外切酶－纳米孔的单分子核酸测序方法技术

本发明专利技术涉及的是一种生物技术领域的外切酶－纳米孔的单分子核酸测序的方法。包括如下步骤：①单分子核苷酸的电信号检测，建立标准曲线；②将核酸固定在电泳槽负极，外切酶逐个降解核苷酸，穿越纳米孔时，膜片钳检测电信号；③根据标准曲线，将电信号转换为具体的核苷酸，根据外切酶的切割方向，获得靶核酸的碱基序列。本发明专利技术采用的是直径和孔深均可控制的单壁碳纳米管包埋于多聚物的筒型单纳米孔，硬度高、表面光洁、无静电，可耐受较高的电压、更经久耐用、信噪比更高，所以，对核苷和脱氧核苷一磷酸的识别准确性更高，本发明专利技术不仅可检测核苷和脱氧核苷５’一磷酸，还可检测核苷和脱氧核苷３’一磷酸，而且还可检测天然真核生物ＤＮＡ中的甲基化胞苷。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种外切酶－纳米孔的单分子核酸测序方法，其特征在于，包括如下步骤：①单核苷和脱氧核苷一磷酸以及ｄ↑［ｍｅｔ］ＣＭＰ的电信号检测，建立标准曲线；②ＤＮＡ／ＲＮＡ的酶切，单个核苷和脱氧核苷一磷酸穿越纳米孔，膜片钳记载电信号；③根据标准曲线，将电信号转换为具体的核苷酸，结合外切酶的切割方向，获得靶核酸的碱基序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王志民，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]