一种新的人红细胞生成素制造技术

一种人红细胞生成素的基因克隆及其在哺乳动物细胞中的表达方法，其特点是提取总ＲＮＡ，经逆转录合成ｃＤＮＡ的第一链，然后经聚合酶链反应扩增出编码人红细胞生成素的ＤＮＡ片段，将此ＤＮＡ片段与表达载体ＰＣＲⅢ相连接，得到重组质粒ｐＥ／Ｃ，将ｐＥ／Ｃ与质粒ｐＤＨＦＲ共转染二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ），得到用于表达人红细胞生成素的细胞株。本发明专利技术的细胞株具有传代稳定、表达量高等特点。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人红细胞生成素蛋白，其特征是：（１）ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表观分子量为３６～４５ＫＤ（２）肽链部分为　ＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＦＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＲＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＦＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（３）第１１３位氨基酸残基为Ａｒｇ（４）由ＣＨＯ细胞表达，为一糖蛋白。２．红细胞生成素蛋白的衍生物，其特征是：由权利要求１中的全部或部分氨基酸序列组成，具有人红细胞生成素活性，包括糖基化形式及非糖基化形式。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：娄丹，徐莉萍，邹钟诚，
申请(专利权)人：沈阳三生药业有限公司，
类型：发明
国别省市：21[中国|辽宁]