核酸、多肽和调节细胞凋亡的方法技术

鉴别哺乳动物组织局部缺血的发生的方法，该方法包含：　　　　ａ．测量组织中细胞凋亡－特异性的ｅＩＦ－５Ａ和增殖的ｅＩＦ－５Ａ的基因表达水平，　　　　ｂ．对比组织中细胞凋亡－特异性的ｅＩＦ５ａ的表达水平和增殖的ｅＩＦ－５Ａ的表达水平，　　　　ｃ．当细胞凋亡－特异性的ｅＩＦ５ａ的表达水平超过增殖的ｅＩＦ－５Ａ的表达水平时，与局部缺血的发生相关联。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及细胞凋亡(apoptosis)-特异性的真核起始因子-5A(eIF-5A)和脱氧8-羟-2，7，10-三氨基癸酸合酶(DHS)核酸和多肽和使用细胞凋亡-特异性的eIF-5A和DHS调节细胞凋亡的方法。
技术介绍
细胞凋亡是遗传程序性的细胞事件，其特征在于明确的形态特征，例如细胞收缩、染色质凝聚、核碎裂和膜起泡。Kerr等(1972)Br.J.Cancer，26，239-257；Wyllie等(1980)Int.Rev.Cytol.，68，251-306。它在正常的组织发育和内环境稳定中起重要作用，且认为细胞凋亡程序中的缺陷会导致许多人类病症，从神经变性病和自身免疫病到赘生物。Thompson(1995)Science，267，1456-1462；Mullauer等(2001)Mutat.Res，488，211-231。尽管充分地表征了细胞凋亡的细胞的形态特征，但对调节该过程的分子途径的阐明还仅仅处于开始阶段。认为在细胞凋亡中起关键作用的一组蛋白是称为天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的半胱氨酸蛋白酶家族，似乎大多数细胞凋亡途径都需要它。Creagh & Martin(2001)Biochem.Soc.Trans，29，696-701；Dales等(2001)Leuk.Lymphoma，41，247-253。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶通过剪切多种细胞蛋白来触发细胞凋亡，以响应细胞凋亡刺激，这导致细胞凋亡的典型表现，包括细胞收缩、膜起泡和DNA断裂。Chang & Yang(2000)Microbiol.Mol.Biol.Rev.，64，821-846。前细胞凋亡(pro-apoptotic)蛋白，例如Bax或Bak，也通过释放能活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的分子在细胞凋亡途径中起关键作用，所述的分子例如线粒体细胞色素c，由此通过细胞凋亡促进细胞死亡。Martinou & Green(2001)Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.，2，63-67；Zou等(1997)Cell，90，405-413。抗细胞凋亡蛋白，例如Bcl-2，通过拮抗前细胞凋亡蛋白Bax和Bak的活性来促进细胞的存活。Tsujimoto(1998)Genes Cells，3，697-707；Kroemer(1997)Nature Med.，3，614-620。认为BaxBcl-2的比率是决定细胞命运的一种途径；过量的Bax会促进细胞凋亡，而过量的Bcl-2会促进细胞存活。Salomons等(1997)Int.J.Cancer，71，959-965；Wallace-Brodeur & Lowe(1999)Cell Mol.Life Sci.，55，64-75。参与细胞凋亡的另一种关键蛋白是肿瘤抑制基因p53编码的蛋白。该蛋白是调节细胞生长和诱导受损的和遗传不稳定的细胞中的细胞凋亡的转录因子，可能是通过Bax的上调。Bold等(1997)SurgicalOncology，6，133-142；Ronen等，1996；Schuler & Green(2001)Biochem.Soc.Trans.，29，684-688；Ryan等(2001)Curr.Opin.Cell Biol.，13，332-337；Zrnig等(2001)Biochem.Biophys.Acta，1551，F1-F37。能表征经历细胞凋亡的细胞的独特形态特征已经产生了许多评价细胞凋亡的开始和进程的方法。可以用于它们的检测的细胞凋亡细胞的一个这种特征是外转酶的活化，这导致磷脂酰丝氨酸(通常定位于质膜内小叶的磷脂)的外化。Fadok等(1992)J.I mmunol.，149，4029-4035。通过用与荧光染料相缀合的磷脂酰丝氨酸结合蛋白膜联蛋白(Annexin)V进行染色，可以检测携带有外化的磷脂酰丝氨酸的细胞凋亡细胞。通过用荧光素标记的脱氧核苷酸标记暴露的DNA片段的3′-OH端，可以检测在细胞凋亡过程中发生的特征性的DNA断裂。能结合核酸的荧光染料，例如Hoescht 33258，可以用于检测细胞凋亡细胞的染色质凝聚和核碎裂。还可以从细胞提取物中存在的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的蛋白水解活性的程度推断出细胞群体中的细胞凋亡的程度。作为一种遗传上确定的过程，细胞凋亡与所有的其它发育程序一样，可以被突变破坏。据信细胞凋亡途径中的变化在许多疾病过程、包括癌症中起关键作用。Wyllie等(1980)Int.Rev.Cytol.，68，251-306；Thompson(1995)Science，267，1456-1462；Sen &D′Incalci(1992)FEBS Letters，307，122-127；McDonnell等(1995)Seminars in Cancer and Biology，6，53-60。关于癌症发展和进程的研究已经常规地集中在细胞增殖上。但是，细胞凋亡在肿瘤发生中所起的重要作用近来变得明显了。实际上，已经使用肿瘤模型研究了许多现在已知的关于细胞凋亡的内容，因为肿瘤细胞中的细胞凋亡的控制总是以某些方式发生变化。Bold等(1997)Surgical Oncology，6，133-142。在肿瘤发展的过程中，许多信号可以触发细胞凋亡。胞外信号包括生长或存活因子耗尽、低氧和电离辐射。可以触发细胞凋亡的内部信号包括DNA损伤、缩短端粒和能产生不合适的增殖信号的致癌突变。Lowe & Lin(2000)Carcinogenesis，21，485-495。认为电离辐射和几乎所有的用于治疗恶性肿瘤的细胞毒性化疗剂是通过触发内源的细胞凋亡机制以诱导细胞死亡来发挥作用的。Rowan & Fisher(1997)Leukemia，11，457-465；Kerr等(1994)Cancer，73，2013-2026；Martin & Schwartz(1997)Oncology Research，9，1-5。有证据表明，在癌症进程的早期，肿瘤细胞对能诱导细胞凋亡的试剂(例如电离辐射或化学疗法药)是敏感的。但是，随着肿瘤的发展，细胞产生了对细胞凋亡刺激的抗性。Naik等(1996)Genes andDevelopment，10，2105-2116。这可以解释为什么早期的癌症对治疗的反应比更晚期的病变更好。晚期癌症产生对化学疗法和放射治疗的抗性的能力似乎与能限制肿瘤细胞对细胞凋亡刺激作出反应的能力的细胞凋亡途径的变化有关。Reed等(1996)Journal of CellularBiology，60，23-32；Meyn等(1996)Cancer Metastasis Reviews，15，119-131；Hannun(1997)Blood，89，1845-1853；Reed(1995)Toxicology Letters，82-83，155-158；Hickman(1996)EuropeanJournal of Cancer，32A，921-926。在慢性淋巴细胞性白血病和结肠癌中，已经本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：J·E·汤普逊，C·泰勒，D·克利彻，C·迪纳雷洛，L·雷兹尼科夫，B·波梅兰茨，
申请(专利权)人：森尼斯科技术公司，
类型：发明
国别省市：