复合物对前体mRNA的接合有重要调控作用。(J Cell Sci 1999 Jan；112(Pt 2):157-68)蛋白磷酸酶的肝糖相关调节蛋白(PP-1G)在胰岛素刺激的肝糖合成、骨骼肌中无氧条件下的葡萄糖分解等过程中起调控作用。通过插入突变的研究，可以发现，PP-1G的Asp905Tyr突变可以引起细胞对cAMP变得很敏感，并影响PP-1G对胰岛素刺激的肝糖合成过程的调节。(Mol Endocrinol 1999Oct；13(10):1773-83)；(Endocrinology 1997 Jun；138(6):2398-404)根据研究，NIPP1有核糖核酸内切酶功能域和RNA结合功能域，并且，这些功能域的定位已被证实。(Biochem J 1999 Aug 15；342(Pt 1):13-9)对蛋白磷酸酶1的一系列调控蛋白(调控亚基)的研究还不能完全阐明它们的结构和功能，但可以肯定的是，蛋白磷酸酶1的调控蛋白均对蛋白磷酸酶1有相关的活性调控作用。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本专利技术的多肽的表达谱与人蛋白磷酸酶1调控蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人蛋白磷酸酶1调控蛋白13。由于如上所述人蛋白磷酸酶1调控蛋白13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白磷酸酶1调控蛋白13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白磷酸酶1调控蛋白13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人蛋白磷酸酶1调控蛋白13以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶1调控蛋白13的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人蛋白磷酸酶1调控蛋白13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人蛋白磷酸酶1调控蛋白13的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人蛋白磷酸酶1调控蛋白13的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人蛋白磷酸酶1调控蛋白13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人蛋白磷酸酶1调控蛋白13异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中257-613位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1643位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人蛋白磷酸酶1调控蛋白13蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人蛋白磷酸酶1调控蛋白13蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人蛋白磷酸酶1调控蛋白13表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人蛋白磷酸酶１调控蛋白１３，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]