一种新的多肽--人逆转录酶9.13和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人逆转录酶９．１３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如胚胎发育畸形、肿瘤、糖尿病、月经失调、消化性溃疡、心律失常、贫血、癫痫等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人逆转录酶９．１３的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人逆转录酶9.13，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。逆转录病毒是一组遗传材料由单链RNA构成的病毒。在吸附并有逆转录病毒RNA进入宿主细胞后，病毒RNA就作为模板以合成互补DNA链。然后通过具有DNA多聚酶活性的一种酶作用，从而构成双链；这条双链DNA整合进入宿主基因组。由RNA引导的对自病毒RNA模板进行互补DNA合成具有DNA多聚酶活性的酶通常被称为逆转录酶。哺乳类逆转录病毒的逆转录酶一般为单亚基结构，这些病毒可以分为B，C，D三种类型。逆转录酶是一类非常复杂的酶，在其简单的一条肽链上具有多种酶活性，主要的酶活性有RNA引导的DNA多聚酶活性，DNA引导的DNA多聚酶活性，RNA酶H活性，DNA内切酶活性，DNA旋转酶活性，螺旋酶活性以及tRNA结合活性等(Verma，The Reverse Transriptase，Biochim.Biophys.Acta4731-38(1997))。第三种活性特异性降解RNADNA双螺旋中的RNA。由RNA酶H降解RNADNA中间体的RNA链是一些以转录为基础的扩增体系的一个重要成分，并可与因干扰扩增的污染性核酸酶引起的不需要的降解区分开来。现已发现有多种癌症与其他疾病是由一系列逆转录病毒引起的。有一种逆转录病毒，人免疫缺损病毒，是获得性免疫缺陷综合症(AIDS)即艾滋病的病原体。此外，逆转录酶因其本身具有几乎可自任何RNA模板生成互补DNA的能力，从而在分子生物学中成为重要的试剂，因而逆转录酶被广泛应用于杂交探针以生成核酸以及为随后的克隆与表达把单链RNA转化为双链DNA。近来，逆转录酶还被用作转录基础上扩增体系中的一种组分。这些体系扩增RNA及DNA靶序列至一万亿倍。人们已从多种不同的生物体内克隆得到了多种不同来源的逆转录酶，并对这些酶的结构域功能进行了研究。1995年，Littlejohn等人又从人中克隆得到了一新的人逆转录酶。该酶与已知的多种逆转录酶具有相似的结构及功能特征。其突变或表达异常与体内多种癌症、病毒引发的疾病的发生密切相关。本专利技术的逆转录酶与在人体内发现的逆转录酶在蛋白水平上有75％的同一性和92％的相似性，亦含有人逆转录酶家族其他成员所共有的各种特征性序列片段，且具有相似的生物学功能，故被认为是一种新的人逆转录酶，命名为人逆转录酶9.13。该蛋白在生物体内与引发多种癌症及其它疾病有关，该多肽及其抑制及激动剂拮抗剂可用与诊断及防治一系列由逆转录病毒引起的癌症例如艾滋病及其它疾病，在分子生物学研究中可被应用于杂交探针以生成核酸以及为随后的克隆与表达把单链RNA转化为双链DNA，还可被用作转录基础上扩增体系中的一种组分。由于如上所述人逆转录酶9.13蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人逆转录酶9.13蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人逆转录酶9.13蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人逆转录酶9.13以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人逆转录酶9.13的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人逆转录酶9.13的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人逆转录酶9.13的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人逆转录酶9.13的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人逆转录酶9.13的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人逆转录酶9.13异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少76％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中693-944位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1482位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人逆转录酶9.13蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人逆转录酶9.13蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人逆转录酶9.13表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人逆转录酶9本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人逆转录酶９．１３，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]