单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法技术

本发明专利技术涉及单唾液酸四己糖神经节苷脂ＧＭ＃－［１］的制备方法。本发明专利技术采用短杆菌属（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｓｐ．）ＱＬ－１株，通过微生物转化方法，将神经节苷脂提取物中的其它组份发酵分解转化成ＧＭ＃－［１］，提供了一种收率高，成本低的ＧＭ＃－［１］的制备方法。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法。GM1是最重要的神经节苷脂之一，在中枢神经系统病变的治疗中起重要作用。GM1除具有上述神经节苷脂的共同作用外，还可以通过维持中枢神经细胞膜上的Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性，起到维持细胞内外离子平衡、减轻神经细胞水肿、防止细胞内Ca2+积聚的作用。因此GM1具有促进神经重构的作用，即通过促进各种形态、生物化学、组织化学、神经生理及行为参数的改善，最终可以加速神经细胞的修复，最大程度地恢复原有的神经功能。临床用于中枢神经系统(包括大脑和脊髓)的急性创伤或血管性损伤。神经节苷脂是一混合体，用动物脑组织分离制备的是含GM1的混合体神经节苷脂。传统的分离GM1方法是用硅胶柱从混合神经节苷脂中分离，操作步骤繁琐，耗时长，并消耗大量有机溶剂，其中提取的GM1含量仅为脑组织含量的万分之一，收率低，成本高。本专利技术公开的神经节苷脂GM1的制备方法包括下列步骤1.发酵菌种制备取冻干管藏菌种，接种于营养琼脂斜面培养基上，于37℃培养1天，取出于冰箱放置，取少量于营养琼脂液体培养基中，于37℃±1℃摇瓶培养1天，取出于冰箱中存储备用。2.GM1的制备取浓度为0.1％-10％分离GM1后的其它神经节苷脂原料，溶于水中，加入2-5％发酵菌种，调pH5-8，于32℃±5℃培养，3-5天后，薄层色谱法检测即得到发酵完全的GM1溶液，纯度达20％-65％，经层析得纯品。本专利技术制备GM1的发酵菌种为短杆菌属(Brevibacterium sp.)QL-1株，于2000年12月11日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC No.0522。该菌种是从齐鲁制药厂土壤中分离，经筛选并诱变后获得。本专利技术公开的GM1制备方法较现有方法提取率提高100％。该方法操作简便、成本低廉，为GM1大规模生产提供了可能。权利要求1.一种单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤(1)发酵菌种制备取冻干管藏菌种，接种于营养琼脂斜面培养基上，于37℃培养1天，取出于冰箱放置，取少量于营养琼脂液体培养基中，于37℃±1℃摇瓶培养1天，取出于冰箱中存储备用。(2)GM1的制备取浓度为0.1％-10％分离GM1后的其它神经节苷脂原料，溶于水中，加入2-5％发酵菌种，调PH6-8，于32℃±5℃培养3-5天即得，纯度达20％-65％，经层析得纯品。2.一种如权利要求1所述的单唾液酸四己糖神经节苷脂GM1的制备方法，其特征在于其中所用的发酵菌种为短杆菌属QL-1株。全文摘要本专利技术涉及单唾液酸四己糖神经节苷脂GM文档编号C12P19/44GK1415756SQ0113205公开日2003年5月7日 申请日期2001年10月30日 优先权日2001年10月30日专利技术者张丽莉, 李红英 申请人:齐鲁制药厂, 王安民, 张明会本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种单唾液酸四己糖神经节苷脂ＧＭ↓［１］的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤： （１）发酵菌种制备 取冻干管藏菌种，接种于营养琼脂斜面培养基上，于３７℃培养１天，取出于冰箱放置，取少量于营养琼脂液体培养基中，于３７℃±１℃摇瓶培养１天，取出于冰箱中存储备用。 （２）ＧＭ↓［１］的制备 取浓度为０．１％－１０％分离ＧＭ↓［１］后的其它神经节苷脂原料，溶于水中，加入２－５％发酵菌种，调ＰＨ６－８，于３２℃±５℃培养３－５天即得，纯度达２０％－６５％，经层析得纯品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽莉，李红英，
申请(专利权)人：齐鲁制药厂，王安民，张明会，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]