立体选择性的制备治疗酰胺的酶催化方法技术

本发明专利技术提供制备旋光活性式Ⅰ化合物酶催化方法，其中Ｘ、Ｅ和↑［＊］具有在说明书中定义的意义。本发明专利技术也提供用于制备式Ⅰ化合物的手性中间体和制备这些手性中间体的酶催化方法。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术范围本专利技术涉及合成药用化合物和在合成这样的化合物中所使用的中间体的方法。具体地讲本专利技术涉及立体选择性制备具有叔醇立体中心的N-芳基或-吡啶基丙酰胺，和用于合成这些化合物的对映中间体的新的酶催化方法。本专利技术背景1993年12月21日颁布给Russell等的美国专利5272163中公开了N-(4-苯甲酰苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺和其它的N-芳基或-吡啶基丙酰胺。这些化合物是细胞钾通道的启动剂(openers)并因此用于治疗尿失禁和其它疾病及紊乱，包括高血压、哮喘、外周血管疾病及咽峡炎，正如上述专利所公开的。美国专利5272163也公开了制备N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺的(S)-(-)对映体的方法，该方法应用非对映异构体的酯形成后进行层析分离，随后用碱处理除去酯基团。本专利技术概述本专利技术提供立体选择性制备具有叔醇立体中心的N-芳基或-吡啶基丙酰胺的新的酶催化方法，例如制备(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺。这些化合物是细胞钾通道的启动剂并因此用于治疗尿失禁和其它疾病及紊乱，包括高血压、哮喘、外周血管疾病和咽峡炎。本专利技术的新方法使用酶催化步骤选择性从N-芳基或吡啶基丙酰胺所形成酯的外消旋混合物的一个对映体上裂解酯基。酶催化步骤后，从如此所产生的醇中分离剩余的酯。在酶催化步骤中未被裂解的回收酯(若需要)可以水解产生相应的醇。本专利技术也提供用于合成上述N-芳基或-吡啶基丙酰胺的中间体的合成方法，例如在制备(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺中所使用的(S)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酸的制备。在此提供立体选择性合成具有叔醇立体中心的N-芳基或-吡啶基丙酰胺，例如(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺，及在合成这些化合物时使用的中间体的方法。在下列本专利技术详细描述的优选实施例中描述所附的权利要求书中本专利技术的各个方面。本专利技术详细描述本专利技术的第-个方面是提供制备具有旋光性的活性式Ⅰ化合物的方法 其中E选自氮和CZ，其中C是环碳，Z是下述定义的取代基，其中当E是CZ时，X和Z选自(A)X是ArY，其中Y为选自羰基、亚磺酰基和磺酰基的连接基团，Ar选自用选自卤素、羟基、氰基、C1-C4烷基和C1-C4烷氧基的0-2个取代基取代的苯基；含有1-2氮原子作为仅有的杂原子的六元杂芳环；含有选自氮、氧和硫的1-2杂原子的五元杂芳环，和Z选自氢、氰基、卤素、羟基、C1-C4烷基和C1-C4烷氧基；和(B)X是氰基，Z选自苯硫基，苯基亚磺酰基和苯磺酰基，其中苯环被选自卤素、羟基、氰基、硝基、C1-C4烷基和C1-C4烷氧基的0-2个取代基所取代；和当E是氮时，X独立选自任在上述(A)中给出的X的任何值；和*是具有旋光性的活性的手性中心，所述方法包括用水解酶处理式Ⅱ的外消旋化合物的步骤。式Ⅱ化合物定义如下式Ⅱ 其中E和X在此具有上述所定义的意义；和R1是由独立选自羟基、卤素、C1-C4烷氧基、氰基、C1-C4烷胺基和C1-C4二烷胺基的一个或多个取代基任选取代的烷基。优选为R1是任选取代的C1-C7烷基，更优选任选取代的C1-C5烷基。优选取代基为卤素，更优选氯。在本专利技术方法中，水解酶从式Ⅱ酯的一个对映体上裂解酯提供如式Ⅰ醇的(S)或(R)的对映体，这取决于酶的特异性，并将另一对映体留于未反应的底物中。本专利技术方法也包括从未反应的原料中分离在酶催化步骤中形成的产物的步骤，即，分离在酶处理中形成的式Ⅰ醇和式Ⅱ原料化合物的未反应酯。酶从式Ⅱ化合物的外消旋混合物的一个对映体中选择地裂解酯基生成醇。使用常规方法如硅胶柱层拆分离式Ⅰ化合物和式Ⅱ未反应的酯原料。当所需的对映体是未反应的酯时，本专利技术方法可以进一步包括将所述酯转化成相应的醇。通过用碱如氢氧化钠处理可将所述酯转化成相应的醇。本专利技术该方面的优选实施例将提供制备(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺(式Ⅰ其中*为(S)构型，E是CZ,X是ArY,Y是羰基，Ar是苯基，和Z是氢)的方法。使用本领域中所知的常规方法将外消旋的N-(4-苯甲酰苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺转化成酯。例如，使外消旋化合物在碱如三乙胺存在下与式Ⅲ酰氯反应式Ⅲ 其中R1具有上述定义的意义，如流程Ⅰ所示。优选式Ⅲ化合物包括一氯乙酰氯和丁酰氯。例如，使用美国专利5382598的方法或在此所述的方法可以制备外消旋的N-(4-苯甲酰苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺。然后使由N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺衍生的酯与水解酶反应，优选脂酶，更优选粗品猪胰脂酶，它选择地裂解(R)对映体的酯基，留下(S)对映体的酯。该反应优选在约pH7的缓冲水溶液中用叔-丁基甲基醚(MTBE)为共溶剂中进行。然而，可以理解缓冲溶液的pH将取决于反应中所使用的酶。在反应混合物中存在的共溶剂是任选的。使反应进行直到可用底物已反应为止，可能是约一天至约三天。该反应可进行快或慢取决于所使用的酶和反应条件。使用相反特异性酶在酶催化步骤中直接从(S)对映体裂解酯基也是可能的。流程1 (S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺通过一般方法如硅胶柱层析或任何其它适当方法可以从N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺的(R)对映体分离出(S)酯。当酯是(S)对映体时，用碱如氢氧化钠在甲醇水溶液或其它溶剂中处理除去酯基并提供(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺。本专利技术的该方面以合成(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺为例证。用流程Ⅰ所描述的方法，通过N-(4-苯甲酰苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺这样的化合物的取代外消旋混合物可以制备其它的式Ⅰ的N-芳基或-吡啶基丙酰胺。一些取代基可能需要使用保护基。根据美国专利5382598的方法可以制备式Ⅰ化合物的外消旋混合物。流程2表示(S)-(-)-N-(4-苯甲酰基苯基)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酰胺的制备，其中通过用拆分试剂选择性结晶而不是酶方法制备(S)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酸中间体。如流程2所示，使1,1,1-三氟丙酮(1)与氰化物如氰化钠在酸如盐酸的存在下反应，形成外消旋的3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙腈(2)。然后外消旋的3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙腈(2)用如盐酸或硫酸水解提供外消旋的3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酸(3)。然后用拆分试剂如(1R,2S)-降麻黄碱选择地结晶外消旋物(3)形成盐(5)，可以重结晶成非对映异构体纯度。纯化的盐(6)含有(S)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酸(7)。从盐释出(S)-3,3,3-三氟-2-羟基-2-甲基丙酸(7)与4-氨基二苯酮(8)和SOCl2，使用有机碱如三乙胺或Huni本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备具有旋光性的式Ⅰ活性化合物的方法＊＊＊其中Ｅ选自氮和ＣＺ，其中Ｃ是环碳，Ｚ是下述定义的取代基，其中：当Ｅ是ＣＺ时，Ｘ和Ｚ选自：（Ａ）Ｘ是ＡｒＹ，其中Ｙ为选自羰基、亚磺酰基和磺酰基的连接基团，Ａｒ选自：用选自卤素、 羟基、氰基、Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷基和Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷氧基的０－２个取代基取代的苯基；含有１－２氮原子作为仅有的杂原子的六元杂芳环；含有选自氮、氧和硫的１－２杂原子的五元杂芳环；和Ｚ选自氢、氰基、卤素、羟基、Ｃ↓［１］ －Ｃ↓［４］烷基和Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷氧基；和（Ｂ）Ｘ是氰基，Ｚ选自苯硫基，苯亚磺酰基和苯磺酰基，其中苯环被选自卤素、羟基、氰基、硝基、Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷基和Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷氧基的０－２个取代基所取代；和当Ｅ是氮时，Ｘ 独立选自任何在上述（Ａ）中给出的Ｘ；和＊是旋光活性的手性中心，所述方法包括用水解酶处理式Ⅱ外消旋化合物的步骤：式Ⅱ ＊＊＊其中Ｘ和Ｅ如上述定义，Ｒ↑［１］是由独立选自羟基、卤素、Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］烷氧基、氰基、Ｃ↓［１］ －Ｃ↓［４］烷胺基和Ｃ↓［１］－Ｃ↓［４］二烷胺基的一个或多个取代基任选取代的烷基。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：J克罗斯拜，RA霍尔特，JD皮特曼，
申请(专利权)人：曾尼卡有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]