一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体及应用制造技术

本发明专利技术属于细胞生物技术领域，具体涉及一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体及应用，能够特异性结合143B的核酸适配体序列LP4：5’‑ ATCCAGAGTGACGCAGCAATGCGTGCGCGGCTCCACGCTATGATTAATTGGACACGGTGGCTTAGT‑3’。本发明专利技术所述核酸适配体具有高特异性、高亲和力、可体外合成及修饰、化学性质稳定、药代动力学性质佳、无免疫原性等特点，在研究骨肉瘤转移的转移性肿瘤标志物、转移性骨肉瘤的靶向诊断和治疗方面，以及在制备骨肉瘤转移的诊断试剂、治疗骨肉瘤转移的药物等方面具有广阔的应用前景。

A nucleic acid aptamer for targeting highly metastatic human osteosarcoma cells and its application

【技术实现步骤摘要】
一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体及应用
本专利技术属细胞生物
，具体涉及一种人高转移性骨肉瘤细胞的核酸适配体及其筛选方法和应用。
技术介绍
肿瘤转移是恶性肿瘤的重要生物学特性之一,也是肿瘤治疗失败的最根本原因。大约90%的恶性肿瘤患者死于肿瘤转移。骨肉瘤（Osteosarcoma）是青少年中最常见的原发于骨的恶性肿瘤，具有很高的全身转移倾向，大约20%的患者在初次诊断时已经发生肺转移，另外还有40%的患者晚期发生远处器官转移。目前，针对骨肉瘤的主要治疗措施是截肢以及手术前后的化疗、关键部位的放疗等，但无论是原发性骨肉瘤还是转移性骨肉瘤，对常规的化疗药物都具有耐药性，肿瘤耐药是骨肉瘤患者保肢手术治疗失败及发生转移的主要原因，而肿瘤发生转移是骨肉瘤患者死亡的主要原因。因此，准确地对骨肉瘤及其转移做出早期诊断和有效的抑制，并探求骨肉瘤特异性肿瘤标志物和特异性治疗靶点已经成为骨肉瘤治疗的关键。核酸适配体是一类有20～100个碱基的单链脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸，以其适宜的空间三维结构特异性识别靶标分子，并与之结合。近年来，核酸适配体以其尺寸小、稳定性高、成本低、易修饰、与靶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体，其特征在于，该核酸适配体LP4特异性结合高转移性人骨肉瘤细胞，其序列如下：5’‑ATCCAGAGTGACGCAGCAATGCGTGCGCGGCTCCACGCTATGATTAATTGGACACGGTGGCTTAGT‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体，其特征在于，该核酸适配体LP4特异性结合高转移性人骨肉瘤细胞，其序列如下：5’-ATCCAGAGTGACGCAGCAATGCGTGCGCGGCTCCACGCTATGATTAATTGGACACGGTGGCTTAGT-3’。2.根据权利要求1所述的一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体，其特征在于：在4℃、0.137MNa+、0.005MMg2+条件下的空间结构如下：。3.根据权利要求1所述的一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体，其特征在于：对所述的核酸适配体5’端进行FAM修饰。4.根据权利要求1～3任意一项所述的一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体的筛选方法，其特征在于：基于核酸适配体的体外SELEX筛选技术，以低转移性骨肉瘤细胞株U-2OS和正常骨细胞株hFOB1.19作为反筛细胞，以高转移性骨肉瘤细胞株143B作为正筛细胞，筛选出与高转移性骨肉瘤细胞株143B特异性结合的核酸适配体。5.根据权利要求4所述的一种用于靶向高转移性人骨肉瘤细胞的核酸适配体的筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)准备以下序列所示的单链DNA文库：5’-ATCCAGAGTGACGCAGCANNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNTGGACACGGTGGCTTAGT...

【专利技术属性】
技术研发人员：李娟，李佩佩，杨黄浩，王丽萍，陈元胜，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35