PTHrP类似物纳米粒制造技术

本发明专利技术涉及一种PTHrP类似物纳米粒。具体地，本发明专利技术公开了一种E34纳米粒及其制备方法，所述E34纳米粒包含E34和壳聚糖。本发明专利技术提供的E34纳米粒粒径均一，可显著提高E34对消化酶的稳定性和在模拟消化液中的稳定性，有用于E34口服给药的潜力。

PTHrP nanoparticles

The present invention relates to a PTHrP nanoparticle. In particular, the present invention discloses a E34 nanoparticle and a preparation method of the E34 nanoparticles including E34 and chitosan. The E34 nanoparticle provided by the invention is uniform in size, which can significantly improve the stability of E34 to digestive enzymes and the stability in simulated digestive juice, and has the potential for oral administration of E34.

【技术实现步骤摘要】
PTHrP类似物纳米粒
本专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及含有PTHrP类似物E34纳米粒及其制备方法。
技术介绍
E34是一种新型的甲状旁腺激素相关肽类似物(ParathyroidHormone-relatedPeptideAnalog,PTHrPAnalog)，可用于治疗骨质疏松症。甲状旁腺激素(ParathyroidHormone,PTH)是由甲状旁腺主细胞分泌的含有84个氨基酸残基的碱性单链多肽类激素，是人体内调节钙磷代谢及骨转换的最为重要的激素之一，它可以促使血钙水平升高，血磷水平下降。70年代，科学家成功合成了人PTH1-34，发现PTH氨基端的34个氨基酸决定了PTH片段的生物功能活性，并通过动物实验证实了人工合成的PTH无论是在体内还是体外均具有促进骨再生的生物效应。PTHrP和PTH的氨基端具有很高的同源性，两者不仅一级序列同源，在编码基因、分子结构上有许多相似之处，而且能与共同的受体PTHR1相结合。PTHR1属于G蛋白偶联受体超家族成员，主要分布于骨骼和肾脏。E34是在PTHrP1-34的氨基酸序列中改变了三个氨基酸，并将其末端羧基酰胺化，以提高药物的稳定性。E34生理功能与PTH1-34和PTHrP1-34类似，每日施用低剂量时，对成骨细胞的刺激作用比对破骨细胞强，使骨重量和骨质量净增加。E34为多肽类药物，目前已上市的相关产品是礼来公司于2002年推出的Forteo(teriparatide)注射剂，含rhPTH1-34，主要用于治疗更年期女性的骨质疏松症，每日皮下注射，t1/2为1h，需持续用药两年。长期反复注射给药给患者带来很大痛苦，使患者顺应性差，故蛋白质及多肽类药物的非注射途径给药，尤其是口服给药，已经成为一个热点问题。然而，由于大分子的一些不利性质，如易受酶降解，血浆半衰期短，渗透性差，易于聚合、吸附、变性等，使蛋白质和多肽的口服给药仍面临巨大的挑战。综上所述，为了扩大多肽E34制剂的临床应用，急需开发一种可以有效提高E34在消化道中稳定性的制剂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种E34纳米粒。本专利技术的目的是提供一种E34纳米粒的制备方法。本专利技术的第一方面提供了一种E34纳米粒，所述纳米粒包含E34和壳聚糖，其中，所述E34含有与SEQIDNO.:1所示氨基酸序列的95％-100％同源性的氨基酸序列。在另一优选例中，所述E34纳米粒中，壳聚糖作为载体，且所述E34负载于所述的壳聚糖。在另一优选例中，所述E34与壳聚糖的重量比为2:10-8:10。在另一优选例中，所述E34与壳聚糖的重量比为3:10-7:10，较佳地为4:10-6:10。在另一优选例中，所述壳聚糖的分子量为50-1000KD。在另一优选例中，所述壳聚糖的分子量为50、200、1000KD。在另一优选例中，所述E34纳米粒为混悬液或冻干制剂。在另一优选例中，所述混悬液中，壳聚糖的初始浓度为0.5-3mg/mL。在另一优选例中，所述壳聚糖溶液初始浓度为0.5-2mg/mL，较佳地为1mg/mL。在另一优选例中，所述混悬液中，E34的初始浓度为1-5mg/mL。在另一优选例中，所述壳聚糖溶液初始浓度为2-4mg/mL，较佳地为3-3.5mg/mL。在另一优选例中，所述纳米粒还含有离子交联剂。在另一优选例中，所述离子交联剂为三聚磷酸钠、四聚磷酸钠、六聚磷酸钠或八聚磷酸钠。在另一优选例中，所述壳聚糖与离子交联剂的重量比为1:1-10:1。在另一优选例中，所述壳聚糖与离子交联剂的重量比为3：1-8：1；较佳地为5:1-7:1；较佳地为6:1。在另一优选例中，所述纳米粒为口服制剂。本专利技术的第二方面提供了上述纳米粒的制备方法包括步骤：(1)分别配制壳聚糖溶液、E34溶液和离子交联剂溶液；(2)依次往壳聚糖溶液中滴加离子交联剂溶液、E34溶液，搅拌直至形成纳米粒混悬液；以及任选地(3)将步骤(2)获得的纳米粒混悬液冻干，从而得到纳米粒冻干制剂。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为实施例2-4制备得到的空白壳聚糖纳米粒的粒径分布图。图2为实施例5-6制备得到的空白壳聚糖纳米粒的粒径分布图。图3为实施例7-11制备得到的空白壳聚糖纳米粒的粒径分布图。图4为实施例12-15制备得到的空白壳聚糖纳米粒的粒径分布图。图5为实施例16-17制备得到的E34壳聚糖纳米粒的粒径分布图。图6为实施例16-17制备得到的E34壳聚糖纳米粒的胃蛋白酶降解曲线。图7为实施例18制备得到的冻干粉复溶后的粒径分布图。图8为实施例18制备得到的冻干粉中药物在模拟胃液中的稳定性。图9为实施例18制备得到的冻干粉中药物在模拟肠液中的稳定性。图10为实施例18制备得到的冻干粉中药物与原料药在模拟消化液中孵育10分钟时的剩余百分数比较。图11为实施例19-22制备得到的E34环糊精包合物溶液的胃蛋白酶降解曲线。图12为实施例23-25制备得到的E34囊泡的粒径分布图。图13为实施例23-25制备得到的E34囊泡的胃蛋白酶降解曲线。具体实施方式本专利技术人经过广泛而深入的研究，研发了一种包含壳聚糖作为载体的E34纳米粒，显著提高了原料药E34在模拟消化液中的稳定性以及对消化酶的稳定性，有利于发掘E34口服给药的潜力，且以壳聚糖作为载体，其效果显著优于其他载体。在此基础上，专利技术人完成了本专利技术。E34本专利技术所述的E34是指含有与SEQIDNO.:1所示氨基酸序列的95％-100％同源性的氨基酸序列。优选为SEQIDNO.:1所示氨基酸序列。E34纳米粒本专利技术提供了一种E34纳米粒，所述纳米粒包含E34和壳聚糖。在另一优选例中，所述E34与壳聚糖的重量比为2:10-8:10，较佳地为3:10-7:10，较佳地为4:10-6:10，更佳地为5.3:10。在另一优选例中，所述壳聚糖的分子量为50-1000KD，较佳地为50、200、1000KD。本专利技术所述E34纳米粒还含有离子交联剂(如三聚磷酸钠、四聚磷酸钠、六聚磷酸钠或八聚磷酸钠)。在另一优选例中，所述壳聚糖与离子交联剂的重量比为1:1-10:1；较佳地，为3:1-8:1，较佳地为5:1-7:1，较佳地为6:1。本专利技术所述的E34纳米粒可以为混悬液。可采用壳聚糖溶液和E34溶液制备此混悬液。所用壳聚糖溶液的初始浓度为1-3mg/mL，较佳地为1-2mg/mL，更佳地为1mg/mL。所用E34溶液的初始浓度为1-5mg/mL，较佳地为2-4mg/mL，更佳地为3-3.5mg/mL。本专利技术所述的E34纳米粒可以为冻干制剂。本专利技术所述的E34纳米粒可以为口服制剂。E34纳米粒的制备本专利技术所述的E34纳米粒可采用药剂学常规方法制备得到，也可采用本专利技术提供的方法制备，所述方法包括步骤：(1)分别配制壳聚糖溶液、E34溶液和离子交联剂溶液；(2)依次往壳聚糖溶液中滴加离子交联剂溶液、E34溶液，搅拌直至形成纳米粒混悬液。所述壳聚糖溶液由壳聚糖和醋酸配制。所述壳聚糖溶液的浓度为1-3mg/mL，较佳地为1-2mg/mL，更佳地为1mg/mL。所述E34溶液由E34和水(如纯水)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种E34纳米粒，其特征在于，所述纳米粒包含E34和壳聚糖，其中，所述E34含有与SEQ ID NO.:1所示氨基酸序列的95％‑100％同源性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种E34纳米粒，其特征在于，所述纳米粒包含E34和壳聚糖，其中，所述E34含有与SEQIDNO.:1所示氨基酸序列的95％-100％同源性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述E34与壳聚糖的重量比为2:10-8:10。3.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述壳聚糖的分子量为50-1000KD。4.根据权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述E34纳米粒为混悬液或冻干制剂。5.根据权利要求4所述的纳米粒，其特征在于，所述混悬液中，壳聚糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：张继稳，徐华强，李卓，李海燕，伍丽，郭桢，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31